時(shí)間：2023-06-18 10:35:44
序論：在您撰寫(xiě)分子遺傳學(xué)綜述時(shí)，參考他人的優(yōu)秀作品可以開(kāi)闊視野，小編為您整理的7篇范文，希望這些建議能夠激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，引導(dǎo)您走向新的創(chuàng)作高度。
【關(guān)鍵詞】分子遺傳學(xué)；教學(xué)；方法
分子遺傳學(xué)是在分子水平研究生命現(xiàn)象的學(xué)科，已經(jīng)成為21世紀(jì)生命科學(xué)前沿學(xué)科，它的基礎(chǔ)理論已經(jīng)滲透到生命科學(xué)幾乎所有的領(lǐng)域，是涵蓋面非常廣的一門(mén)學(xué)科，同時(shí)也是現(xiàn)代生物科學(xué)發(fā)展最快的學(xué)科之一。從分子遺傳學(xué)發(fā)展以來(lái)逐漸從重視形態(tài)、代謝功能方面的演變延伸到研究基因和基因的結(jié)構(gòu)和功能等的演變。
分子遺傳學(xué)目前已成為綜合性大學(xué)、理工科大學(xué)、農(nóng)林院校等生命科學(xué)類(lèi)各專(zhuān)業(yè)研究生的專(zhuān)業(yè)學(xué)位課，是繼本科階段課程如生物化學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳學(xué)等課程后的進(jìn)一步學(xué)習(xí)，對(duì)提高研究生的基本科學(xué)素質(zhì)、提升專(zhuān)業(yè)素養(yǎng)和增強(qiáng)科研創(chuàng)新等有著十分密切的聯(lián)系和重要的影響。以分子遺傳學(xué)為基礎(chǔ)的遺傳工程則正在發(fā)展成為一個(gè)新興的工業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域，許多國(guó)家已經(jīng)把分子遺傳學(xué)及技術(shù)列為優(yōu)先發(fā)展的高科技項(xiàng)目。在這樣的發(fā)展潮流中，如何使學(xué)生能夠及時(shí)了解快速發(fā)展的分子遺傳學(xué)理論和技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，為我國(guó)生命科學(xué)培養(yǎng)富有開(kāi)拓精神、創(chuàng)新精神，具有國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力的高層次、高質(zhì)量的人才，研究生分子遺傳學(xué)課程的改革必將成為我們探索的一個(gè)重要課題。
一、學(xué)院特色
生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)科是生命科學(xué)領(lǐng)域發(fā)展最為迅速的前沿學(xué)科之一，也是中國(guó)計(jì)量學(xué)院近年來(lái)重點(diǎn)建設(shè)的學(xué)科，2004年入選浙江省重點(diǎn)扶植學(xué)科，2005年獲碩士學(xué)位點(diǎn)授予權(quán)。該學(xué)科的主要特色包括分子檢測(cè)和檢驗(yàn)技術(shù)、重大生物安全和生物入侵問(wèn)題、植物天然活性產(chǎn)物的提取與利用、環(huán)境分子生物學(xué)與農(nóng)產(chǎn)品安全等方面的研究，均從基因或蛋白質(zhì)等方面來(lái)闡明具體的機(jī)理，這與分子遺傳學(xué)存在著密切聯(lián)系。隨著分子遺傳學(xué)概念的深入人心，為了適應(yīng)培養(yǎng)基礎(chǔ)厚、知識(shí)寬、素質(zhì)高、能力強(qiáng)、面向21世紀(jì)開(kāi)拓創(chuàng)新的生命科學(xué)優(yōu)秀基礎(chǔ)性人才的需要，結(jié)合我院專(zhuān)業(yè)特色和人才培養(yǎng)計(jì)劃，2011年新增《分子遺傳學(xué)》課程為本學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)碩士研究生的專(zhuān)業(yè)學(xué)位課，并于2011-2012年第二學(xué)期正式實(shí)施教學(xué)工作。
二、教材的選擇和教學(xué)內(nèi)容的整合優(yōu)化
本課程選用了以高等教育出版社出版的由路鐵剛、丁毅主編的《分子遺傳學(xué)》為教材。以南京大學(xué)出版社出版的由孫乃恩，孫東旭，煦編著的《分子遺傳學(xué)》和高等教育出版社出版的由朱玉賢等編著的《現(xiàn)代分子生物學(xué)》等為參考教材，同時(shí)也選擇了一些相關(guān)的動(dòng)畫(huà)網(wǎng)絡(luò)電子教材。在教材上突出基礎(chǔ)性、綜合性、前沿性、時(shí)代性、創(chuàng)新性和引導(dǎo)性，并且符合相應(yīng)的課時(shí)數(shù)，同時(shí)避免與其它課程的重復(fù)，能夠適合應(yīng)用型人才的教材。
同時(shí)，從分子遺傳學(xué)的特色出發(fā)，優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容，注重知識(shí)的橫向和縱向銜接，刪改與生物化學(xué)、分子生物學(xué)等相關(guān)課程間重復(fù)交叉內(nèi)容，同時(shí)補(bǔ)充本教材內(nèi)容的不足，使教學(xué)內(nèi)容體現(xiàn)課程的特色性。課堂教學(xué)主要是講授基因組學(xué)與后基因組學(xué)、基因組結(jié)構(gòu)與功能、基因表達(dá)調(diào)控、基因突變與DNA損傷修復(fù)、遺傳重組與轉(zhuǎn)座、雜交育種與誘變育種、突變體的創(chuàng)制與應(yīng)用、分子遺傳學(xué)研究的常用技術(shù)介紹等。同時(shí)在講授基礎(chǔ)知識(shí)的同時(shí)也結(jié)合相關(guān)前沿?zé)狳c(diǎn)領(lǐng)域的知識(shí)和進(jìn)展，如適當(dāng)引入學(xué)科前沿內(nèi)容以激發(fā)學(xué)生的學(xué)生興趣，并將最新的知識(shí)理論和科學(xué)熱點(diǎn)通過(guò)文獻(xiàn)介紹給學(xué)生。不僅達(dá)到授課內(nèi)容國(guó)際化、教學(xué)理念前瞻化，而且可以培養(yǎng)研究生學(xué)習(xí)外文文獻(xiàn)的能力和思考科學(xué)問(wèn)題的方法和習(xí)慣。教學(xué)過(guò)程全部采用多媒體與動(dòng)畫(huà)網(wǎng)絡(luò)資源的教學(xué)方法相結(jié)合。在講授部分內(nèi)容時(shí)，注重啟發(fā)研究生尋找自己相關(guān)課題進(jìn)一步研究的新切入點(diǎn)，引導(dǎo)其通過(guò)科研和實(shí)驗(yàn)過(guò)程去解決問(wèn)題。實(shí)現(xiàn)在有限的課時(shí)中講授分子遺傳學(xué)的新發(fā)展、新觀(guān)念，為學(xué)生的思維打開(kāi)一扇通向未來(lái)之門(mén)。
