時間：2023-06-16 16:27:23
序論：在您撰寫神經(jīng)生物學綜述時，參考他人的優(yōu)秀作品可以開闊視野，小編為您整理的7篇范文，希望這些建議能夠激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，引導您走向新的創(chuàng)作高度。
【關鍵詞】 益智寧神口服液/藥理學;抽動—穢語綜合征/中藥療法;神經(jīng)遞質;疾病模型，動物;大鼠;色譜法，高壓液相
抽動—穢語綜合征(Tourette syndrome，TS)，又稱多發(fā)性抽動癥，是一種兒童期發(fā)病的慢性神經(jīng)精神障礙性疾病。臨床表現(xiàn)主要為突然、快速、反復、非節(jié)律性、不自主和刻板的運動性抽動和發(fā)聲性抽動，還可能伴有各種行為紊亂、強迫觀念與行為、認知障礙等，可不同程度地干擾和損害兒童的認知功能，影響社會適應能力。本病病因尚未明確，具有明顯的遺傳傾向，多見于4～12歲的兒童，患病率約為005%～3%，近年來發(fā)病呈明顯上升趨勢，男孩多于女孩[1]。廣東省中醫(yī)院兒科在臨床實踐中運用自擬方益智寧神口服液治療該病，取得了較好的療效[2]。本實驗應用亞氨基二丙腈腹腔注射建立抽動—穢語綜合征模型大鼠，觀察該藥對模型大鼠行為學和神經(jīng)生物學的影響，現(xiàn)報道如下。
1材料與方法
11實驗動物SPF級SD大鼠60只，28～30d齡，體質量(250±10)g，雌雄各半。由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供(許可證號:粵監(jiān)證字2008D006，批號：0037766)。
12實驗藥品亞氨基二丙腈(iminodipropionitrile，IDPN)購自Alfa Aesar公司(批號：C7323A)，中藥益智寧神口服液(由廣東省中醫(yī)院提供，批號：080201)，對照藥物為氟哌啶醇(上海信誼九福藥業(yè)有限公司，批號：08031121)。
13儀器及試劑LC26A 型高效液相色譜儀、SPD26AV 熒光檢測器、C2R4A 數(shù)據(jù)處理機均為日本島津公司產(chǎn)品，脫水機、包埋機、切片機和生物顯微鏡等設備為德國Leica公司產(chǎn)品，微量組織勻漿器為Millipore公司產(chǎn)品，ZH藍星C/s型腦立體定位儀，高氯酸、乙二胺四乙酸二鈉(EDTANa2)均為分析純，甲醇為色譜純，對照品由中國藥品生物制品所提供。
14模型復制參考Wakata[3]的方法，將亞氨基二丙腈溶解于生理鹽水，稀釋成濃度100mg/mL，給藥途徑為腹腔注射，劑量為150mg·kg-1·d-1，每天1次，共用7d。
15分組及給藥選用SD大鼠隨機分為4組：空白組和模型組各10只，中藥組和西藥組各20只，每組均雌雄各半。治療組在造模后第2天開始給藥，中藥組按20kg的兒童每天口服20mL益智寧神口服液的比例計算，每只大鼠灌胃約2mL/d;西藥組按20kg的兒童每天口服氟哌啶醇片1mg的比例計算，每只大鼠灌胃約015mg/d，連續(xù)14d。
16大鼠行為觀察[4]采用觀察評分，每次至少觀察1h，主要誘發(fā)癥狀為運動行為和刻板運動。(1)運動行為評分：0分：安靜或正?；顒?1分：能過度興奮;2分：探究行為增加;3分：跑;4分：跑和跳;(2)刻板運動(或定型運動)評分：0分：無刻板運動;1分：旋轉行為;2分：頭和頸部的上下運動過多;3分：頭、頸部的上下運動過多加旋轉行為;4分：頭向側擺合并頭和頸部的上下運動過多。
17神經(jīng)遞質水平檢測[5]第14天將所有實驗大鼠迅速斷頭處死，借助腦立體定位儀，取右腦海馬組織及邊緣系統(tǒng)(包括紋狀體、隔核、層殼核、基底節(jié)、齒狀回)，精確稱質量，置入1mL處理液(含01mol/L高氯酸和05g/LEDTANa2)中，微量組織勻漿器冰溶下勻漿，4℃冰凍離心10000r/min，取上清液置入-20℃保存。采用高效液相色譜法測定多巴胺(DA)和去甲腎上腺素(NE)濃度。測樣時，室溫下解凍，進樣20μL，以峰面積外標法定量。
18統(tǒng)計學方法采用SPSS130和SAS913版本進行統(tǒng)計學處理和分析，各組神經(jīng)遞質水平檢測數(shù)據(jù)分別進行方差齊性和正態(tài)分布檢驗，方差不齊采用秩和檢驗，檢驗水平α=005。
2結果
21各組行為學觀察和評分各組治療前后運動行為和刻板運動積分見表1。模型組行為學評分與空白組比較，差異有顯著性意義(P
治療14d后，中、西藥組運動行為積分和刻板運動積分降低，與模型組比較差異有顯著性意義(P
22各組治療前后腦組織DA、NE含量變化比較表2結果顯示：模型組腦組織DA水平降低，NE水平升高，與空白組比較差異均有顯著性意義(P
3討論
IDPN是一種中樞神經(jīng)毒素，50年代以后就用于神經(jīng)病理學的研究，本研究參考Wakata[3]的方法復制模型，從神經(jīng)生物學和行為學兩方面觀察藥物治療對TS模型動物臨床行為學典型特征的影響。IDPN誘發(fā)TS模型大鼠出現(xiàn)明顯刻板運動和運動行為異常，如過度興奮、探究行為、異常跑跳、旋轉行為和頭頸部上下側擺等動作均具有TS臨床行為學的典型特征，有時出現(xiàn)連續(xù)的嗤鼻、抬舉上肢等動作，類似于人類TS患兒喉部發(fā)聲、聳肩等特征行為。本研究通過對藥物治療前后TS模型大鼠運動行為和刻板運動行為評分的比較，發(fā)現(xiàn)中藥組在改善動物TS典型特征行為方面效果明顯，如頭部、頸部的抽動減輕，旋轉行為明顯緩解，每次異常行為發(fā)作持續(xù)時間縮短，異常抽動次數(shù)消失，異常跑動及不規(guī)律的彈跳運動明顯減少。
雖然目前對TS的神經(jīng)生物學物質基礎還未完全闡明，但基本認為中樞神經(jīng)遞質，特別是DA、NE、5-羥色胺(5HT)等與TS之間關系密切[5]，因此，探討大腦多巴胺類神經(jīng)遞質及其代謝產(chǎn)物的水平是證明藥物神經(jīng)生物學療效的主要依據(jù)。本研究對大腦海馬區(qū)DA和NE水平進行測定，結果表明：治療后中藥組DA水平明顯升高，而NE水平有所下降，均趨向于正常水平。與TS有關的神經(jīng)遞質包括乙酰膽堿、腎上腺素、5HT、多巴胺等，主要分布于紋狀體、隔區(qū)、藍斑、黑質等海馬、基底前腦及邊緣系統(tǒng)，構成復雜的神經(jīng)網(wǎng)絡[6-8]。有關藥物治療對大腦組織不同部位和核團神經(jīng)遞質水平的影響文獻報道并不一致，而且與檢測時間點有很大關系[8]。本研究結果初步表明，中藥治療14d后，對大腦組織DA和NE兩種神經(jīng)遞質水平的變化產(chǎn)生顯著影響，對于治療過程中以及停藥后神經(jīng)遞質的動態(tài)變化仍需進一步觀察。
益智寧神口服液的主要組成為：熟地黃、黃芪、白芍、龍骨、遠志、石菖蒲、五味子。其中熟地，其味甘，性微溫，入心、肝、腎經(jīng)，本品味厚氣薄，為補血生精、滋陰補腎之要藥，《珍珠囊》曰：“主補血氣，滋腎水，益真陰”。黃芪，味甘，性微溫，入脾、肺經(jīng)，質輕升浮，為升陽補氣之圣藥?？裳a中氣、益元氣、溫三焦、壯脾陽，選以補脾益氣。白芍味苦、酸，性微寒，入肝經(jīng)，既能養(yǎng)血斂陰，又能平抑肝陽，還能柔肝止痙;而龍骨味甘、澀，性微寒，入心、肝經(jīng)，專攻平肝潛陽、鎮(zhèn)靜安神之用，兩者搭配，養(yǎng)陰寧心，平肝潛陽。五味子性溫，五味具備，酸能收斂，苦能清熱，咸能滋腎，溫而不燥，既能益氣生津，補腎養(yǎng)心，用其養(yǎng)心滋腎安神;遠志、石菖蒲有安神益智、化痰開竅之功效。諸藥配伍，具有健脾滋腎、平肝熄風、寧神益智、化痰開竅之功效。氟哌啶醇是目前治療TS的最有效藥物之一[9]，療效確切，但因副作用明顯使其臨床應用受到限制，通過實驗結合臨床用藥發(fā)現(xiàn)，益智寧神口服液的療效與氟哌啶醇無明顯差異，且療效更加穩(wěn)定，易為患兒及家屬接受。
參考文獻
[1] Freeman R D， Fast D K， Burd L， et a1.An international perspective on Tourette syndrome：selected findings from 3500 inpiduals in 22 countries[J].Dev Med Child Neurol， 2000，42( 7 )：436.
