摘要:目的建立人主動脈夾層(AD)血管平滑肌細胞(VSMC)體外培養(yǎng)的方法。方法以AD患者手術時切除的血管為原料,用組織塊貼壁法進行VSMC的體外原代和傳代培養(yǎng),倒置顯微鏡觀察細胞的生長情況,考馬斯亮藍染色、α-SMA及Ⅷ因子免疫熒光染色和透射電鏡檢測鑒定細胞。結果7~10d原代細胞從組織塊邊緣遷移出來,3~4周細胞生長至融合,可進行傳代。原代和傳代的細胞生長良好,倒置顯微鏡下見細胞呈長梭形,有多個突起。細胞呈"峰谷狀"生長,具有典型的VSMC特征??捡R斯亮藍染色和透射電鏡下均可見細胞內有大量沿長軸生長的肌絲,α-SMA免疫熒光染色強陽性,Ⅷ因子免疫熒光染色陰性,證明所培養(yǎng)的細胞為VSMC。細胞傳代至第6代以后開始出現(xiàn)老化現(xiàn)象。結論應用組織塊貼壁培養(yǎng)的方法可成功地在體外培養(yǎng)人AD的VSMC,為今后研究AD的發(fā)病機制提供良好的實驗基礎。
注:因版權方要求,不能公開全文,如需全文,請咨詢雜志社