三、采用啟發(fā)式、引導(dǎo)式、討論式的教學(xué)方法
研究生教育是我國(guó)教育結(jié)構(gòu)中最高層次的教育，培養(yǎng)的研究生不僅要有堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)，還要有鮮明的創(chuàng)新性，所以對(duì)于這種層次的教學(xué)，需要采用多種教學(xué)方式如啟發(fā)式、引導(dǎo)式、討論式。首先，在授課中進(jìn)行啟發(fā)式教學(xué)，引導(dǎo)學(xué)生積極思考，按照提出問(wèn)題、分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的思路進(jìn)行講解，而不是簡(jiǎn)單的背記已有的結(jié)論，并在教學(xué)過(guò)程中增加專(zhuān)業(yè)英語(yǔ)詞匯，通過(guò)課堂上的反復(fù)講授，既能增加學(xué)生的專(zhuān)業(yè)英語(yǔ)詞匯量，幫助學(xué)生更好地理解教材內(nèi)容，又提高了閱讀外文文獻(xiàn)的能力，為將來(lái)的專(zhuān)業(yè)及科研工作打下良好的基礎(chǔ)。其次，為了進(jìn)一步鞏固理論課堂所學(xué)知識(shí)，并將理論與將來(lái)的研究課題聯(lián)系起來(lái)，設(shè)立相關(guān)的討論課，每個(gè)學(xué)生以分子遺傳學(xué)技術(shù)結(jié)合自己的研究方向，寫(xiě)出課題設(shè)計(jì)思路，可以是目前正在研究的課題，也可以是假想的課題。讓學(xué)生在課余時(shí)間通過(guò)文獻(xiàn)查找和整理，準(zhǔn)備討論提綱，并分組討論。鼓勵(lì)學(xué)生積極發(fā)言，闡明自己的科研思路，同時(shí)教師通過(guò)積極正確的引導(dǎo)，使課題設(shè)計(jì)更加合理，并賦予創(chuàng)新性。最后，進(jìn)行課堂學(xué)術(shù)報(bào)告競(jìng)賽活動(dòng)，通過(guò)設(shè)計(jì)一些學(xué)科發(fā)展前沿與動(dòng)態(tài)相關(guān)的討論議題，如突變體創(chuàng)制的應(yīng)用前景、轉(zhuǎn)基因作物的安全性等。
四、采用綜合測(cè)評(píng)的方式評(píng)定成績(jī)
本課程成績(jī)的評(píng)定采用綜合測(cè)評(píng)的方式，進(jìn)行基礎(chǔ)理論閉卷考試、綜述撰寫(xiě)和課堂討論表現(xiàn)相結(jié)合的方法，讓研究生通過(guò)查閱文獻(xiàn)，撰寫(xiě)綜述，課堂討論等，鍛煉研究生的歸納總結(jié)，推陳出新，開(kāi)拓創(chuàng)新的綜合能力。也有利于提高研究生的學(xué)習(xí)熱情，并充分調(diào)動(dòng)研究生主動(dòng)探究的積極性和主動(dòng)性。這種考試方法的建立，也增加了對(duì)學(xué)生的學(xué)習(xí)情況評(píng)價(jià)的客觀(guān)性，對(duì)創(chuàng)新能力培養(yǎng)和教學(xué)評(píng)價(jià)方式作有益的探索。
綜上所述，本次教學(xué)改革將全面推進(jìn)研究生的教學(xué)工作，并且使教學(xué)內(nèi)容體現(xiàn)基礎(chǔ)性、綜合性、前沿性、時(shí)代性、創(chuàng)新性和引導(dǎo)性。不僅可以有效地提高分子遺傳學(xué)的教學(xué)效果和處理與其它相關(guān)課程的銜接問(wèn)題，而且還可以增強(qiáng)研究生的自主學(xué)習(xí)、科研創(chuàng)新等能力，讓他們實(shí)現(xiàn)科學(xué)知識(shí)向技術(shù)的轉(zhuǎn)化，為研究生獨(dú)立開(kāi)展項(xiàng)目研究和申報(bào)課題奠定基礎(chǔ)，最終產(chǎn)出一定的科研成果，甚至實(shí)際的生產(chǎn)力。
參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞：動(dòng)物遺傳學(xué) 動(dòng)物科學(xué) 遺傳檢測(cè) 細(xì)胞遺傳學(xué) 分子遺傳學(xué)
中圖分類(lèi)號(hào)：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C DOI：10.3969/j.issn.1672-8181.2013.23.150
動(dòng)物遺傳學(xué)是動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)的重要專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課程。遺傳學(xué)具有基礎(chǔ)理論抽象、邏輯思維強(qiáng)、知識(shí)面涵蓋廣等特點(diǎn)，是動(dòng)物育種的理論基礎(chǔ)。遺傳學(xué)的基本概念和原理來(lái)自于生產(chǎn)、生活和科學(xué)研究的實(shí)踐，遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)是遺傳學(xué)教學(xué)中重要的環(huán)節(jié)，是理論教學(xué)的深化和補(bǔ)充。近些年，隨著遺傳學(xué)的不斷發(fā)展，取得了很多的進(jìn)展，特別是隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，遺傳學(xué)進(jìn)入了全新的分子遺傳學(xué)時(shí)代，較之之前的形態(tài)遺傳學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)而言，分子遺傳學(xué)更為抽象，因此，長(zhǎng)期沿用下來(lái)的經(jīng)典遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)顯然已經(jīng)不能滿(mǎn)足遺傳學(xué)快速發(fā)展的需求，從而對(duì)遺傳學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)課提出了更高的要求。