[2]楊麗新.培土抑木法治療小兒抽動穢語綜合征36例[J].浙江中西醫(yī)結合雜志，2001，11(9)：575.
[3] Wakata N， Araki Y， Sugimoto H， et al. IDPNinduced monoamine and hydroxyl radical changes in the rat brain[J]. Neurochemical Research， 2000， 25(3):401.
[4]劉智勝.小兒多發(fā)性抽動癥[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社， 2002：237-238.
[5]劉師蓮，張兆蓮，劉賢錫，等. 大鼠腦組織單胺類遞質及其代謝產(chǎn)物的檢測方法研究[J].山東大學學報：醫(yī)學版，2002，40(5):472.
[6]Wong D，Brasic J，Singer H，et a1.PET imaging of dopamine and serotonin in Tourette syndrome[J]. Neuroimage，2006，31(4)：162.
[7]Swerdlow N R， Sutherland A N. Using animal models to develop therapeutics for Tourette syndrome[J]. Pharmacol Ther，2005， 108(3):281.
［關鍵詞］ 扁平苔蘚；精神因素；應激；抑郁；焦慮；神經(jīng)生物學
［中圖分類號］ r781.5 ［文獻標識碼］ a ［文章編號］ 1003- 1634（2008）01- 0056- 03
近年來，精神因素與扁平苔蘚（lichen planus，lp）發(fā)病間的聯(lián)系及其作用機制有了越來越多的研究，并取得了一定的進展。大量的臨床病例分析發(fā)現(xiàn)lp 患者常伴有精神創(chuàng)傷史及焦慮、抑郁等情緒障礙，并且一系列的神經(jīng)生物學研究不僅發(fā)現(xiàn)了精神因素引起的體內(nèi)血管活性腸肽、熱休克蛋白、皮質醇等的改變，而且闡述了可能的應激作用機制。本文對相關的神經(jīng)生物學研究資料以及焦慮、抑郁和應激的神經(jīng)生物學研究進展進行回顧和總結，以期進一步了解精神因素在lp 發(fā)病中的作用機制，為探索lp 預防和治療的新手段提供啟示。
1 lp 精神因素的神經(jīng)生物學研究
精神因素在lp 發(fā)病中的作用機制目前尚難以闡明?？赡芘c應激反應有關，但也不能排除患者的情緒波動加強了其他因素的致病過程[1]。目前關于這方面的神經(jīng)生物學研究成果主要有以下3 點：
1.1 血管活性腸肽（vasoactive intestinal peptide，vip）vip 是皮膚中存在的多種神經(jīng)肽之一，與許多皮膚病有關，如銀屑病、異位性皮炎、白癜風等。在皮膚組織中，神經(jīng)纖維多分布于真皮、真皮深層的血管、汗腺及毛囊周圍[2]。許多研究者認為，lp的發(fā)病與神經(jīng)精神因素有關，vip 作為重要的神經(jīng)遞質，與精神壓力有關，當受到更多的壓力時，人的唾液會分泌更多的vip[3]。有人對20 例lp 病變組織中vip 的表達進行檢測，結果顯示，20例皮損中有16 例標本染色陽性，彌漫分布在表皮各層的細胞質，與正常皮膚僅見于基底層有所不同。有精神創(chuàng)傷組陽性表達例數(shù)顯著高于無精神創(chuàng)傷組。因此推測，lp 組織中vip 表達增高可能與精神因素有關，可能通過啟動精神免疫網(wǎng)絡參與lp 的發(fā)病[4]。vip 可能通過以下機制在lp 發(fā)病中起作用：①促進t 細胞表面的黏附分子與血管內(nèi)皮細胞的相互作用，促進淋巴細胞降解胞外基質成分，實現(xiàn)在組織中游走，進而形成淋巴細胞浸潤。②角質形成細胞表面表達vip 受體，vip 由神經(jīng)釋放后到達表皮，通過與vip 受體間的相互作用，誘導角質形成細胞產(chǎn)生細胞因子，進而通過刺激角質形成細胞內(nèi)dna 合成的增加，有絲分裂的加快使角質形成細胞增殖。③促進肥大細胞脫粒，參與炎癥反應[4]。
1.2 熱休克蛋白（heat shock protein，hsp）hsp 又稱應激蛋白，是一類分布廣泛的高保守蛋白，作為重要的分子伴侶，具有重要的生理功能，與感染性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤等研究領域關系密切。近年的研究表明hsps 參與口腔扁平苔蘚（olp）的發(fā)生，特別是hsp60 和hsp70，olp 的hsp60 陽性表達率與正常黏膜相比存在顯著差異性。chaiyarit 等研究發(fā)現(xiàn)，hsp60 在olp 病損區(qū)以上皮層細胞強陽性表達為主，固有層浸潤的淋巴細胞有弱陽性表達，血管為陰性。正?？谇火つsp70 為弱陽性表達，說明正?？谇火つひ灿休p度刺激因素存在，起到了恰當?shù)谋Ｗo作用。糜爛型olp 的hsp70 下調(diào)，說明其細胞保護機制受損，缺乏必要的細胞保護作用[5]。bayramgürler 等研究發(fā)現(xiàn)，hsp60 在lp 皮損中的表達比在正常皮膚中高，與銀屑病皮損中的表達沒有顯著性差異，hsp70 在lp 基底層中的表達比正常皮膚中低；在浸潤的淋巴細胞中，hsp60 在lp 中的表達比在銀屑病中高，而hsp70 的表達在lp 和銀屑病中均比正常皮膚中低。因此認為，hsps 在lp 的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用[6]。hsps 參與olp 的發(fā)生可能由于hsp 的高度保守性，人體t細胞在識別、攻擊外來抗原的同時將過度表達hsp60 的上皮角質形成細胞也作為靶細胞，造成上皮基底細胞的破壞[7]。
1.3 下丘腦- 垂體- 腎上腺皮質（hpa）軸的作用研究發(fā)現(xiàn)，伴抑郁癥狀的olp 患者，尤其是糜爛型olp 患者的nk 細胞水平下降[8]。ivanovski 研究發(fā)現(xiàn)，olp 患者具有明顯的疑病、抑郁、癔癥傾向，其中糜爛型olp 患者的血清皮質醇水平、cd4、cd8 水平顯著升高，而cd16 水平顯著下降；白紋型olp 患者的cd8 水扁平苔蘚精神因素相關的神經(jīng)生物學研究進展臨床口腔醫(yī)學雜志2008 年1 月第24 卷第1 期j clin stomatol, jan,2008,vol.24.no.1平顯著升高。以上由抑郁等精神因素引起的olp 患者內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)的變化被認為是通過hpa 軸的作用達成的。hpa 軸是主要的神經(jīng)內(nèi)分泌應激軸。hpa 軸的功能亢進可能是抑郁癥的神經(jīng)生物學基礎。在應激過程中，血清中的類皮質激素濃度顯著升高，它對單核細胞和前炎癥細胞因子的生成起到負性調(diào)節(jié)作用，從而導致了免疫抑制。ivanovski 等的研究表明糜爛型olp 患者血清皮質醇水平升高，并且和臨床疑病、抑郁、癔癥癥狀密切相關，反映了hpa 軸代償性功能亢進，以調(diào)控免疫和炎癥反應。糖皮質激素的作用是有選擇性的，依賴于免疫應答的階段和類型[9]。一般認為糖皮質激素主要抑制介導細胞免疫的th1，因此實際上它起了放大介導體液免疫的th2 的作用[10]。另一方面，抑郁癥與炎癥反應的激活密切相關，而其中前炎癥細胞因子是hpa 軸的有力的催化劑。尤其il- 6 刺激了促腎上腺皮質釋放激素的生成，增強了hpa的活性，因此增加了腎上腺皮質激素和皮質醇水平。然而，在慢性應激和抑郁狀態(tài)下，盡管糖皮質激素過度分泌，前炎癥細胞因子的水平仍舊增長，提示此時免疫細胞上的糖皮質激素受體功能紊亂，無法對這些細胞免疫的關鍵組分發(fā)揮抑制作用。低敏感
性糖皮質激素受體的功能在經(jīng)過有效治療后可恢復正常。kubera研究發(fā)現(xiàn)抗抑郁藥物，如米帕明、氟西汀等可以增加il- 10等抗炎癥細胞因子的生成，顯著減小ifn- γ／il- 10 比值，導致負性t 細胞免疫調(diào)節(jié)[9]。另有研究發(fā)現(xiàn)，olp 患者的焦慮水平和唾液中的皮質醇水平顯著高于正常對照組[11]。這些資料均提示，皮質醇和情緒障礙在olp，特別是糜爛型olp 的發(fā)病機制中發(fā)揮作用。在lp 的發(fā)生、發(fā)展過程中，個體的心理狀態(tài)可能影響了免疫系統(tǒng)的自身穩(wěn)定性。
