摘要：3C蛋白是塞內(nèi)加谷病毒重要的非結(jié)構(gòu)蛋白之一,在病毒入侵機制及影響宿主抗病毒天然免疫方面發(fā)揮重要作用。試驗應(yīng)用Oligo 7.0和Primer 6.0軟件,用BLAST對比SVV世界參考株,設(shè)計一對特異性引物。以SVV-SN株病毒液抽提RNA為模板,將序列連接pMD19-T載體后測序,對正確片段作生物信息學(xué)分析可知SVV 3C可編碼一個較穩(wěn)定非分泌型蛋白,具有一個保守“催化三聯(lián)體”。預(yù)測發(fā)現(xiàn)該蛋白具有16個磷酸化位點,證明其較高活性,預(yù)測其二級結(jié)構(gòu)后得到再次證實。將pMD19-SVV-3C和真核表達載體pcDNA3.1(+)雙酶切后連接,重組質(zhì)粒經(jīng)鑒定后命名為pcDNA3.1(+)-SVV-3C。將pcDNA3.1(+)-SVV-3C轉(zhuǎn)染到BHK-21細胞24 h后制樣作Western blotting,成功驗證該重組質(zhì)粒可在BHK-21中真核表達。相比其他同科病毒,當前SVV 3C蛋白研究存在空白。文章旨在為進一步研究SVV 3C蛋白結(jié)構(gòu)提供理論依據(jù),為后續(xù)探索SVV 3C蛋白對于宿主作用機制奠定基礎(chǔ)。