針對(duì)以上情況，結(jié)合我校動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)設(shè)置的實(shí)際情況，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的摸索和創(chuàng)新，我校動(dòng)物科學(xué)學(xué)院近年來(lái)開(kāi)始開(kāi)設(shè)了實(shí)用遺傳檢測(cè)技術(shù)課程，學(xué)時(shí)120學(xué)時(shí)。主要通過(guò)實(shí)驗(yàn)制備和觀(guān)察，使學(xué)生從細(xì)胞、分子及群體水平上掌握遺傳學(xué)的實(shí)驗(yàn)操作方法；學(xué)會(huì)基本儀器設(shè)備的使用技巧；了解遺傳學(xué)研究方法和手段，進(jìn)一步加強(qiáng)學(xué)生獨(dú)立分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力，獨(dú)立操作和創(chuàng)新能力及培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力。同時(shí)注意培養(yǎng)學(xué)生實(shí)事求是，嚴(yán)肅認(rèn)真的科學(xué)操作和良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，為今后的工作和研究打下良好基礎(chǔ)。本文將就本課程的設(shè)置進(jìn)行綜述，旨在為相關(guān)學(xué)科今后在遺傳學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)課程的開(kāi)設(shè)方面提供借鑒。
1 細(xì)胞遺傳學(xué)篇
細(xì)胞遺傳學(xué)是研究細(xì)胞中染色體遺傳規(guī)律的學(xué)科。 同時(shí)也是在細(xì)胞層次上進(jìn)行遺傳學(xué)研究的遺傳學(xué)分支學(xué)科。著重研究細(xì)胞中染色體的起源、組成、變化、行為和傳遞等機(jī)制及其生物學(xué)效應(yīng)。
圍繞細(xì)胞遺傳學(xué)，設(shè)立了如下實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：①細(xì)胞培養(yǎng)。主要講解細(xì)胞的體外培養(yǎng)原理、條件、技巧和注意事項(xiàng)。主要通過(guò)采集動(dòng)物外周血培養(yǎng)2個(gè)周期，用以觀(guān)察培養(yǎng)細(xì)胞在體外分裂情況；②培養(yǎng)細(xì)胞的同步化處理。主要講解在體外培養(yǎng)條件下同步化處理的原理、條件、技巧和注意事項(xiàng)。處理培養(yǎng)細(xì)胞分裂中期同步化；③外周血淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本制作。主要包括以下過(guò)程：收集細(xì)胞低滲處理固定涂片染色觀(guān)察；④骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備。主要包括以下過(guò)程：秋水仙素處理取管狀骨沖取骨髓細(xì)胞低滲處理固定涂片染色觀(guān)察；⑤果蠅唾液腺染色體標(biāo)本的制備。主要包括以下過(guò)程：培養(yǎng)果蠅三齡幼蟲(chóng)解剖分離唾液腺水解處理染色壓片觀(guān)察；⑥染色體顯G帶。主要包括以下過(guò)程：制備染色體標(biāo)本片胰蛋白酶處理染色觀(guān)察；⑦各種顯微鏡的調(diào)試實(shí)用實(shí)踐。主要包括熟悉普通研究顯微鏡，相差顯微鏡，暗場(chǎng)顯微鏡，熒光顯微鏡的光路合軸、聚光器調(diào)焦、濾鏡選用等操作；⑧染色體標(biāo)本的觀(guān)察照相。主要包括以下過(guò)程：顯微鏡下觀(guān)察制備好的染色體標(biāo)本片統(tǒng)計(jì)分裂相的比例數(shù)細(xì)胞染色體數(shù)選形態(tài)良好數(shù)目占眾數(shù)的分裂相拍照；⑨染色體核型分析。主要包括以下過(guò)程：染色體照片photoshop軟件裁剪整理同源染色體配對(duì)排序測(cè)染色體臂長(zhǎng)計(jì)算相對(duì)長(zhǎng)度和臂比。
2 分子遺傳學(xué)篇
隨著遺傳學(xué)的迅猛發(fā)展，分子遺傳學(xué)已經(jīng)滲透到了遺傳學(xué)的各個(gè)角度，分子遺傳學(xué)也因此在教學(xué)中已經(jīng)占有了相當(dāng)大的比重。分子遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)也成為研究者使用得最多的分析手段，這就進(jìn)一步要求我們的實(shí)驗(yàn)教學(xué)也要適應(yīng)遺傳學(xué)的發(fā)展。
圍繞分子遺傳學(xué)，設(shè)立了如下實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：①動(dòng)物組織（肌肉）中DNA的提取。主要包括以下過(guò)程：采集動(dòng)物組織材料破壞細(xì)胞膜和核膜白和DNA分離抽提純化DNA乙醇沉淀DNA檢測(cè)DNA純度和量；②動(dòng)物性別鑒定。主要包括以下過(guò)程：提取動(dòng)物組織DNAsry特異引物PCR擴(kuò)增電泳判斷；③DNA酶切電泳。主要包括以下過(guò)程：λDNA限制性?xún)?nèi)切酶酶切瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)；④動(dòng)物來(lái)源物種鑒定。主要包括以下過(guò)程：樣品采集基因組DNA提取PCR-RFLP瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)判斷；⑤動(dòng)物組織總RNA的提取。主要包括以下過(guò)程：樣品采集RNA提取瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)；⑥Total RNA質(zhì)量的檢測(cè)及cDNA的制備。主要包括以下過(guò)程：紫外分光光度計(jì)檢測(cè)Total RNA質(zhì)量反轉(zhuǎn)錄cDNA檢測(cè)；⑦microRNA指紋圖譜技術(shù)（MTFP）在肉品質(zhì)檢測(cè)中的應(yīng)用。主要包括以下過(guò)程：樣品采集總RNA提取及檢測(cè)cDNA的制備及檢測(cè)PCR反應(yīng)及檢測(cè)PAGE電泳檢測(cè)和分析；⑧PCR-RFLP鑒定ABO基因型。主要包括以下過(guò)程：毛囊（毛發(fā)）中總DNA的提取及電泳檢測(cè)糖基轉(zhuǎn)移酶基因片段擴(kuò)增及電泳檢測(cè)擴(kuò)增片段限制性酶切及電泳檢測(cè)。