2 應激、抑郁、焦慮的神經(jīng)生物學研究
各種測定受體的方法都證實，免疫細胞表面和細胞內(nèi)都存在神經(jīng)遞質和激素受體。神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)正是通過這些受體作用于免疫細胞，而對免疫應答進行正向或負向調(diào)節(jié)[10]。由于已有的研究已證實lp 患者多伴有焦慮、抑郁等情緒障礙，認為精神因素對lp 發(fā)病的作用機制可能與應激反應有關，故對于焦慮、抑郁及應激反應時的神經(jīng)生物學變化的研究可能有助于進一步探究精神因素在lp 這一自身免疫性疾病發(fā)生、發(fā)展中的神經(jīng)- 內(nèi)分泌- 免疫機制。
2.1 應激研究表明，在急性或慢性應激狀態(tài)下，產(chǎn)生生理反應的核心是hpa 軸和交感神經(jīng)- 腎上腺髓質軸（sas）。sas 軸主要涉及兒茶酚胺，包括去甲腎上腺素和腎上腺素的分泌。在腦內(nèi)去甲腎上腺素能神經(jīng)元主要分布于腦干藍斑核內(nèi)。應激反應發(fā)生時，腦內(nèi)去甲腎上腺素分泌增加，外周則通過交感神經(jīng)刺激腎上腺髓質分泌去甲腎上腺素和腎上腺素，其作用于靶器官，產(chǎn)生一系列生理反應，使機體調(diào)節(jié)和適應應激狀態(tài)。在應激狀態(tài)下，甲狀腺、胰腺也有相應的變化[12]。
2.2 抑郁
2.2.1 神經(jīng)遞質抑郁癥的發(fā)生可能與中樞去甲腎上腺素、5- 羥色胺、多巴胺、乙酰膽堿、γ- 氨基丁酸、神經(jīng)肽能系統(tǒng)及其受體的功能紊亂有關。可能與抑郁癥有關的神經(jīng)肽有：促甲狀腺激素釋放激素、生長抑制激素、生長激素釋放激素、催產(chǎn)素、神經(jīng)肽y、血管升壓素、阿片肽、促皮質激素釋放激素、p 物質等[13]。
2.2.2 神經(jīng)內(nèi)分泌因素①.hpa。地塞米松抑制試驗能反映hpa 功能。研究顯示，近40%～50%的抑郁癥患者地塞米松抑制試驗脫抑制，往往隨臨床癥狀緩解而恢復正常。②.下丘腦- 垂體- 甲狀腺軸（hpt）。steiner 等研究發(fā)現(xiàn)，大約有1／3 的抑郁癥患者促甲狀腺激素對促甲狀腺素釋放激素的反應遲鈍，而小部分患者表現(xiàn)為反應過度[14]。③.下丘腦- 垂體- 生長激素軸（hpgh）。研究發(fā)現(xiàn)，抑郁癥患者生長激素對α2 腎上腺素拮抗劑可樂定的分泌反應減弱。另有研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者腦脊液中生長抑素含量較正常人低。推測抑郁癥患者生長抑素能低下可能與去甲腎上腺素能及5- 羥色胺能低下有關[15]。
2.2.3 免疫系統(tǒng)異常有證據(jù)顯示抑郁癥時可同時存在免疫激活（巨噬細胞活性升高，急性反應蛋白升高）和免疫抑制（自然殺傷細胞活性降低）現(xiàn)象。抑郁癥病人存在il- 1、il- 6、tnf 增加。這3 種細胞因子均對hpa 軸有激活作[15]。
2.3 焦慮。
2.3.1 神經(jīng)生化學①.乳酸學說。認為乳酸鹽可能引起代謝性堿中毒、低鈣血癥、有氧代謝異常、β- 腎上腺素能活動亢進、外周兒茶酚胺過度釋放、中樞化學感受器敏感性增高，使有焦慮傾向者產(chǎn)生焦慮表現(xiàn)。②.神經(jīng)遞質。中樞去甲腎上腺素能系統(tǒng)、多巴胺能系統(tǒng)、5- 羥色胺和γ- 氨基丁酸等4 種神經(jīng)遞質系統(tǒng)可能與焦慮癥的發(fā)病機制有關[16]。
1擺正教學與科研的關系，認真投身教育事業(yè)
作為一位青年教師，首先要樹立忠于人民教育事業(yè)的思想，擺正教學與科研的關系，克服重科研、輕教學的思想。教學與科研相輔相成，不能“選邊站”，既要搞好教學又要搞好科研，只有兩者形成良性循環(huán)，才能保證人才沿著正確方向發(fā)展[1]。在授課時，筆者深刻體會到學生愛聽、聽得懂的內(nèi)容正是自己包括我科室其他同事研究的內(nèi)容，所以才能講得更親切生動，才更能激發(fā)學生探求真理的熱情。
2在老教師“傳幫帶”下自覺學習，提高自身教學能力
作為教育部重點實驗室的年輕教師，筆者有幸得到教學和科研經(jīng)驗豐富的老教授的指導，受益匪淺。2012年，85歲高齡的陳宜張院士身體力行，全程為我校八年制學生講授醫(yī)學神經(jīng)生物學課程。筆者作為科室教學秘書，有幸全程旁聽了大師的授課。老教授翔實豐富的授課內(nèi)容、謙虛謹慎的治學態(tài)度、大膽挑戰(zhàn)前人的探索精神，是我們年輕教員學習的榜樣。他用生動事例詮釋了不唯上、不唯書、只唯實的探求真理的態(tài)度，以科學史為主線，結合自身，介紹了教學與科研工作中成功的經(jīng)驗與失敗的教訓。他親自制作的所有授課幻燈片都體現(xiàn)出清晰簡練的風格，反映了他務求實效的一貫作風，給我們留下了深刻的印象。正如古人所說：他山之石，可以攻玉。多聽聽其他學科優(yōu)秀教員的授課，同樣是提高授課水平的捷徑。此外，校督導專家組在每次聽課后給予的中肯建議及學生在課堂上和課后的反饋[2]都能讓授課者及時了解授課中的缺陷和不足，不斷提高授課水平。
3根據(jù)不同專業(yè)背景，精心安排教學內(nèi)容
目前我校對臨床醫(yī)學、麻醉、生物技術、心理專業(yè)的學生在第二學年開設神經(jīng)生物學課程。如何讓學生“既吃得飽又吃得好”呢？我們的體會是根據(jù)學校新版課程標準，結合學生已有的知識背景和專業(yè)定位來選取內(nèi)容。第二學年學生已有解剖、生理、生化知識的積累，而神經(jīng)生物學作為交叉學科，課堂講授的知識容易與學生已有知識重復。講授知識過淺，容易導致“炒冷飯”，使學生滋生輕視思想；講授過深，容易使學生滋生厭學情緒。所以要從神經(jīng)科學的角度和適宜深度講授知識。如在解剖學和生理學知識的基礎上，根據(jù)需要拓展神經(jīng)解剖學和神經(jīng)生理學的內(nèi)容。對臨床和麻醉專業(yè)學生授課時，注意從臨床出發(fā)去認識一些相關的疾?。粚ι锛夹g專業(yè)的學生，則注重科研思維的培養(yǎng)，增加新觀點、新技術的介紹；對心理學專業(yè)的學生，適當增加大腦高級功能包括情感和精神類疾病的知識及研究進展的介紹。此外，對長學制小班學生，采用專題討論形式的PBL教學，并采用撰寫綜述和現(xiàn)場答辯的考核形式，不拘泥于課堂所授內(nèi)容，鼓勵學生就感興趣的內(nèi)容進行深入思考。
4發(fā)揮本科生導師制的優(yōu)點，開展學生第二課堂活動
近年來實行本科生導師制度，通過師生雙向選擇，教研室對少數(shù)有興趣、有熱情、學有余力的學生開展第二課堂活動，并安排JournalClub，從本科室研究方向出發(fā)，拓展課堂所學知識。如聯(lián)系神經(jīng)肽的發(fā)現(xiàn)和相關知識，講解本科室開展的神經(jīng)肽放射免疫實驗；聯(lián)系神經(jīng)投射通路，講解和演示組織化學實驗和熒光成像；結合我校神經(jīng)行為學開放實驗室的特色，并聯(lián)系認知和情感障礙相關知識，介紹和開展動物行為學實驗。經(jīng)過幾年摸索和努力，我科室先后有多位參加第二課堂活動的學生在我校創(chuàng)新技能大賽中獲獎。
5及時總結與改進課堂教學工作
這學期我科室采用新編教材授課，令人欣慰的是，根據(jù)全部課程結束后對學生的問卷調(diào)查來看，臨床、麻醉、心理專業(yè)的大部分學生都對我科室教員的授課持贊同和肯定的態(tài)度，但同時問卷中也暴露出以下一些新的問題。（1）少數(shù)學生對于不同授課教員的教學風格較難適應，可能影響授課效果。針對這一問題，下一步可加強集體備課，協(xié)調(diào)各位教員的授課內(nèi)容，做到講透神經(jīng)科學的重要知識點，不重復也不遺漏，并盡可能統(tǒng)一風格。（2）有的學生反映講授內(nèi)容偏深、偏重研究進展、基礎知識鋪墊不夠的問題。下一步將對相關知識加以鋪墊、補充和完善，使學生既了解神經(jīng)科學領域的發(fā)展動態(tài)，又能掌握神經(jīng)科學領域的基本知識、基本原理。（3）多媒體教學生動直觀，信息量大，學生印象較為深刻[3]，但過多或不恰當?shù)厥褂枚嗝襟w，容易混淆學生的學習重點[4]，影響學生的理性思維。下一步將對課件內(nèi)容加以精練，突出重難點。
參考文獻：
[1]由振東，王雪琦，曹莉，等.培養(yǎng)青年教師的實踐與體會[J].山西醫(yī)科大學學報，2008，10（2）：39-41.
