摘要:Bt殺蟲最重要的2個(gè)環(huán)節(jié)是原毒素在昆蟲中腸的有效酶解和酶解后活性片段與中腸受體的特異性結(jié)合.在前期工作中已發(fā)現(xiàn)部分Bt毒素可被茶小綠葉蟬腸液有效酶解成相應(yīng)活性片段.為進(jìn)一步了解茶小綠葉蟬是否存在相應(yīng)受體或受體是否能與毒素結(jié)合,從受體的角度展開研究.首先,分析前期獲得的茶小綠葉蟬轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)該蟲存在大量ALP、APN和Cadherin潛在受體基因,篩選部分候選基因,通過RT-qPCR驗(yàn)證表達(dá)量差異,結(jié)果顯示其與轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)一致;其次,通過表達(dá)分析數(shù)據(jù)中的FPKM值,篩選出這3類潛在受體基因中表達(dá)量高且在腸內(nèi)外表達(dá)差異顯著的基因,有8個(gè)ALP、7個(gè)APN、8個(gè)Cadherin;再次,通過構(gòu)建NJ進(jìn)化樹對(duì)這23個(gè)候選基因種內(nèi)同源性進(jìn)行分析,為該蟲的生物防治提供一定理論基礎(chǔ).
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