遺傳學(xué)是研究生物遺傳和變異的科學(xué)。隨著現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，遺傳學(xué)已成為生命科學(xué)領(lǐng)域中發(fā)展最為迅速的基礎(chǔ)學(xué)科之一，而實(shí)驗(yàn)實(shí)踐教學(xué)環(huán)節(jié)為培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)思維、探索思維和實(shí)踐創(chuàng)新能力提供重要途徑，并且可以提高學(xué)生的實(shí)際動(dòng)手能力和分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力。遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法是遺傳學(xué)建立和發(fā)展的基礎(chǔ)，如今現(xiàn)代的遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)已廣泛滲透到生命科學(xué)的各個(gè)分支領(lǐng)域，并正在發(fā)揮其獨(dú)特的作用。本文通過(guò)數(shù)名長(zhǎng)期工作在遺傳學(xué)本科教學(xué)一線(xiàn)的教師多年的教學(xué)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)設(shè)置的特色，摸索了一套適合動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)本科生實(shí)際的實(shí)驗(yàn)課教學(xué)體系，旨在為培養(yǎng)理論與實(shí)踐兼?zhèn)涞母咚刭|(zhì)動(dòng)物科學(xué)方向的本科生做出一定的貢獻(xiàn)，也期望為國(guó)內(nèi)同行遺傳學(xué)教學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)課的開(kāi)設(shè)提供一定的借鑒作用。
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作者簡(jiǎn)介：蘇蕊，內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)科院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010018
張燕軍，內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)科院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010018
[關(guān)鍵詞]林麝；分子遺傳學(xué)；分子標(biāo)記；人工繁育；泌香
林麝Moschusberezovskii又名麝鹿、香獐，屬偶蹄目Artiodactyla、麝科Moschidae、麝屬M(fèi)oschus，是目前養(yǎng)殖規(guī)模較大、數(shù)量最多的麝科動(dòng)物之一。雄麝香腺分泌的外激素――麝香在傳統(tǒng)中藥領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用[1-2]。由于國(guó)際香料市場(chǎng)和醫(yī)療行業(yè)對(duì)麝香需求量的大增，人類(lèi)“殺麝取香”和對(duì)其棲息地的嚴(yán)重破壞，已使該物種野生種群數(shù)量急劇減少，現(xiàn)存麝類(lèi)已面臨瀕危。目前，林麝已被列人CITES附錄Ⅰ中，《中國(guó)瀕危動(dòng)物紅皮書(shū)》將麝列為瀕危或易危動(dòng)物[3]。我國(guó)1988年頒布的野生動(dòng)物保護(hù)法將林麝列為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物，2002年又將其提升為一級(jí)保護(hù)動(dòng)物。麝的珍貴引起了許多生物學(xué)工作者的濃厚興趣，在林麝的生態(tài)學(xué)[4]、行為學(xué)[5]、分類(lèi)學(xué)[6]、生理學(xué)[7]以及麝香的藥理學(xué)與臨床應(yīng)用[8]等方面開(kāi)展了積極的探索。
近年來(lái)，隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的不斷發(fā)展，細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等新興生物技術(shù)開(kāi)始被不斷地運(yùn)用到林麝遺傳育種工作中，為林麝的育種保護(hù)工作注入新的活力。其中，以新興發(fā)展起來(lái)的分子遺傳標(biāo)記技術(shù)最引人注目，分子遺傳標(biāo)記的出現(xiàn)使基于此類(lèi)標(biāo)記的選擇育種技術(shù)有了實(shí)現(xiàn)的可行性，顯現(xiàn)出了巨大的應(yīng)用潛力。當(dāng)前，分子遺傳標(biāo)記在林麝遺傳育種中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在遺傳分類(lèi)、人工繁育、泌香、疾病等方面。本文就分子遺傳學(xué)在林麝研究中的應(yīng)用現(xiàn)狀做一綜述，并對(duì)后期研究進(jìn)行了展望，以期為提高林麝的生產(chǎn)性能提供參考。
1林麝分子遺傳標(biāo)記
分子遺傳標(biāo)記是基于DNA差異進(jìn)行個(gè)體或群體遺傳多樣性分析的有力工具。常用于林麝遺傳多樣性分析的分子標(biāo)記方法有AFLP，mtDNA，微衛(wèi)星DNA等。
AFLP技術(shù)在種群結(jié)構(gòu)和差異的調(diào)查中起著非常重要作用[9]。陳軒[10]根據(jù)AFLP分子標(biāo)記的特點(diǎn)，以四川養(yǎng)麝研究所白沙養(yǎng)麝場(chǎng)21只林麝樣品和金鳳山養(yǎng)麝場(chǎng)14只林麝樣品為材料，對(duì)2個(gè)種群的遺傳多樣性進(jìn)行了比較分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)四川養(yǎng)麝研究所白沙養(yǎng)麝場(chǎng)圈養(yǎng)的2個(gè)林麝種群均具有較高水平的遺傳多樣性，但金鳳山種群具有相對(duì)較高的遺傳多樣性。趙莎莎[11]利用相同的原材料進(jìn)一步檢測(cè)了22對(duì)選擇性引物組合，共獲得了908個(gè)AFLP多態(tài)片段，結(jié)果證明了麝香高產(chǎn)組在多態(tài)位點(diǎn)比率（PPL）上極顯著高于參照組和低產(chǎn)組，在遺傳多樣性水平上也有更高的整體競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。