[2]劉沖，沈甫明，繆朝玉，等．青年教師藥理學教學體會[J]．藥學教育，2010，26（3）：46-48．
[3]趙麗，羅艷琳，尹艷玲，等.醫(yī)學神經(jīng)生物學教學方法的選擇[J].科教導刊，2013（33）：142-143.
[關鍵詞]神經(jīng)生物學；課外科研實踐；七年制；綜合型人才
我國中長期教育改革和發(fā)展規(guī)劃綱要（2010～2020年）的戰(zhàn)略目標之一：到2020年進入人力資源強國行列。一個國家在世界范圍內(nèi)的競爭力和影響力是由該國的教育實力來決定，因此培養(yǎng)具有創(chuàng)新意識和能力的綜合型人才是發(fā)展國家實力，增強國際競爭力迫切需要的。醫(yī)學院校是培養(yǎng)創(chuàng)新性綜合型醫(yī)學人才的搖籃與基地，通過特定的課外科研活動把課堂知識運用到實踐中，在實踐中鞏固課堂知識，進一步發(fā)現(xiàn)問題并學習新知識，是綜合型醫(yī)學人才培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)，對于提高醫(yī)學生的綜合素質、培養(yǎng)其創(chuàng)新精神和實踐能力具有不可替代的作用[1-2]。
我國傳統(tǒng)的醫(yī)科大學基礎教育通常以課堂教學為主，以書本為中心，與科研實踐活動完全分隔開，重視及強調(diào)課本知識，忽略對七年制醫(yī)學生科研創(chuàng)新思維和動手能力的培養(yǎng)。七年制醫(yī)學生基礎好、起點高、學習能力強，學生在前期已經(jīng)具備了一些基礎課程知識和技能，具有進一步掌握本領域新技術和新進展的能力，在教師的指引與幫助下，可以涉獵更廣更深層次的前沿理論與技術[3]。通過此文和同行分享本學系在引導七年制醫(yī)學生參與神經(jīng)生物學課外科研實踐活動方面的一些方法與體會。
1全面推行導師負責制
牛津大學早在19世紀就實行了導師制，導師既要指導學生們的學習，也要指導他們的生活，其最顯著的特點就是師生關系密切[4]。近幾年國內(nèi)絕大多數(shù)高校已經(jīng)開展了導師制的教學實踐活動，目的是為了培養(yǎng)學生的科研興趣，指引學生高效地將書本上的理論知識應用于實踐，拓寬其視野，提高其提出與解決問題的能力，最終培養(yǎng)學生的探索型或創(chuàng)新型的科學素養(yǎng)和能力。
導師制主要涉及以下兩個方面：①首先學生根據(jù)自己的興趣愛好來確定研究方向，進而選擇在此研究范圍內(nèi)從業(yè)的指導老師作為導師，在確保順利完成其現(xiàn)有學業(yè)的基礎上，積極參與到導師團隊的科研工作中；②導師可根據(jù)學生的綜合條件，如性格特點、興趣愛好、對基礎知識的掌握程度及對科研工作的愛好和期待程度，為學生提供相應的參與科研的機會，充分調(diào)動學生的科研興趣，培養(yǎng)其科研思路，使他們能將書本上的理論知識靈活運用到科研實踐活動去中并加以拓展。經(jīng)過三年的嘗試，該教育方式能夠在很大程度上調(diào)動學生的科研興趣，培養(yǎng)學生的科研思維和科研能力，鞏固并拓寬課本知識，同時為導師提供更多發(fā)現(xiàn)人才、選拔人才的渠道。最終通過師生的雙向選擇（每位導師可以與3～5位學生建立導師制關系），確認指導關系，可根據(jù)學校相關規(guī)定和要求開始課外科研實踐活動，具體實施如下。
1.1查閱并閱讀文獻，撰寫綜述
學生與導師在經(jīng)過多次詳細討論后，確定自己的研究方向，在導師的指導下學習并掌握各種檢索工具的使用，查閱文獻和相關資料。導師對檢索所獲得的文獻進行篩選分類后，按照理論上由淺至深的順序，或按照技術上由舊至新的順序，指導學生閱讀學習文獻，做讀書筆記，同時鼓勵他們在組會中去講解一些有代表性的文獻，在上述過程中，導師要做到及時與學生交流和討論。接下來導師擬定題目，由學生來撰寫文獻綜述，此過程中需要導師和學生反復討論、修改及補充。通過上述一系列的訓練，學生不但能充分掌握本研究領域的基礎理論與最新動態(tài)，還培養(yǎng)了深入淺出的科研寫作思維和科研語言表達能力。
1.2設計并開展實驗研究
學生依據(jù)各自的課題研究方向和閱讀文獻的結果，并根據(jù)實驗原理設計出具體的科研工作計劃和實驗方案，再與導師反復多次討論、修正后進一步實施。在具體實施實驗研究之前，通常由導師手把手對學生進行實驗室基本功培訓，如如何配置各種緩沖液，如何灌流、取材，切片，染色。以借助人工神經(jīng)導管修復成年大鼠坐骨神經(jīng)損傷的實驗為例，首先學習制作實驗動物坐骨神經(jīng)缺損模型，導師需要向學生演示其過程、講解注意事項等。第二步如何將神經(jīng)外膜與人工神經(jīng)導管縫合在一起，導師需要向學生闡述上述操作的目的和原理，學生見習完成后，就可以進行實踐操作。在具體的實施過程中，學生可以隨時和導師交流實驗進展情況如遇到的困難、實驗失敗的原因和預實驗結果。導師也要及時講評學生科研訓練中的進步，及時給予學生鼓勵，發(fā)現(xiàn)問題并能及時糾正，激發(fā)學生積極參與科研活動的熱情和動力。在實驗的具體實施過程中，組織學生定期開展課題進展匯報，以此鍛煉他們的學術交流能力。
1.3處理數(shù)據(jù)，撰寫論文
實驗數(shù)據(jù)是論文結果的重要組成部分，怎樣將龐大無章的原始數(shù)據(jù)，表現(xiàn)成為一目了然地且極具表現(xiàn)力的圖表結果。前期醫(yī)學生已經(jīng)學習醫(yī)學統(tǒng)計學這門課程，在具體科研實踐過程中，需要學生將統(tǒng)計學課本知識應用于科研實踐中去，即應用相應的數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計軟件對原始實驗數(shù)據(jù)進行建立數(shù)據(jù)庫及處理分析，最終的結果要與導師進行討論與校對。撰寫及是檢驗學生整個科研活動非常關鍵的一環(huán)，在科研實踐活動的整個過程中，導師都需注意進行講解與引導，例如在每周組會上學生講解文獻時，文獻中的前言部分除了綜述該研究領域的進展情況外，還提出了“為什么”開展本研究這一科學問題。那么學生在撰寫科研論文時該如何巧妙地引出自己的科研問題呢？需要師生之間在組會上針對這一問題及論文的其他內(nèi)容反復討論，直至學生逐漸掌握科研論文寫作的要求。
2神經(jīng)生物學課外科研實踐的收益、存在的問題和解決辦法
