序論：在您撰寫血液分析儀溯源校準(zhǔn)和質(zhì)量控制研究時，參考他人的優(yōu)秀作品可以開闊視野，小編為您整理的1篇范文，希望這些建議能夠激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，引導(dǎo)您走向新的創(chuàng)作高度。

血液分析儀在臨床中有著非常廣泛的應(yīng)用，其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響臨床醫(yī)生對疾病的臨床診斷和治療。隨著儀器技術(shù)的進(jìn)步，血液分析儀變得越來越復(fù)雜，全血計數(shù)中的定量參數(shù)越來越多。近年正從單機(jī)檢測轉(zhuǎn)向流水線檢測，血液分析流水線由血液分析儀、推片染色機(jī)、糖化血紅蛋白血液儀、蛋白分析儀等檢測模塊通過軌道連接組成，可使用一管血、一次上機(jī)即可得到多個檢測的結(jié)果。為臨床檢驗(yàn)人員提供了高效快捷的工作流程，縮短了患者等候檢驗(yàn)報告的時間，極大地提高了臨床檢測效率。同時，檢測項(xiàng)目不再局限于血常規(guī)檢測，新增了HbA1c、CRP和SAA等聯(lián)合檢測功能，這也對檢測結(jié)果的溯源校準(zhǔn)提出了新的需求。邁瑞作為國內(nèi)最大的血液分析儀制造商，建立了完善的血液分析溯源體系，以保證用戶端臨床檢測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。血液分析儀的溯源標(biāo)準(zhǔn)化工作主要由ICSH（國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會）來推動，目前國際上已經(jīng)發(fā)布了多個參考方法，衛(wèi)生部已將這些參考方法轉(zhuǎn)化為行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)檢測結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)施。但參考方法運(yùn)行需要專門的儀器設(shè)備，并且速度慢、操作復(fù)雜，對人員操作要求高，如果由臨床實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行，費(fèi)時費(fèi)力。國內(nèi)外的法規(guī)都已明確要求制造商提供有溯源性的校準(zhǔn)品。本文詳細(xì)介紹了邁瑞血液分析儀溯源校準(zhǔn)和質(zhì)量控制的實(shí)施過程，內(nèi)部溯源傳遞始于制造商產(chǎn)品校準(zhǔn)品的值，止于所使用的計量上最高參考標(biāo)準(zhǔn)，通過不間斷地比較鏈溯源至目前最高級計量級別的參考級別的參考方法或參考物質(zhì)[1]。

1最高參考標(biāo)準(zhǔn)

