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獼猴桃Cu/ZnSOD的克隆及其在果實貯藏中的表達分析

作者:馮新; 賴瑞聯(lián); 高敏霞; 陳文光; 吳如健; 陳義挺 福建省農(nóng)業(yè)科學院果樹研究所·福建省落葉果樹工程技術(shù)研究中心; 福州350013

摘要:【目的】探討獼猴桃Cu/ZnSOD的序列特征及其在不同組織部位與果實貯藏中的表達特征,豐富超氧化物歧化酶與果實采后品質(zhì)關(guān)系的研究。【方法】以‘米良1號’獼猴桃為材料,采用RT-PCR法克隆得到2個Cu/ZnSOD家族成員,分別命名為AdCSD1和AdCSD2,通過生物信息學軟件分析序列特征、功能結(jié)構(gòu)域、基因結(jié)構(gòu)及系統(tǒng)進化關(guān)系,應用qRT-PCR技術(shù)研究它們在不同組織部位、不同貯藏溫度和激素處理后的表達模式。【結(jié)果】AdCSD1和AdCSD2的開放閱讀框分別為459和621 bp,分別編碼152和206個氨基酸,登錄號分別為MF034869和KY471357。生物信息學分析結(jié)果表明,AdCSD1和AdCSD2對密碼子選擇偏性不強,均編碼具親水性的穩(wěn)定酸性蛋白,且包含完整的Cu/ZnSOD結(jié)構(gòu)域和保守的Cu2+/Zn2+結(jié)合位點。AdCSD1和AdCSD2的外顯子內(nèi)含子組成不同,且它們的序列一致性較低,在系統(tǒng)進化樹中位于2個不同的分支,可能源自不同的基因祖先。AdCSD1和AdCSD2在獼猴桃各組織部位(根、莖、葉、花、幼果和成熟果)均有表達,但表達水平不同。獼猴桃果實中AdCSD1和AdCSD2在4℃低溫貯藏過程中的表達量均比25℃常溫貯藏中同期的表達量低;它們在脫落酸處理后的表達均下調(diào),而在赤霉素處理后的表達模式不同?!窘Y(jié)論】AdCSD1和AdCSD2均參與獼猴桃各組織部位活性氧的清除,且在果實低溫貯藏中的表達受到抑制,但它們對外源脫落酸和赤霉素的應答模式不同。

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