課外科研實踐活動無論是對學生還是對導師而言都是獲益匪淺的雙贏的過程[5]。對導師而言，著眼于對學生創(chuàng)新意識、創(chuàng)新精神和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)，讓學生在實踐中慢慢成長。借助科研實踐這樣一個平臺，吸引優(yōu)秀的醫(yī)學生加入課題組中深造，他們朝氣蓬勃且思想活躍，可為科學研究注入新鮮血液，為學科的發(fā)展儲備堅實的后備力量。同時，在“傳道授業(yè)解惑”的過程中要求老師在情感、態(tài)度和價值觀上對學生進行激勵、鼓舞，用自己的良好品質與精神氣質去影響學生。試想：一個老師說話、講課或做科研工作時毫無激情，又怎能調(diào)動學生對知識探究的激情。老師一定要做到自律且優(yōu)秀，通過自身的言傳身教，逐漸影響學生的獨立人格，形成他們正確的價值觀、世界觀?！笆跇I(yè)”的過程，要求老師有一定的知識儲備，即“要給學生一碗水，師傅肚子里要有一缸水”才行，并能采用恰當?shù)姆椒▊魇诮o學生，使學生能夠很好的接受、吸收與利用，做到這一點，要求老師具有強烈的職業(yè)追求，要不斷地完善自我。“解惑”，學生提出的疑惑，老師要有效地解決。對于基礎知識或實驗技巧方面的困惑，老師應采用恰當?shù)姆椒ㄕ{(diào)動學生的主動學習能力，引導并發(fā)掘培養(yǎng)學生勇于質疑的精神的同時，及時給出有效地解決方案。對他們生活中的問題，也要注意觀察，必要的時候給出自己的建議，使他們很好的走出困惑。在“解惑”的同時也要意識到，雖然幫助學生是老師的天職，但幫助的最終目的是培養(yǎng)學生獨立的人格并使他們自己掌握一定處理問題的能力，在幫助的時候要留有空隙讓他們自己去探索、去發(fā)現(xiàn)。整個的“傳道授業(yè)解惑”的科研實踐過程，也是老師提升自己的過程。
對學生而言：①轉變自己的學習方式，變被動為主動。在導師的引導下，學生親自參與、主動實踐，在實踐中運用所學的課本知識解決各種層面的實際問題，有利于培養(yǎng)并提高學生的科研創(chuàng)新能力和實踐能力。科學實踐是人類認識自然并改造自然的最直接活動[6]，學生親歷科研活動是培養(yǎng)創(chuàng)新意識和能力的重要載體[7]。通過上述實踐活動，學生初步掌握文獻資料的檢索、綜述撰寫、科學研究的選題和實驗設計、常用實驗室儀器和動物實驗的基本操作方法等。過程中，學生遇到困難或遭遇失敗時，通過進一步查閱文獻資料、分析推理或與導師討論后，可能產(chǎn)生新的思路和新的發(fā)現(xiàn)。整個科研實踐過程中，學生充分調(diào)動其聰明才智，發(fā)揮其獨立思考的能力，運用所獲得的知識去解決實際的問題，學生的創(chuàng)新能力和動手能力大大提高。②有利于培養(yǎng)學生的科研興趣。興趣是行動的原動力[8]，在科學實踐活動過程中，學生不僅會遇到枯燥的重復工作，也有可能遇到充滿挑戰(zhàn)的難題，既可以充分發(fā)揮自己聰明才智來解決遇到的問題，也可以直接從導師那里得到答案或幫助；不斷地遇到問題、解決問題并提出新的科學問題，這個過程不僅能激發(fā)學生的學習興趣及探究問題的好奇心，也可培養(yǎng)學生觀察問題、分析問題和解決問題的能力。③有利于培養(yǎng)學生科研素養(yǎng)和綜合實驗技能?？茖W研究極具挑戰(zhàn)性，只有好奇心是不夠的，實驗中通常會碰到這樣那樣的困難，學生必須具備足夠的恒心、耐心及毅力，才能克服困難、解決問題。同時，在實驗過程中還要不斷學習各種實驗技能，提高自己的動手操作、獨立思考的能力。④有利于培養(yǎng)學生的團結協(xié)作精神。團結協(xié)作是科研必需的基本素質[9]，任何一項科研任務的順利完成都必須依賴諸多人的智慧和力量，學生之間在科研實踐過程中能增進彼此之間的交流，共同面對困難、承擔風險、分享成績，從而逐步形成樂于助人且與人合作的團隊精神和能力。
學生能夠積極參與課外科研實踐活動是件好事，但在具體的實施過程中也會遇到一些問題。比如，有些學生參加課外科研實踐的動機不夠單純，遇到困難容易產(chǎn)生畏難、膽怯情緒。這必將導致其在科學研究過程中出現(xiàn)一些急功近利的想法，總是考慮能否發(fā)表文章以及文章的數(shù)量，亦或這些文章對將來的畢業(yè)分配或進一步深造是否幫助等等。也有一部分學生起初對科學研究抱有極大的熱情和憧憬，但是經(jīng)過幾次失敗的探索之后便打起了退堂鼓。當出現(xiàn)上述問題時，導師需要及時對學生進行引導和鼓勵，讓學生們充分認識到在科學研究的道路上不僅僅有喜悅和成功、還充滿了坎坷和苦難，任何一個偉大的發(fā)現(xiàn)都是在經(jīng)過長期艱苦的探索之后完成的?？茖W研究的道路上所有的弄虛作假、急功近利都會導致嚴重的錯誤和失敗，只有真心熱愛且持之以恒的人才能在科學的道路上越走越遠和越走越廣。經(jīng)驗證明，積極開展導師負責制的課外科研實踐活動是培養(yǎng)高素質復合型醫(yī)學人才的重要途徑之一，仍需不斷積累經(jīng)驗，充分發(fā)揮導師的引導作用，挖掘學生潛能，調(diào)動其探究問題的積極主動性，引導學生良性發(fā)展。
經(jīng)過導師負責制的課外科研實踐活動，神經(jīng)生物學系老師指導的學生在校內(nèi)及北京市屬高校間的各類比賽如學術論文、實驗設計和科技發(fā)明制作中脫穎而出，紛紛獲獎，這其中凝集了老師們的辛勤指導和孜孜不倦的教誨以及同學們的熱情探索與求知。
[參考文獻]
[1]楊萍，熊鷹，阮懷珍，等.神經(jīng)生物學第二課堂在第一課堂教學中的作用和地位[J].西北醫(yī)學教育，2011，19（4）：787-789.
[2]周曉紅，陳曉光，彭鴻娟，等.以課外科研工作為基礎拓展醫(yī)學生創(chuàng)新綜合素質教育空間的探索[J].西北醫(yī)學教育，2006，14（3）：235-236.
[3]楊朝陽，李曉光.神經(jīng)生物學教學模式及改進[J].中國康復理論與實踐，2016，22（1）：122-124.
[4]程瓊，陳罡，沈愛國，等.神經(jīng)生物學教學方法與課程建設探討[J].基礎醫(yī)學教育，2011，13（7）：602-605.
[5]邢俊玲，段建紅，胡三覺.從神經(jīng)生物學教學培養(yǎng)醫(yī)學生創(chuàng)新思維探討[J].基礎醫(yī)學教育，2011，13（3）：223-224.
[6]劉浩，龐丹.杜威的科學技術“探究”思想解析[J].東北大學學報（社會科學版），2016，18（1）：18-22.
[7]尹艷玲，韓松，李俊發(fā)，等.醫(yī)學神經(jīng)生物學分層次教學的探索與實踐[J].基礎醫(yī)學教育，2015，17（8）：681-682.