1.1參考方法和參考實(shí)驗(yàn)室的建立

目前已建有WBC、RBC、HGB、HCT（MCV）、PLT、RET計數(shù)和白細(xì)胞分類7個參考方法，參考方法執(zhí)行過程中對儀器設(shè)備、試劑、人員、環(huán)境等均有嚴(yán)格要求。通用要求：環(huán)境要求18～25℃，人員經(jīng)過培訓(xùn)，考核合格后才能上崗操作。配制試劑均滿足臨床實(shí)驗(yàn)室I級用水；樣本稀釋使用硅硼玻璃的A級容量瓶；因血液有一定黏度，所有參考方法加樣使用正向置換式移液器，減少黏度的影響，準(zhǔn)確度為±0.5%，等等。紅細(xì)胞和白細(xì)胞參考方法：采用ICSH1994年發(fā)布的參考方法，使用單通道阻抗原理的半自動粒子計數(shù)器，通過梯度稀釋血液樣本，對結(jié)果進(jìn)行重疊校準(zhǔn)。使用的庫爾特粒子計數(shù)器小孔直徑為80～100μm，樣本檢測體積準(zhǔn)確度小于1%，溫度對體積的影響每攝氏度小于0.1%；每個樣本梯度稀釋4個水平，重復(fù)配制2次，對8個結(jié)果進(jìn)行直線回歸分析，回歸直線與Y軸的交點(diǎn)，代表樣本無限稀釋后，細(xì)胞可以一個一個通過小孔被檢測，即代表重疊校準(zhǔn)的計數(shù)值。例如，梯度稀釋的重疊校準(zhǔn)后，紅細(xì)胞參考方法結(jié)果為4.77，如圖1所示。血紅蛋白參考方法：采用了CLSIH15-A2發(fā)布的參考方法，使用氰化高鐵血紅蛋白法，在雙光束的分光光度計上進(jìn)行檢測。分光光度計狹縫寬度小于等于2nm；配對石英比色杯，內(nèi)徑為（1.000±0.002）cm。樣本重復(fù)稀釋2次，紅細(xì)胞溶解后，使用0.20～0.25μm的薄膜過濾器進(jìn)行過濾，排除氣泡雜質(zhì)等影響。檢測504nm、540nm、750nm波長下的吸光度。檢查氰化高鐵血紅蛋白溶液純度1.59≤A540nm/A504nm≤1.63，濁度A750nm≤0.003。計算540nm下血紅蛋白的濃度。紅細(xì)胞壓積參考方法：采用了CLSIH7-A3發(fā)布的參考方法，使用微量壓積離心機(jī)離心血樣后，在顯微鏡下使用游標(biāo)卡尺讀取紅細(xì)胞柱和全血柱的長度進(jìn)行計算，本方法未修正殘留血漿的影響。微量壓積離心機(jī)半徑大于8.0cm，離心5min轉(zhuǎn)子溫度不超過45℃。毛細(xì)胞符合美國材料實(shí)驗(yàn)協(xié)會的要求。血小板參考方法：采用了ICSH2001年發(fā)布的流式細(xì)胞儀法和WHO人工相差顯微鏡鏡檢法2個方法互相比對。流式細(xì)胞儀法準(zhǔn)確性高，但有受抗體質(zhì)量影響的風(fēng)險；鏡檢法準(zhǔn)確性差，但穩(wěn)定不受其他因素影響。使用CD41和CD61兩個抗體染料，檢測信號不少于5000個，得到紅細(xì)胞與血小板的比值，再乘以紅細(xì)胞參考方法的值，間接計算血小板值。網(wǎng)織紅細(xì)胞和白細(xì)胞分類參考方法：分別采用ICSH1998年發(fā)布的新亞甲藍(lán)法和CLSIH20-A中的人工鏡檢法。這2個方法對于血涂片的制備以及鏡檢人員的能力均有很高要求，所有的鏡檢人員均經(jīng)過長期的專業(yè)培訓(xùn)，考核合格后方上崗。參考實(shí)驗(yàn)室：為確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠，參考方法必須由參考實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行。邁瑞參考實(shí)驗(yàn)室按照ISO17025和ISO15195的要求[2-3]，建立了完善的質(zhì)量管理體系，并在2009年通過了中國合格評定國家認(rèn)可委員會（CNAS）認(rèn)可，保證了實(shí)驗(yàn)室參考測量技術(shù)能力的保持與提升。

1.2參考物質(zhì)

可溯源至參考物質(zhì)的項(xiàng)目包括HbA1c、CRP和SAA等?；Q性是參考物質(zhì)的重要屬性。當(dāng)參考物質(zhì)用于制造商溯源程序?yàn)楫a(chǎn)品校準(zhǔn)品定值時，首先必須驗(yàn)證是否具有互換性[4]。如果產(chǎn)品校準(zhǔn)品溯源至沒有互換性的參考物質(zhì)，將導(dǎo)致不同常規(guī)程序測量病人樣本沒有可比性。當(dāng)驗(yàn)證時發(fā)現(xiàn)沒有互換性，但已被證明在其他多個測量程序中是有互換性，可修正沒有互換性的偏差，并記錄使用和驗(yàn)證的詳細(xì)過程[1]。修正方案參考IFCC互換性工作組推薦的技術(shù)指南，包括開發(fā)和應(yīng)用沒有互換性偏差的特定修正因子和函數(shù)及其不確定度，以及在校準(zhǔn)層級中應(yīng)用修正步驟的位置，實(shí)現(xiàn)臨床結(jié)果到參考物質(zhì)的可追溯性[5]。

