摘要:目的探討雙特異性溶瘤腺病毒ATV引起人肺癌A549細(xì)胞凋亡與活性氧含量之間的關(guān)系。方法應(yīng)用本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的雙特異性溶瘤腺病毒ATV,通過CCK-8法檢測(cè)ATV對(duì)A549細(xì)胞增殖的抑制作用;通過Hoechst和Annexin V-FITC/PI流式檢測(cè)法檢測(cè)A549細(xì)胞的凋亡情況;通過人活性氧Elisa試劑盒測(cè)定A549細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。結(jié)果 CCK-8法檢測(cè)結(jié)果表明,ATV感染劑量為10 MOI和50 MOI作用時(shí)間為48 h和72 h時(shí),對(duì)A549細(xì)胞具有顯著性的抑制作用。Hoechst染色結(jié)果顯示,感染ATV的A549細(xì)胞呈現(xiàn)核碎裂典型的濃染和邊集現(xiàn)象,具備細(xì)胞凋亡的典型特征;Annexin V-FITC/PI流式檢測(cè)結(jié)果表明ATV在12、24、48、72 h均能誘導(dǎo)A549細(xì)胞不同程度的凋亡,并且凋亡率隨時(shí)間增長(zhǎng)而提高;胞漿活性氧檢測(cè)結(jié)果表明,ATV感染A549細(xì)胞12、24、48、72 h,A549細(xì)胞活性氧水平隨時(shí)間的增長(zhǎng)而提高,具有時(shí)間效應(yīng)。結(jié)論 ATV對(duì)A549細(xì)胞有抑制作用且該作用具有明確的時(shí)效與劑效關(guān)系;ATV通過使A549細(xì)胞內(nèi)活性氧含量增加引起細(xì)胞凋亡進(jìn)而發(fā)揮對(duì)A549細(xì)胞的抑制作用。
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