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朱砂葉螨精氨酸激酶基因的克隆與表達(dá)特征

作者:王磊; 黃體冉; 李光棟; 安祥順; 楊金; 王曉; 胡帥; 王平平; 陳青 北京農(nóng)學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院農(nóng)業(yè)部華北都市農(nóng)業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 北京102206

摘要:【目的】擬克隆朱砂葉螨(Tetranychus cinnabarinus)精氨酸激酶基因,并分析其序列特征及表達(dá)模式,探討該基因在朱砂葉螨生長(zhǎng)發(fā)育、滯育及響應(yīng)溫度脅迫和紫外脅迫等方面的作用。【方法】通過RT-PCR技術(shù)和RACE方法,獲得朱砂葉螨精氨酸激酶cDNA全長(zhǎng)序列(TcAK),并進(jìn)行生物信息學(xué)分析,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)TcAK基因在不同發(fā)育階段、滯育狀態(tài)和溫度脅迫及紫外脅迫條件下的表達(dá)情況。【結(jié)果】結(jié)果表明,TcAK基因閱讀框架全長(zhǎng)1 071bp,編碼356個(gè)氨基酸殘基,含有典型的精氨酸激酶活性中心位點(diǎn)和底物結(jié)合區(qū)。TcAK基因在幼螨期和若螨期的表達(dá)量較卵期顯著增大,在幼螨期的表達(dá)量達(dá)到最大,遠(yuǎn)高于其他發(fā)育階段,而TcAK基因在成螨期的表達(dá)量較卵期下降。此外,滯育狀態(tài)、高溫/低溫脅迫、UV脅迫下朱砂葉螨的TcAK表達(dá)量均顯著升高?!窘Y(jié)論】朱砂葉螨精氨酸激酶與其生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān),并可能參與抵御外界不良環(huán)境。

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