關鍵詞：卒中后抑郁；動物實驗研究；綜述
卒中后抑郁（post stroke depression，PSD）是腦卒中后的最常見的并發(fā)癥之一，是腦卒中患者最常見的心理障礙，其患病率可高達20%～60%。卒中后抑郁可嚴重損害腦卒中患者的認知功能，影響患者的預后情況，增加患者癡呆及自殺的風險，給患者的家庭及社會帶來沉重的壓力?，F(xiàn)將近10年關于卒中后抑郁的動物實驗研究進展綜述如下。
1 卒中后抑郁的發(fā)病機制
PSD的發(fā)病機制復雜，涉及神經(jīng)生物學、解剖學和社會學、心理學等諸多因素。在20世紀80年代，Robinson等就提出，腦內(nèi)參與情感調(diào)節(jié)的5-HT能神經(jīng)元和NE能胞于腦干，其軸突通過丘腦和基底節(jié)到達額葉皮質，腦卒中病變累及上述部位可影響5-HT能神經(jīng)元和NE能神經(jīng)元及其通路，導致兩種遞質水平降低而引起抑郁。Moller等利用正電子發(fā)射型計算機斷層顯像（PET）間接估計了5-HT受體活性，研究發(fā)現(xiàn)在急性卒中后5-HT神經(jīng)遞質出現(xiàn)代謝的異常，尤其在邊緣系統(tǒng)和中縫核5-HT代謝的顯著下降，可能與抑郁的發(fā)生相關。臨床上使用5-輕色胺再攝取抑制劑可緩解PSD的癥狀，進一步支持PSD與單胺類神經(jīng)遞質下降有關的觀點。Terroni等根據(jù)MRI研究結果顯示病灶影響邊緣-皮質-紋狀體-蒼白球-丘腦神經(jīng)環(huán)，尤其是前額葉腹側和背側扣帶回皮層、海馬、杏仁核等易產(chǎn)生PSD，且以左側為著，而這種情況未見于腦橋背部和小腦。說明前額葉背外側皮質環(huán)路在情緒 的調(diào)節(jié)中起著重要作用，腦內(nèi)該區(qū)域白質纖維連接的改變可能也會影響情緒調(diào)節(jié)過程。這與控制情感的神經(jīng)環(huán)路主要分布在額顳葉、邊緣系統(tǒng)和腦干腹部及其皮層下聯(lián)系纖維的研究結果相一致。有學者認為，腦卒中"突如其來"的發(fā)生和其嚴重程度，使患者的工作和日常生活能力改變甚至喪失，導致患者心理應激障礙、心理平衡失調(diào)，由此對抑郁癥的產(chǎn)生有一定的作用。
2 卒中后抑郁動物模型的建立
有關卒中后抑郁的動物模型的建立，近年來國內(nèi)文獻報道多為復合模型即在卒中基礎上結合相應應激刺激構建PSD模型。裘濤等[1]采用雙側頸總動脈永久性結扎后予以行為限制制作PSD大鼠模型，觀察大鼠自發(fā)改變，海馬區(qū)單胺類神經(jīng)遞質的變化。結果顯示：模型組大鼠水平運動得分、垂直運動得分、清潔動作次數(shù)與假手術組比較顯著下降（P
3 針刺干預PSD大鼠的實驗研究
卒中后抑郁患者不僅有精神障礙癥狀而且還存在肢體的活動障礙，采用體針治療卒中后抑郁可以顯著促進患者肢體的恢復，平衡患者臟腑的陰陽，調(diào)節(jié)患者氣血的虛實。龔燕等[13]采用單側頸總動脈不全結扎聯(lián)合孤養(yǎng)和小劑量利血平皮下注射制備復合型PSD大鼠模型。觀察各組大鼠的行為學變化；利用熒光分光光度法測定各組大鼠大腦海馬區(qū)NE和5-HT含量。結果顯示，與正常組相比，模型組大鼠糖水消耗量和腦內(nèi)NE、DA含量均明顯下降。電針能使PSD大鼠糖水消耗量和腦神經(jīng)遞質NE、DA含量明顯增加。得到的結論是：電針治療PSD大鼠的機制可能與提高其海馬區(qū)5-HT和NE含量有關。孫培養(yǎng)等[14]選擇通督調(diào)神針法干預卒中后抑郁大鼠。結果：造模完成時，模型組和針刺組蔗糖水飲用量、水平及垂直運動得分、血漿中單胺類神經(jīng)遞質的含量均較正常組降低，Zea Langa神經(jīng)行為學評分提高，差異均具有統(tǒng)計學意義（P
4 中醫(yī)藥物干預PSD大鼠的實驗研究
中醫(yī)認為卒中后抑郁屬于"中風"與"郁證"范疇，由于受到軀體病殘的困擾，最終情緒抑郁。裘濤等[1]采用雙側頸總動脈永久性結扎后予以行為限制制作PSD大鼠模型，隨機分為模型組、滌痰開竅解郁組、氟西汀組，并設假手術組，采用RP-HPLC-熒光檢測法測定大鼠海馬區(qū)單胺類神經(jīng)遞質的變化，并觀察大鼠自發(fā)改變。結果發(fā)現(xiàn)模型組大鼠行為能力下降（P
5 西醫(yī)藥物干預PSD大鼠的實驗研究
PSD的西醫(yī)藥物治療包括原發(fā)病、并發(fā)癥和抑郁癥的治療?；颊咭蛐柰瑫r服用治療腦卒中、高血壓或其他并發(fā)癥的藥物，故在選擇藥物時，應選擇相互作用小的藥物，所以新型抗抑郁劑有一定優(yōu)勢，更適于神經(jīng)系統(tǒng)疾病所致繼發(fā)性抑郁的治療。趙立波等采用CUMS結合孤養(yǎng)建立抑郁模型，MCAO術建立卒中模型PSD模型組和氟西汀組大鼠先建立卒中模型后建立抑郁模型，腹腔注射相應藥物進行干預，連續(xù)給藥21d后，用酶聯(lián)免疫法和免疫組化SABC法檢測給藥后各組大鼠腦組織中5-HT，NE，NGF的表達。結果顯示與假手術組比較，抑郁模型組和PSD模型組大鼠腦組織中5-HT，NE，NGF表達均明顯降低（P
6 研究存在的問題及展望
綜上所述，國內(nèi)外學者在論述PSD發(fā)病的因素時各有側重，具體的發(fā)病機制尚未明確?，F(xiàn)在多數(shù)學者認為其發(fā)病是由多種原因通過多種機制所致，與心身疾病的生物-心理-社會醫(yī)學模式相一致，可能是神經(jīng)生物學因素和社會心理因素共同作用的結果。
目前，關于PSD的研究大多建立在動物實驗的基礎上，制備的動物模型主要以缺血性卒中為主，但卒中的發(fā)病類型包括出血性卒中和缺血性卒中，關于出血性卒中后抑郁動物模型的制備相對較少，這方面的研究信息相對缺失。并且，一般情況下卒中后抑郁患者多合并高血壓病、血脂異常等基礎病，而這些在動物模型身上無法一一體現(xiàn)；同時，在動物實驗造模、治療、取材的過程中，都有可能出現(xiàn)一些輕微的誤差，如取材的不完整性等。這些都有可能導致實驗結果存在一定的誤差，以至于影響實驗的準確性。
其次，關于卒中后抑郁治療方法頗多，有針灸、中醫(yī)藥物、西醫(yī)藥物等。腦卒中后抑郁屬于"中風"與"郁證"范疇，運用中醫(yī)藥物治療時，應綜合分析患者實際病情，并概括患者分型，從而辯證論治。針灸療法治療卒中后抑郁一方面可以幫助患者殘肢的功能恢復，間接有利于患者抑郁狀態(tài)的改變，另一方面疏肝行氣、調(diào)和陰陽，又起到直接改善患者情緒的作用。西醫(yī)藥物治療PSD的治療原則是早期、單一藥物、綜合、個體化、長期系統(tǒng)用藥。目前運用較為廣泛的是：三環(huán)類抗抑郁藥、5-HT再攝取抑制劑、NE再攝取抑制劑等，但西醫(yī)藥物的使用存在一定的副作用。
因此，尋求PSD的發(fā)病機制以及制備理想的PSD模型，尋找治療PSD有效的方法是目前亟待解決的問題，相信隨著分子生物學、神經(jīng)生物學等基礎學科的發(fā)展和西醫(yī)學技術的不斷介入，卒中后抑郁的發(fā)病機制研究正從多層次、多角度不斷深入。假以時日，肯定能提出卒中后抑郁的最佳治療方案。
參考文獻：
[1]裘濤，陳眉，代建峰，等.腦卒中后抑郁癥動物模型的建立與評價[J].中國行為醫(yī)學科學，2006，15（1）：12-13.
[2]劉福友，楊石，陳衛(wèi)垠，等.腦卒中后抑郁大鼠模型的建立[J].中國臨床康復，2006，10（42）：91-94.