mtDNA是核外遺傳物質(zhì)，由于mtDNA的控制區(qū)富含A，T堿基，屬于遺傳高變區(qū)，進(jìn)化速度比其他區(qū)域快，多態(tài)性豐富，常被應(yīng)用到野生動(dòng)物群體遺傳多樣性檢測(cè)中。彭紅元等[12]通過(guò)分析四川省3個(gè)本地種群中林麝mtDNA控制區(qū)域582bp片段，發(fā)現(xiàn)94個(gè)變異位點(diǎn)，在109個(gè)個(gè)體中檢測(cè)出27個(gè)單倍型，表明3個(gè)群體間很少進(jìn)行遺傳交流，建議建立系譜以增加群體間基因的交流。2014年，馮慧等[13]調(diào)查了陜西省林麝1個(gè)圈養(yǎng)種群3個(gè)野生種群mtDNAD-Loop632bp片段的遺傳多樣性和種群結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明，陜西省林麝群體mtDNAD-loop區(qū)序列存在著較豐富的變異和遺傳多樣性，鳳縣野生群體和鳳縣養(yǎng)殖場(chǎng)群體的核苷酸多樣性和單倍型多樣較高，養(yǎng)殖場(chǎng)種群沒(méi)有出現(xiàn)近親繁殖及遺傳多樣性下降的情況。鳳縣野生群體和鳳縣養(yǎng)殖場(chǎng)群體兩者遺傳分化較小，存在著較高的基因流水平。
微衛(wèi)星DNA廣泛分布與真核生物基因組中，具有多態(tài)性高、共顯性遺傳、選擇中性、易于操作等特點(diǎn)，是一種極具應(yīng)用價(jià)值的分子遺傳標(biāo)記，由于微衛(wèi)星重復(fù)序列在群體間和不同的個(gè)體間通常表現(xiàn)出很高的序列變異性，并且這種變異呈共顯遺傳，因而在微衛(wèi)星重復(fù)序列廣泛應(yīng)用于物種遺傳多樣分析。2004年，鄒方東[14]運(yùn)用微衛(wèi)星標(biāo)記法構(gòu)建了3個(gè)林麝基因組微衛(wèi)星富集文庫(kù)，每個(gè)文庫(kù)含有上萬(wàn)個(gè)轉(zhuǎn)化子。2005年，Zou等[15]又運(yùn)用了改進(jìn)的富集文庫(kù)方式來(lái)分離微衛(wèi)星位點(diǎn)，獲得了野生林麝的多態(tài)位點(diǎn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)70%的基因組文庫(kù)為（AC）_n文庫(kù)，8個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)呈現(xiàn)高度多態(tài)性，可作為研究林麝的分子遺傳標(biāo)記。2006年，夏珊[16]對(duì)構(gòu)建林麝的微衛(wèi)星文庫(kù)篩選了6個(gè)多態(tài)性好的座位，并對(duì)林麝的遺傳多樣性進(jìn)行初步的分析，6個(gè)微衛(wèi)星座位的多態(tài)信息含量（PIC）最低為0.6214，最高為0.7984，說(shuō)明這6個(gè)林麝微衛(wèi)星座位具有高度多態(tài)性，進(jìn)一步證明了微衛(wèi)星DNA是很好的分子遺傳標(biāo)記。
2林麝遺傳分類(lèi)研究
目前，對(duì)林麝的遺傳分類(lèi)有3種研究手段，分別為形態(tài)解剖學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)。一種是根據(jù)外形、頭骨和距骨的形態(tài)特點(diǎn)以及生態(tài)習(xí)性、分布等認(rèn)為麝確是一個(gè)獨(dú)立物種[17]。陳服官等[18]根據(jù)林麝生物標(biāo)本，再一次肯定了這種分類(lèi)方法。林麝作為麝科動(dòng)物一個(gè)亞種除了在形態(tài)解剖學(xué)上得到了明確的肯定外，從細(xì)胞遺傳學(xué)特征來(lái)看，也得到了有力的支持。細(xì)胞的染色體組型和染色體帶型都代表著種的特性，它為不同物種在分類(lèi)研究和確定其在進(jìn)化過(guò)程中的位置提供了一個(gè)重要的依據(jù)。2004年，鄒方東等[19]以林麝外周血淋巴細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料，首先建立了適合林麝淋巴細(xì)胞增殖的培養(yǎng)體系，并用培養(yǎng)出的細(xì)胞制備染色體，確定林麝核型是2N=58，且全都是端著絲粒染色體，還首次應(yīng)用染色體G-帶技術(shù)，對(duì)林麝染色體的G-帶帶型進(jìn)行了研究，確定了林麝染色體是2N=58，且全都是端著絲粒染色體，這與其他鹿科動(dòng)物存在較大差異。結(jié)果表明，從細(xì)胞遺傳學(xué)角度將麝分為單獨(dú)一科也是比較合理的。
隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，麝作為獨(dú)立的科在分子水平上相繼得到了印證。Kuznetsova等[20]對(duì)鹿科家族成員和其他偶蹄動(dòng)物的線(xiàn)粒體基因12S和16SrRNA（2445bp）的序列和核β-spectrin基因（828bp）的區(qū)域進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)鹿科和麝存在幾個(gè)分子共源性特征。劉學(xué)東等[21]則利用測(cè)得梅花鹿、坡鹿、原麝和林麝的線(xiàn)粒體12SrRNA基因全序列，與GenBank中檢索到的鼷鹿、長(zhǎng)頸鹿和牛12SrRNA基因全序列進(jìn)行對(duì)比，分別應(yīng)用ME，ML，MP方法重建系統(tǒng)樹(shù)，發(fā)現(xiàn)3種樹(shù)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)一致，結(jié)果顯示麝、鹿、牛、長(zhǎng)頸鹿均各自為單系群，且麝作為一個(gè)單系進(jìn)化。此外，采用PCR技術(shù)和序列測(cè)定方法從線(xiàn)粒體DNA上得到367bp的細(xì)胞色素b基因片段序列，分析其序列可得出在麝、獐、麂和鹿的系統(tǒng)進(jìn)化中，麝約在600萬(wàn)年前與鹿科分歧，而鹿科的3個(gè)亞科是在350～500萬(wàn)年前開(kāi)始分歧，表明麝可單獨(dú)作為麝科[22]。張亮則采用克隆SRY基因的CDS區(qū)的方法，得到林麝和馬麝的SRY基因，對(duì)其進(jìn)行分析顯示，支持麝作為獨(dú)立一科的觀(guān)點(diǎn)[23]。2009年，彭紅元等[12]測(cè)定了林麝全線(xiàn)粒體序列，分別運(yùn)用MP，Baryes方法與其他22種反芻亞目的動(dòng)物相關(guān)基因序列進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析，表明林麝與鹿科動(dòng)物的親緣關(guān)系最為接近，并單獨(dú)形成一支，在?？坪吐箍浦胺只鰜?lái)，為鹿科、?？苹榻忝萌骸?012年，馮慧等[13]從秦嶺林麝的毛發(fā)樣品中提取得到線(xiàn)粒體DNACytb基因的部分序列，并對(duì)其進(jìn)行序列分析，發(fā)現(xiàn)林麝、原麝、馬麝、喜馬拉雅麝、黑麝是5種獨(dú)立的種，林麝與原麝的親緣關(guān)系最近，進(jìn)一步彌補(bǔ)了現(xiàn)有形態(tài)分類(lèi)研究的不足，得到更有說(shuō)服力的分析結(jié)果。截至目前，運(yùn)用各種克隆方法得到的林麝DNA序列，對(duì)其分析后發(fā)現(xiàn)其遺傳學(xué)分類(lèi)與形態(tài)解剖學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)得到的結(jié)果是相同，對(duì)麝作為單獨(dú)一個(gè)物種的結(jié)果進(jìn)行了充分的肯定。