2溯源傳遞至產(chǎn)品校準(zhǔn)品的過程

2.1溯源傳遞及產(chǎn)品校準(zhǔn)品定值

針對每個項(xiàng)目都詳細(xì)定義溯源層級，并繪制溯源鏈。為減少測量不確定度，溯源過程應(yīng)盡量減少中間傳遞過程，盡可能直接溯源至參考測量程序或參考物質(zhì)。例如WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、PLT等項(xiàng)目均使用參考方法測試新鮮血，直接校準(zhǔn)血液分析儀標(biāo)準(zhǔn)測量程序，然后給產(chǎn)品校準(zhǔn)品定值。但如果參考測量程序或參考物質(zhì)有限，可以增加適當(dāng)?shù)墓ぷ餍?zhǔn)品。但在沒有合適的參考測量程序或參考物質(zhì)時，會建立內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，這種情況通常是新發(fā)現(xiàn)的分析物或是參考基準(zhǔn)建立困難的情況。但是無論是哪種情況下，都會確保臨床結(jié)果有適合的溯源校準(zhǔn)水平。此外，溯源傳遞設(shè)計的過程中也必須結(jié)合產(chǎn)品需要考慮被測量是否相同。例如CRP項(xiàng)目溯源，使用的參考物質(zhì)ERM474是血清中的CRP質(zhì)量濃度值，而流水線直接檢測的是全血中的CRP質(zhì)量濃度值，需要通過紅細(xì)胞壓積（HCT）建立血清體積和全血體積的修正因子，報告CRP血清濃度=CRP全血質(zhì)量濃度/HCT，其測量結(jié)果的溯源需合并CRP和HCT兩個溯源路徑。血液分析儀一體機(jī)CRP血清濃度溯源量值圖如圖2所示。

2.2產(chǎn)品校準(zhǔn)品定值

使用參考標(biāo)準(zhǔn)或工作校準(zhǔn)品校準(zhǔn)制造商標(biāo)準(zhǔn)測量程序，產(chǎn)品校準(zhǔn)品通過重復(fù)測量，計算平均值得到靶值，并評估測量不確定度。產(chǎn)品校準(zhǔn)品的不確定度應(yīng)包括所有較高計量水平的測量程序和參考標(biāo)準(zhǔn)的不確定度分量總和。

2.3儀器、試劑的質(zhì)量管理

儀器、試劑的制造質(zhì)量易受物料質(zhì)量、產(chǎn)品設(shè)計和生產(chǎn)制造水平等多種因素影響。邁瑞在設(shè)計開發(fā)時既充分考慮這些影響，為檢測系統(tǒng)的分析應(yīng)用和性能設(shè)定目標(biāo)，并在血液分析儀、試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的生產(chǎn)和設(shè)計過程中，對檢測系統(tǒng)進(jìn)行初始確認(rèn)，確認(rèn)方案參考CLSIH26-A2《自動血液分析的確認(rèn)、驗(yàn)證和質(zhì)量保證》和《ICSH血細(xì)胞分析儀包括用于微分白細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的評價指南》[6-7]而制定的。在實(shí)際工作中，會為每個檢測制定性能目標(biāo)，通過遵循嚴(yán)格的來料檢驗(yàn)、生產(chǎn)過程管理、出廠檢驗(yàn)等質(zhì)量體系管理要求，嚴(yán)格控制生產(chǎn)各個環(huán)節(jié)，確保出廠的血液分析儀臺間、試劑批間一致。血液分析儀使用的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品，包括EQA室間質(zhì)評樣本，因人血細(xì)胞保存困難，目前基本上都是經(jīng)過處理的人源細(xì)胞、動物源細(xì)胞、人工合成物質(zhì)模擬制備，所以無法避免基質(zhì)效應(yīng)的影響。所以在開發(fā)設(shè)計時會充分評估儀器型號間的差異，如果儀器型號間有明顯差異，會按儀器型號提供專有靶值，杜絕型號間差異對臨床結(jié)果的影響。而且筆者們也與衛(wèi)生部臨檢中心等EQA組織持續(xù)保持溝通，對有差異的型號分組進(jìn)行評價，避免對臨床儀器的錯誤評估。