關鍵詞：兒童孤獨癥；發(fā)病因素
1943 年Leo kanner 首次報道了11名自閉癥兒童，其主要表現(xiàn)是交流障礙、語言障礙、和刻板行為，又稱kanner三聯(lián)征[1]。在隨后的半個世紀以來，兒童自閉癥作為廣泛性發(fā)展障礙（Pervasive Development Disorder ，簡稱PDD） 的典型代表，受到了世界范圍的普遍關注和重視[2]。兒童孤獨癥是起病于嬰幼兒時期的一種嚴重的廣泛性發(fā)育障礙。特征為社會交往障礙、語言交流障礙和興趣范圍狹窄、重復或刻板動作為主要臨床表現(xiàn)的一組行為綜合征[3]。是一種嚴重的、廣泛的社會影響和溝通技能損害。孤獨癥起病于嬰幼兒時期，癥狀通常在患兒12～18個月時就有表現(xiàn)[4]，但確診卻要在患兒24～36個月時才能做出，有個別的患者甚至到成人時才被診斷患有自閉癥[5]。
本癥多見于男孩，男女發(fā)病比例為4：1。根據(jù)全世界的統(tǒng)計，孤獨癥的發(fā)病率大約為萬分之五。近年來，各方面報道提示該病的發(fā)病率有上升的趨勢。該病起病早，病因復雜，癥狀特殊，目前該病尚無特效治療方法，但行為、營養(yǎng)、藥物、臍血單個核細胞移植[6]等等治療取得了較好的療效。
1 病因
兒童孤獨癥的病因目前尚無定論，可能是生物學因素與環(huán)境非生物學因素相互作用的結果。前者包括遺傳、神經(jīng)生物學、免疫、圍產(chǎn)期異常等因素。后者包括生化、飲食等因素。
1.1 生物學因素
1.1.1 遺傳因素 家系研究證實該病有家族聚集性.孤獨癥父母本身即為精神障礙的易患人群[7]。男性患者明顯多于女性。男；女約4：1。孤獨癥同卵雙生共患率在60%～92%范圍；異卵雙生共患率0%～10%；同胞再患概率3%～5%，較之普通人群高25～60倍，說明孤獨癥與遺傳因素密切相關。迄今為止的研究發(fā)現(xiàn)，孤獨癥的發(fā)病與130多個基因相關，且分布于lO多條染色體[3]。
1.1.2 神經(jīng)生物學因素 生物學研究手段主要是基因研究。歸納有關孤獨癥眾多相關基因，主要在五個方面顯示出異常。較突出的是，突觸功能基因及突觸形成相關的基因，以及與突觸相關的一些細胞黏附分子基因。其中相當部分與精神分裂癥、雙項情感障礙涉及的基因相同，提示這幾種疾病可能是一種與突觸發(fā)育、功能異常有關的一類疾病。有學者甚至對這幾種疾病的傳統(tǒng)界定提出了質疑，認為這些疾病不過是基于同一發(fā)病通路上的幾個不同層面。生物分子層面的分型將可能是一個新的趨勢。研究還提示，孤獨癥還和發(fā)育過程中神經(jīng)元遷移異常、神經(jīng)細胞內(nèi)信號轉導異常、神經(jīng)遞質紊亂以及神經(jīng)細胞離子轉運異常相關。這幾方面的分子機制還相互交叉，相互作用和影響來致病，即這些易感基因之間的關系并不是孤立的，而是錯綜復雜的，是多個微效基因共同作用導致的病變。
1.1.3 免疫學因素 有人指出慢性病毒感染學說，認為免疫缺失的個體，在胎兒或新生兒期增加病毒感染的幾率，易感染病毒引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損害，導致嬰兒孤獨癥。
1.1.4 圍產(chǎn)期異常因素 本癥患兒較多有圍生期腦損害史、腦電圖異常、神經(jīng)系統(tǒng)軟體征以及癲癇發(fā)作等。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，本癥患兒較多見腦室左顳角擴大.提示患兒有顳葉內(nèi)側結構的病變，磁共振影像檢查還可見部分患兒腦蚓部發(fā)育不全，故認為本癥可能與中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常所致的功能障礙有關。
1.2 非生物學因素
1.2.1 生化因素 有人發(fā)現(xiàn)孤獨癥患者可能與金屬代謝有關，有的患兒嚴重缺鋅，血漿內(nèi)內(nèi)啡呔水平與刻板運動有關。
1，2.2 飲食因素 科學家研究發(fā)現(xiàn)，兒童孤獨癥的發(fā)生和發(fā)展過程還與患兒過量食用酸性食物密切相關。正常情況下.幼兒的血液呈弱堿性，幼兒如過多食用酸性食品（高糖、高脂肪和動物性蛋白食物等），其血液就會隨之酸化，使其機體內(nèi)環(huán)境平衡發(fā)生紊亂.呈現(xiàn)酸性體質，并會漸進性地出現(xiàn)一系列癥狀--手足發(fā)涼，易感冒，免疫力降低，?？摁[不止，皮膚易過敏和出濕疹，嚴重者則可因機體缺乏鉀、鈣、鎂、鋅等元素而影響大腦的發(fā)育及功能，導致記憶力和思維能力減退，甚至思維紊亂，以致產(chǎn)生輕微的精神異常表現(xiàn)。
1.2.3 環(huán)境因素 有人認為孤獨癥患兒的成長環(huán)境中缺乏豐富和適當?shù)拇碳?，沒有被教以社會行為，是該病發(fā)病的重要因素。長期處在單調(diào)環(huán)境中的兒童，會用重復動作來進行自我刺激，對外界環(huán)境就不感興趣。
2 診斷標準
依據(jù)美國嬰幼兒自閉癥診斷標準DSM-IV診斷。該標準根據(jù)自閉癥的3大主要臨床表現(xiàn)分為3項，其中社會交往項至少有2條，語言交流和行為活動、興趣項至少各1條，相加后大于或等于6項者即可確診。
3 治療方法
隨著研究的不斷深入，目前提倡對孤獨癥應及早綜合干預，以教育訓練和行為矯正為主，輔助藥物治療，且這種治療須持續(xù)終生[8～10]。
當前常用的治療方法有：藥物治療、行為治療、教育訓練、行為干預
感覺統(tǒng)合訓練、音樂療法、游戲治療、臍血單個核細胞移植治療、耳穴貼壓配合頭針治療、醒神開竅頭針療法、高壓氧治療、綜合干預等。
由于父母對嬰兒心理行為發(fā)育知識缺乏，使孤獨癥患兒不易早期發(fā)現(xiàn)，延誤早診斷，早治療。其實對自閉癥患兒來講，2～3歲的早期干預對預后影響十分顯著。但治療不及時，則會導致終生殘疾連自理能力都沒有。因此，如果懷疑存在自閉癥或其他發(fā)育問題的兒童，主動出擊是制勝的重要法寶，家長應積極尋求早期治療干預。且兒童自閉癥是一種慢性的終生疾病，它的癥狀不會隨年齡增長而消失，康復治療是一個漫長的過程，家長和醫(yī)護人員要有愛心、耐心和信心，接受有效的綜合治療和教育訓練是完全可以改善預后的，千萬不可輕易中途放棄治療。
參考文獻：
[1] 靜進，小兒心理與心理行為疾病[M].廣州：廣東科技出版社，2005，428-439.
[2] 劉曉明，孤獨癥兒童治療方法概況[J].北京教育學院學報（ 自然科學版），2007.4（2）：15-18.
[3]康穎，靜進.孤獨癥的病因分子機制與遺傳生物學研究進展[J].中華行為醫(yī)學與腦科學雜志，2010，19（10）：953-955.
[4]Mitchell S， Brian J， Zwaigenbaum L，et al.Early language and communication development of infants later diagnosed with autism spectrum disorder[J].J Dev Behav Pediatr，2007，27：S69-78.
[5] Filipek PA， Accardo PJ， Baranek GT， et al.The screening and diagnosis of autistic spectrum disorders[J].J Autism Dev Disord，2009，29：439-484.
[6]Liu M，Sun LW，Lü YT，et al.[J].Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu yu Linchuang Kangfu.2010，14（32）：5967-5970.
劉敏，孫良偉，呂涌濤，等.干細胞治療自閉癥：安全性和有效性觀察[J].中國組織工程研究與臨床康復，2010，14（32）：5967-5970.
[7]Szatmari P，MacLean JE，Jones MB，et a1.The familial ag- greffation of the lesser variant in biological and nonbiol-ogieal relatives of PDD probands：a family history study[J].J Child Psychol Psychiatry，2008，41：579-586.
[8] Gillian Parkinson；Neil Humpnrey.Intervention for ch-ildren with languageimpair ments：a model of evidence-based outcome research[J].Journal of Research in Special Educational Needs，2008，8（1）：2-12.