3林麝分子遺傳學(xué)在人工繁育上的應(yīng)用
經(jīng)過(guò)50多年的發(fā)展，我國(guó)在林麝的人工繁育方面取得了不少優(yōu)秀成果。但是，由于基礎(chǔ)研究及資金等方面的問(wèn)題，我國(guó)的圈養(yǎng)林麝規(guī)模一直徘徊在6000只左右[24]，并且在林麝養(yǎng)殖過(guò)程中出現(xiàn)的種群退化、后代抗病力下降等問(wèn)題也不斷凸顯，因此，加大對(duì)林麝的人工繁育研究，特別是基礎(chǔ)研究工作力度顯得尤為重要。2004年，鄒方東等[25]首次成功克隆了與林麝生殖相關(guān)的核β-A亞基成熟肽序列，為林麝的人工繁育和麝資源的保護(hù)利用提供了相關(guān)基礎(chǔ)資料。也有人對(duì)俄羅斯西伯利亞地區(qū)、遠(yuǎn)東地區(qū)和薩哈林島的麝進(jìn)行遺傳多樣性分析，發(fā)現(xiàn)隨著棲息地的分裂，麝的近親繁殖遺傳多樣性在不斷上升，進(jìn)而出現(xiàn)種群隔離現(xiàn)象[26]。此外，岳碧松研究團(tuán)隊(duì)對(duì)四川省米亞羅、金鳳、馬爾康3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的林麝進(jìn)行微衛(wèi)星分析，表明都是有效的群體規(guī)模，其遺傳結(jié)構(gòu)具有重要的保護(hù)意義，并建議在林麝人工育種時(shí)應(yīng)當(dāng)充分考慮這種遺傳結(jié)構(gòu)[27]，這為林麝的選育工作提供了新的認(rèn)識(shí)。2013年，岳碧松研究團(tuán)隊(duì)再次對(duì)四川米亞羅地區(qū)人工繁育林麝的多態(tài)性進(jìn)行微衛(wèi)星分析，發(fā)現(xiàn)由于引入新的血緣，林麝的雜合程度和遺傳多樣性在不斷增加[28]，為林麝的人工繁殖管理提供了一種新的方法。
4分子遺傳學(xué)與林麝泌香的關(guān)系
獲取麝香是保護(hù)林麝遺傳資源的本質(zhì)因素，提高麝香的產(chǎn)量，對(duì)林麝泌香相關(guān)的研究已經(jīng)從組織解剖水平深入到泌香分子機(jī)制的研究。陳軒[10]分析了林麝AFLP的多態(tài)性與產(chǎn)香量的關(guān)系，篩選出34個(gè)在高產(chǎn)組和低產(chǎn)組間等位基因頻率分布有顯著（P參照組>低產(chǎn)組（P
白康[29]采用PCR-SSCP、測(cè)序分析等生物技術(shù)手段對(duì)雄性激素受體（AR）基因外顯子1，4，8進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，AR基因外顯子1，4，8在所做樣本中不存在多態(tài)性，說(shuō)明雄性林麝AR基因外顯子（1，4，8）在林麝中具有高度保守性。王勤等[30]克隆了調(diào)控林麝的繁殖和泌香的重要垂體激素FSH-β和LH-β基因，這為開(kāi)展林麝泌香過(guò)程中基因表達(dá)的關(guān)聯(lián)分析提供了一定的理論依據(jù)。
5分子遺傳學(xué)與林麝疾病相關(guān)分析
麝類(lèi)疾病是長(zhǎng)期阻礙林麝人工養(yǎng)殖發(fā)展的關(guān)鍵因素。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，分子遺傳標(biāo)記技術(shù)已經(jīng)運(yùn)用到林麝的疾病診治過(guò)程中，這為尋找麝類(lèi)疾病起因，制定相應(yīng)抗體提供了一種新的借鑒方法。羅燕等[31]對(duì)林麝肺源致病性Escherichiacoli毒力基因進(jìn)行了檢測(cè)及鑒定，為進(jìn)一步研究林麝肺源致病性E.coli的致病機(jī)制奠定了基礎(chǔ)，同時(shí)為防治林麝E.coli性肺炎提供了依據(jù)。2013年，鄒丹丹等[32]克隆和表達(dá)了林麝IL-1β基因，為其用于林麝疾病的防治奠定基礎(chǔ)。李靈等[33]以四川養(yǎng)麝研究所的115只林麝個(gè)體為對(duì)象，通過(guò)對(duì)MHCⅡ類(lèi)經(jīng)典的DR和DQ座位的分離、遺傳變異分析和化膿性疾病相關(guān)性的分析，揭示了林麝MHCⅡ基因多態(tài)性的維持機(jī)制及其與化膿性疾病的密切關(guān)系。周鑫等[34]為調(diào)查林麝肺源致病性大腸桿菌O因子血清型以及相關(guān)耐藥基因的流行狀況，采用玻板凝集反應(yīng)法進(jìn)行O因子血清型鑒定，同時(shí)用PCR方法檢測(cè)耐藥基因，發(fā)現(xiàn)29株菌皆攜帶多種耐藥基因，這對(duì)林麝臨床科學(xué)合理用藥有重要指導(dǎo)意義。
6問(wèn)題及展望
6.1存在的問(wèn)題
6.1.1林麝馴化程度低，對(duì)分子遺傳工作的開(kāi)展帶來(lái)極大不便從1958年以來(lái)，全國(guó)陸陸續(xù)續(xù)開(kāi)展了林麝的馴化研究，并取得了一定的成果，其中包括陜西鎮(zhèn)坪、四川馬爾康、重慶南川等養(yǎng)殖基地[35-37]。但由于科研經(jīng)費(fèi)有限及林麝養(yǎng)殖效益等問(wèn)題，馴化研究并沒(méi)有持續(xù)，這造成了林麝的馴化程度很低。這給林麝分子遺傳研究過(guò)程中的樣品采集、生產(chǎn)性能測(cè)定等工作帶來(lái)極大不便，也給林麝帶來(lái)強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)。強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)不僅給實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性與穩(wěn)定性造成一定程度的影響，還對(duì)林麝自身的健康造成不利影響。
6.1.2林麝為一級(jí)保護(hù)動(dòng)物且價(jià)格昂貴，限制了某些分子遺傳相關(guān)工作的開(kāi)展林麝為國(guó)家一級(jí)珍稀瀕危藥用動(dòng)物，不允許因?yàn)榭茖W(xué)研究而對(duì)林麝有任何傷害，因此無(wú)法及時(shí)地采集林麝內(nèi)臟進(jìn)行深入的分子生物學(xué)相關(guān)研究，只能采集林麝毛發(fā)、血液或因疾病死亡林麝的內(nèi)臟，這給林麝分子遺傳學(xué)相關(guān)研究帶來(lái)了不便。同時(shí)，由于林麝資源量有限，存在非常嚴(yán)重的炒種情況，目前每對(duì)林麝的價(jià)格被炒到7萬(wàn)元，昂貴的種源成本大大降低了林麝產(chǎn)香的盈利能力，也大大提高了林麝研究的成本，這種現(xiàn)象不僅嚴(yán)重阻礙了林麝分子遺傳相關(guān)研究，而且不利于整個(gè)林麝養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。