3臨床實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化

檢測結(jié)果準(zhǔn)確是臨床診治的前提條件，理想情況下，同一患者樣本無論何時、何地，使用不同的血液分析儀檢測，測量結(jié)果都應(yīng)該一致，只可能受生物學(xué)變異的影響。為達(dá)到此目標(biāo)，最有效的手段就是減少分析過程中的誤差，包括溯源校準(zhǔn)、質(zhì)量控制兩大方面，這需要國際標(biāo)準(zhǔn)化組織、制造商和臨床實(shí)驗(yàn)室的共同努力。校準(zhǔn)通過調(diào)整儀器排除誤差，并通過質(zhì)量控制保證儀器校準(zhǔn)的穩(wěn)定性。血液分析儀投入使用前必須經(jīng)過校準(zhǔn)，并且每半年或有需要時進(jìn)行復(fù)校準(zhǔn)[8]，確保了檢測結(jié)果的溯源性。邁瑞提供的校準(zhǔn)品均滿足溯源性要求，并可為用戶提供規(guī)范的定期校準(zhǔn)服務(wù)；用戶端也可直接使用廠家配套的校準(zhǔn)品，按專有的校準(zhǔn)界面，自行進(jìn)行校準(zhǔn)過程。同時，邁瑞為臨床實(shí)驗(yàn)室積極開展質(zhì)量控制活動提供完善的配套服務(wù)，包括室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評，其中參加室間質(zhì)評費(fèi)用較高，且受周期的限制，每半年或1年才能評估儀器狀態(tài)。為突破以上限制，邁瑞配套推出了MRHCP廠家實(shí)時在線質(zhì)量控制平臺，利用室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室間比對。通過該平臺，不僅能夠方便地獲得室內(nèi)質(zhì)控統(tǒng)計報告，而且可以實(shí)時與全球多家實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行對比，評估儀器的準(zhǔn)確度、精密度，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室檢測能力的提升。除校準(zhǔn)和質(zhì)量控制的影響外，其實(shí)際檢測結(jié)果準(zhǔn)確性還受其他分析前、分析中、分析后很多環(huán)節(jié)的影響。在產(chǎn)品設(shè)計開發(fā)過程中，已充分考慮各種因素，確保在進(jìn)樣系統(tǒng)、故障報警、維護(hù)保養(yǎng)等程序設(shè)計時維持儀器的最佳使用狀態(tài)。如流水線的進(jìn)樣系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)樣本自動條碼掃描，并按檢測項(xiàng)目自動調(diào)配上機(jī)，避免了樣本進(jìn)樣錯誤。

4測量不確定度

測量結(jié)果的計量溯源性通過測量程序和校準(zhǔn)物質(zhì)交替的不間斷比較鏈（比較鏈可逐級向上減少測量的不確定度），實(shí)現(xiàn)計量學(xué)上的溯源性。某校準(zhǔn)物質(zhì)由給定校準(zhǔn)水平的測量程序定值，應(yīng)同時評估測量不確定度，此不確定度應(yīng)包括所有較高計量水平的測量程序和參考標(biāo)準(zhǔn)的不確定度分量總和，即測量不確定度從上至下逐級增大，因此溯源過程應(yīng)盡量減少中間傳遞過程。測量不確定度越小，表明實(shí)驗(yàn)室測量的質(zhì)量和能力越高。邁瑞所有檢測系統(tǒng)均提供有溯源性、帶有測量不確定度的配套產(chǎn)品校準(zhǔn)品，用于臨床儀器校準(zhǔn)，其中把測量不確定度作為靶值的一部分同時提供給用戶，包括所有較高計量水平的測量程序和參考標(biāo)準(zhǔn)的不確定度分量總和。由于對溯源過程非常了解，筆者們采用“自下而上”的方法評定的測量不確度，全面分析識別出每一個可能的測量不確定度來源，對重要的不確定度分量進(jìn)行評估并合成校準(zhǔn)品的測量不確定度。為保證臨床結(jié)果準(zhǔn)確性，其測量不確度要求小于臨床要求的1/3。

5結(jié)束語

制造商在檢測結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化中扮演著重要的角色，每個制造商均建立有效的溯源傳遞，將有助于臨床檢測結(jié)果互認(rèn)。制造商負(fù)責(zé)提供校準(zhǔn)品和正確度控制品，作為體外診斷檢測系統(tǒng)的一部分，與儀器、試劑共同使用。邁瑞不僅建立了完善的溯源體系，同時指導(dǎo)用ERM-DA474/IFHCT參考方法CC制造商選定測量程序新鮮血工作校準(zhǔn)品血液分析儀標(biāo)準(zhǔn)測量程序血液分析儀標(biāo)準(zhǔn)測量程序產(chǎn)品校準(zhǔn)品CRP產(chǎn)品校準(zhǔn)品血液分析儀血液分析儀HCT結(jié)果CRP全血質(zhì)量濃度計算CRP血清質(zhì)量濃度（CRP全血質(zhì)量濃度濃度/HCT）戶端校準(zhǔn)和質(zhì)量控制的應(yīng)用，在檢測結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化中履行了自身的職責(zé)。

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作者:楊紅瑋 單位:深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司