關鍵詞：光遺傳；抑郁癥；抑郁小鼠模型
中圖分類號：F24文獻標識碼：Adoi：10.19311/j.cnki.1672-3198.2019.19.041
抑郁癥是一種會嚴重危害人類身心健康的精神疾病，是當今社會中很常見的一種情緒障礙綜合征。抑郁癥患者會呈現(xiàn)出焦慮，自卑，厭世，心境低落等癥狀，重者甚至產(chǎn)生自殺傾向。隨著社會壓力的不斷增大和現(xiàn)代生活節(jié)奏的加快，抑郁癥發(fā)病率也呈現(xiàn)快速上升的趨勢。據(jù)統(tǒng)計，約13%-20%的人曾有過抑郁的體驗，人群中的抑郁癥終生患病率更高達6.1%-9.5%之多。抑郁癥已然成為世界常見的疾病之一，研究降低其發(fā)病率的科學方法成為了迫在眉睫的事情。抑郁癥的生物學機制以及治療手段都需要進一步的科學突破，近年來光遺傳學的快速發(fā)展，為我們提供了研究神經(jīng)生物學機制的強有力工具。本研究利用光遺傳學技術設計實驗來研究與抑郁癥發(fā)病相關的腦區(qū)，從而為抑郁癥發(fā)病機制理解及治療提供更好的幫助。
1抑郁癥
作為一種嚴重的精神疾病，科學界提出幾種抑郁癥的發(fā)病機制假說，包括幾點：
（1）神經(jīng)環(huán)路假說：該假說認為抑郁癥是由多個腦區(qū)參與的，綜合調(diào)控發(fā)生的。負責情感，決斷，賞罰的腦區(qū)對抑郁癥的關系尤為密切。
（2）單胺類神經(jīng)遞質功能低下假說：多巴胺，去甲腎上腺素和五羥色胺等單胺類物質參與了精神活動，情緒反應，體溫調(diào)節(jié)等生理反應。該假說認為患者腦內(nèi)的單胺遞質水平，即5-羥色胺，多巴胺和去甲腎上腺素神經(jīng)遞質系統(tǒng)功能的低下導致了抑郁癥。
（3）神經(jīng)營養(yǎng)缺乏假說：在神經(jīng)發(fā)育過程中的生長因子對成年大腦的可塑性起著重要的作用。其中作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)中分布最廣泛，含量最多的腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子對神經(jīng)元的生長，分化和損傷修復功能起重要作用。
類似于舍曲林，帕羅西汀和氟西汀的藥物進行的藥物治療和其他形式的治療手段是目前常見的抑郁癥治療方法，雖然這些治療方法的見效較快，但是由于抑郁癥具有高復發(fā)性和隱匿性，患者服用的不少藥物都有不良副作用。
2光遺傳學技術
光遺傳學，是將光敏感離子通道蛋白神經(jīng)元表達，并利用特定波長的光照激發(fā)從而實現(xiàn)對目標對象精細調(diào)控的學科，即通過操縱神經(jīng)元來興奮或抑制靶細胞和靶器官。該技術可以對哺乳動物大腦組織進行無損傷的操控，它具有目的性強、精準度高，細胞特異性強等特點。是由2005年Boyden等人證明光刺激綠藻視蛋白可以使神經(jīng)元產(chǎn)生應答而發(fā)現(xiàn)的技術。近年來，光遺傳學在復雜的生物學機制探究，尤其是腦科學等領域的研究中得到了廣泛的應用。2011年，NatureMethods將光遺傳學技術譽為了21世紀神經(jīng)生物學中最具影響力的技術。
光敏感蛋白在光遺傳研究中發(fā)揮著重要的作用，它是光遺傳學的主要工具，被發(fā)現(xiàn)于單細胞微生物如綠藻、單胞菌的視蛋白中。光敏感蛋白根據(jù)不同的效應可以分為興奮性光敏感蛋白和抑制性光敏感蛋白兩種。視紫紅質-2（ChR2）是目前最常用的興奮性光敏感蛋白，它在被藍光激活后，陽離子內(nèi)流使細胞去極化，產(chǎn)生動作電位，提高興奮性。視紫紅質（NpHR）是一種常見的抑制性光敏感蛋白，在被黃光激活后會使細胞膜超極化，從而抑制細胞的興奮。
光遺傳學技術自問世來，廣泛應用于動物行為研究，比如用光遺傳學技術使果蠅體內(nèi)的多巴胺大量釋放，在斑馬魚的軀體感覺神經(jīng)元的實驗過程中，也發(fā)現(xiàn)光照可以使其產(chǎn)生逃避的游泳活動等。在神經(jīng)生物學領域尤其是精神類疾病等研究中的應用也非常廣泛，可以用于研究焦慮，藥物成癮，恐懼和抑郁癥等領域。利用光遺傳學技術，有研究發(fā)現(xiàn)中腦腹側被蓋區(qū)（VTA）的神經(jīng)元可以讓小鼠表現(xiàn)出糖水偏好減少和社交逃避等特征；光遺傳學刺激內(nèi)側前額葉（mPFC）可以讓“易感”小鼠產(chǎn)生抗抑郁的作用等結論，大量研究表明光遺傳學技術在抑郁癥研究中可以發(fā)揮重要的作用。
3光遺傳學探究抑郁癥發(fā)病實驗設計
3.1腦區(qū)選擇
（1）前額葉皮質：前額葉皮質（PFC）是指覆蓋大腦額葉前部表面的皮層結構。在社會認知的領域中，PFC對情緒認知，社會推理，心理和決策推斷等問題產(chǎn)生了重要影響?，F(xiàn)代研究表明，前額葉皮質功能的異常與抑郁癥相關。
（2）中腦腹側被蓋區(qū)（VTA）：中腦腹側被蓋區(qū)產(chǎn)生的多巴胺可能參與了抑郁癥的發(fā)生。對多巴胺能神經(jīng)元進行特異性的激活或者抑制，可以較為明顯的影響實驗動物的抑郁表現(xiàn)。
（3）伏隔核：伏隔核參與了獎賞環(huán)路的組成，伏隔核的損傷與缺失行為的發(fā)生和發(fā)展有著必然關系。科學家們認為慢性應激是會導致抑郁癥發(fā)病的最主要的因素之一，會最終引起獎賞系統(tǒng)GABA能神經(jīng)元受損。
（4）杏仁核：杏仁核與內(nèi)分泌調(diào)節(jié)和自主神經(jīng)活動的調(diào)節(jié)有著非常密切的關系，因為杏仁核有可能是機體的情緒整合中樞，可以將感覺信息投射到皮層、下丘腦和腦干諸核團，形成意識水平的情緒反應。
3.2前期準備
選擇同批次相同重量的同齡成年小鼠共100只小鼠，其中對照組20只小鼠，實驗組80只小鼠。實驗組共分為16組，四種腦區(qū)，每種腦區(qū)又分別注射興奮性光敏感蛋白ChR2和抑制性光敏感蛋白NpHR，同一腦區(qū)注射相同的光敏感蛋白的小鼠又分為兩組進行不同方式抑郁癥小鼠建模。對照組注射攜帶GFP的病毒載體。各組小鼠在相應腦區(qū)注射相應視蛋白后，按腦區(qū)分類將光纖分別埋入DP，MO，VTA，PFC四種腦區(qū)注射上方附近，術后對小鼠進行單籠飼養(yǎng)，約3到4周后開始進行行為學試驗。3.3建立抑郁癥研究的模型
（1）糖水偏好模型。將各組小鼠放在一系列的溫和應激之下，使其受到不可預知的刺激。這些刺激包括使小鼠挨餓，不定時潑灑冰水，束縛小鼠等等。在經(jīng)過三周的溫和刺激之后，觀察小鼠對糖水的偏好性并同對照組對比，小鼠對于糖水的偏好明顯降低，并同時出現(xiàn)攻擊力降低，毛色變差等現(xiàn)象。判斷為小鼠的缺乏，成功建立抑郁癥基礎模型。
（2）公鼠造模。經(jīng)過篩選，選擇進攻能力較強的大鼠（大白），和進攻能力很弱的小鼠（小黑）進行實驗。將小黑作為入侵鼠放在大白的籠子中，并讓他們進行身體接觸，每天15分鐘左右。在每天其余時間內(nèi)將大白和小黑用帶小孔的透明隔板隔開，讓小黑可以看到聞到大白，從而對小黑造成心理陰影。十五天后，將大白盒小黑共同放入社會交互實驗箱中進行社會交互實驗，試驗箱中分為了角落區(qū)和交互區(qū)。分別在交互區(qū)有大白和無大白的情況下，觀察小黑在角落區(qū)和交互區(qū)停留的時間多少，成功建立抑郁癥基礎模型。
3.4利用光遺傳學技術操縱興奮或抑制小鼠的腦區(qū)
分別用公鼠造模和糖水偏好兩種基礎模型得到的抑郁小鼠進行光遺傳學操作實驗。已注射光敏感蛋白的實驗小鼠，可以在適合光刺激情況下興奮（ChR2）或抑制（NpHR）該腦區(qū)的神經(jīng)元，從而實現(xiàn)對該4個腦區(qū)的調(diào)控，探究相應腦區(qū)的興奮或抑制對抑郁癥小鼠模型行為的影響。
將不同的抑郁癥建模方式得到的小鼠，選擇固定頻率對相應腦區(qū)進行光刺激一段時間，對于“公鼠造模模型實驗組”，統(tǒng)計實驗小鼠在角落區(qū)和交互區(qū)停留的時間比例，對于“糖水偏好實驗組”，觀察統(tǒng)計實驗小鼠對糖水的喜好程度，根據(jù)光刺激前后小鼠行為變化來推斷抑郁癥發(fā)病相關的腦區(qū)。
4總結與展望