6.1.3相關(guān)科研人員稀缺，發(fā)展緩慢目前，相對(duì)與其他常見(jiàn)動(dòng)物，從事林麝相關(guān)工作的人員極少，主要分布在四川養(yǎng)麝研究所、重慶市藥物種植研究所、四川大學(xué)、華東師范大學(xué)、浙江大學(xué)、陜西動(dòng)物研究所等科研院所，幾乎沒(méi)有進(jìn)行過(guò)林麝養(yǎng)殖行業(yè)的專(zhuān)題研討及技術(shù)交流會(huì)。因此先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù)在林麝上應(yīng)用的時(shí)間相對(duì)靠后，這也大大地降低了林麝遺傳學(xué)相關(guān)研究的進(jìn)展。
6.2展望
6.2.1麝香資源奇缺是林麝分子遺傳學(xué)研究開(kāi)展的內(nèi)在動(dòng)力麝香具有極高的藥用價(jià)值，但由于麝香的產(chǎn)量極低，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，這使得麝香的價(jià)格長(zhǎng)期維持在黃金的3倍左右，因此，提高麝香產(chǎn)量就成為了林麝養(yǎng)殖行業(yè)的最重要目標(biāo)。但由于林麝資源量極少且馴化程度低，傳統(tǒng)遺傳育種方法很難在林麝上得到順利開(kāi)展，因此通過(guò)分子遺傳學(xué)方法篩選麝香高產(chǎn)分子標(biāo)記越來(lái)越成為關(guān)注的焦點(diǎn)。
6.2.2新技術(shù)新方法的應(yīng)用將大大加快林麝分子遺傳學(xué)研究進(jìn)展林麝分子遺傳學(xué)研究隨著分子生物技術(shù)的不斷進(jìn)步已經(jīng)取得了長(zhǎng)足發(fā)展，DNA條形碼鑒定物種技術(shù)[38]、DNA分子性別鑒定技術(shù)[39]已成功運(yùn)用在林麝遺傳資源保護(hù)與與繁育工作中。然而，相對(duì)于林麝如此豐富的遺傳背景，僅靠分子生物學(xué)技術(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，而且相關(guān)的研究成果得不到充分應(yīng)用，因此有必要進(jìn)一步了解林麝的遺傳結(jié)構(gòu)，將傳統(tǒng)研究方法和分子生物技術(shù)相結(jié)合，了解其遺傳結(jié)構(gòu)差異和特征，進(jìn)行針對(duì)性保護(hù)和利用。另外，為了促進(jìn)人工養(yǎng)麝事業(yè)的發(fā)展，提高林麝種群增長(zhǎng)率和麝香產(chǎn)量，須繼續(xù)加強(qiáng)對(duì)林麝的泌香性狀、疾病抗性等表型的標(biāo)記研究，為實(shí)現(xiàn)標(biāo)記輔助選擇（MAS），加速良種培育打下基礎(chǔ)。
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關(guān)鍵詞：彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤；形態(tài)學(xué)；分子遺傳學(xué)；免疫表型；預(yù)后
彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（diffuse largeB-cell lymphoma，DLBCL）占非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin's lympho-mas，NHL）的31%～34%，在亞洲國(guó)家一般大于40%，是NHL中最常見(jiàn)的一個(gè)亞型。2008年WHO將DLBCL定義為一類(lèi)彌漫生長(zhǎng)的B細(xì)胞性淋巴瘤，瘤細(xì)胞核大于或等于正常吞噬細(xì)胞核，或大于正常淋巴細(xì)胞的2倍[1]。DLBCL在臨床特征、侵襲部位、組織形態(tài)學(xué)、分子遺傳學(xué)、免疫表型等方面，均表現(xiàn)出明顯的異質(zhì)性。本研究著重從臨床、免疫、分子遺傳學(xué)等方面，對(duì)近年來(lái)的國(guó)內(nèi)外研究工作及進(jìn)展進(jìn)行綜述。
1病因?qū)W
DLBCL的病因尚不清楚，大多數(shù)為原發(fā)，也可從慢性B淋巴細(xì)胞白血病/小淋巴細(xì)胞淋巴瘤、濾泡淋巴瘤、淋巴漿細(xì)胞性淋巴瘤、某些霍奇金淋巴瘤等發(fā)展和轉(zhuǎn)化而來(lái)，這種轉(zhuǎn)化可能與一些染色體結(jié)構(gòu)改變有關(guān)。
DLBCL的發(fā)生可能與病毒感染、免疫缺陷以及自身免疫有關(guān)。EB病毒、人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）、人類(lèi)皰疹病毒8型（HHV-8）等感染與DLBCL的發(fā)生有著較為密切的關(guān)系。2011年5月第十二屆全國(guó)淋巴瘤學(xué)術(shù)大會(huì)肯定了我國(guó)近年來(lái)惡性淋巴瘤發(fā)病率逐年上升與環(huán)境污染和食品添加劑之間具有密切關(guān)系[2]。
2流行性病學(xué)與臨床特征
DLBCL是成人淋巴瘤中發(fā)病最多的一型，多見(jiàn)于60歲以上的老年人，也可見(jiàn)于兒童，男性比女性稍多。DLBCL臨床上以迅速增大的無(wú)痛性腫塊為典型表現(xiàn)，部分患者可有發(fā)熱、體重減輕等癥狀。DLBCL的臨床過(guò)程呈侵襲性，多為單個(gè)淋巴結(jié)或結(jié)外病灶出現(xiàn)迅速長(zhǎng)大的局限性腫塊，約1/3的患者有全身癥狀[3]。腫瘤主要原發(fā)于淋巴結(jié)內(nèi)，但有約30%～40%的患者首發(fā)于淋巴結(jié)外，一般呈局限性病灶。結(jié)外發(fā)生部位常見(jiàn)于胃腸道、皮膚、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肺、肝、縱隔、骨骼、生殖器、及韋氏環(huán)，骨髓和血液的原發(fā)或累及少見(jiàn)，最常見(jiàn)的部位是胃腸道（胃和回盲部）[4]。
3分子遺傳學(xué)
DLBCL具有多種特征性的細(xì)胞分子遺傳學(xué)改變，許多病例往往具有復(fù)合性基因異常[5]。DLBCL常見(jiàn)的分子遺傳學(xué)改變包括1號(hào)染色體q2～23、6號(hào)染色體q21～25、14號(hào)染色體q11～12等區(qū)域出現(xiàn)缺失，12號(hào)染色體q12～14增多，非整倍體核型（+5，+6，+7，+18）及6q缺失，bcl-1、bcl-2、bcl-6、bcl-10、c-myc基因易位[5]，等等。
20%～30%的DLBCL中可發(fā)生bcl-2基因和IgH基因易位，有研究表明多數(shù)bcl-2基因易位的DLBCL是由濾泡性淋巴瘤轉(zhuǎn)化而來(lái)。DLBCL中常涉及3 q27區(qū)域的改變，包括bcl-6基因易位、5'-非編碼區(qū)高頻突變及bcl-6基因內(nèi)部缺失等，導(dǎo)致原癌基因bcl-6異常。在約30%～40%的DLBCL中可以檢測(cè)到bcl-6的t（3；14）（q27；q32）易位，該易位與預(yù)后不良有關(guān)，并且是一個(gè)獨(dú)立的危險(xiǎn)因素；40%～70%的DLBCL發(fā)生bcl-6突變；此外，MU M-1基因易位到第14號(hào)染色體I g H增強(qiáng)位點(diǎn)，即t（6；14）（p25；q32）染色體易位，導(dǎo)致MUM-1蛋白過(guò)表達(dá)，從而促進(jìn)DLBCL形成。少數(shù)DLBCL中還可檢出染色體易位t（1；14）導(dǎo)致的bcl-10基因易位，t（11；14）導(dǎo)致的bcl-1基因易位，8號(hào)染色體t（8；14）（q24；q32）導(dǎo)致的c-myc基因易位，等等。
在DLBCL中發(fā)現(xiàn)少數(shù)的p53基因的失活，p53抑癌基因在細(xì)胞增殖和存活的調(diào)控中起著重要的作用[6]。在DLBCL病例中因P16基因沉默表達(dá)或者表達(dá)量減少，從而誘發(fā)細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控，發(fā)生癌變。有研究發(fā)現(xiàn)DLBCL的發(fā)病還與原癌基因擴(kuò)增有關(guān)，相關(guān)的原癌基因包括：rel、myc、bcl-2、rel基因編碼NF-rB信號(hào)途徑中的轉(zhuǎn)錄因子REL蛋白，REL蛋白對(duì)于惡性B細(xì)胞的增殖與生存十分重要[7]。
4免疫表型特征
DLBCL免疫分型方法有Hans分型、Choi分型、Tally分型[8]，目前國(guó)內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院采用Hans的方法，通過(guò)免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)CD10、BCL-6和MUM-1三種蛋白的表達(dá)，從而將DLBCL分為GCB亞型和非GCB亞型，后者包括ABC亞型和少數(shù)未分類(lèi)者，其與基因表達(dá)譜分型的符合率可達(dá)80%～86%。有研究顯示兩個(gè)亞型間在化療反應(yīng)性和預(yù)后上與基因表達(dá)譜分型相似[8]。
DLBCL分類(lèi)采用免疫表型、組織學(xué)及臨床資料相結(jié)合，對(duì)指導(dǎo)臨床治療和判斷預(yù)后有重要意義。
關(guān)鍵詞：醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)；實(shí)驗(yàn)教學(xué)；模式
中圖分類(lèi)號(hào)：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2017）02-0270-03
醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)是醫(yī)學(xué)教育的重要課程，介于臨床醫(yī)學(xué)與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)之間，是一門(mén)應(yīng)用性很強(qiáng)的學(xué)科。隨著分子生物學(xué)理論和技術(shù)的發(fā)展與進(jìn)步，尤其是人類(lèi)基因組計(jì)劃的實(shí)施完成，醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)得到了空前的發(fā)展，基因組學(xué)與分子遺傳學(xué)逐漸成為了21世紀(jì)的領(lǐng)頭學(xué)科，在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)教育體系中有著重要的地位[1]。醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)在知識(shí)與實(shí)踐、實(shí)踐與創(chuàng)新的鏈接上發(fā)揮重要的橋梁作用。當(dāng)前社會(huì)科學(xué)和自然科學(xué)的發(fā)展變化，致使醫(yī)學(xué)教育無(wú)論在教學(xué)手段還是在教學(xué)理念都發(fā)生了深刻的變化，更早地、更多地接近社會(huì)、接近臨床，更注重人文精神，更多融入先進(jìn)技術(shù)與研究成果[1～2]。而大部分醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)則還主要關(guān)注在傳統(tǒng)分子遺傳學(xué)相關(guān)領(lǐng)域的基本實(shí)驗(yàn)操作，涉及遺傳病相關(guān)資料的信息化獲取與分析涉及很少，解決臨床遺傳學(xué)問(wèn)題過(guò)程中存在理論與實(shí)踐脫鉤。醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)尚未達(dá)到提高醫(yī)學(xué)生的科學(xué)研究能力、求知探索精神、創(chuàng)新能力和創(chuàng)新意識(shí)的目的。為此，我們開(kāi)展了一系列卓有成效的探索，優(yōu)化了原有的醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)課程教學(xué)體系，構(gòu)建了新的實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式。
一、利用網(wǎng)絡(luò)課程資源，推進(jìn)虛擬實(shí)驗(yàn)
依托于湖北民族學(xué)院網(wǎng)絡(luò)中心，結(jié)合醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)科特點(diǎn)，進(jìn)行數(shù)字化資源導(dǎo)學(xué)平臺(tái)建設(shè)。網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)的主體結(jié)構(gòu)分為教師主導(dǎo)區(qū)和師生互動(dòng)區(qū)兩大部分。內(nèi)容充實(shí)而全面，平臺(tái)除了內(nèi)容完善的多媒體課件，與教學(xué)內(nèi)容或生活實(shí)際密切相關(guān)的研究成果，解決學(xué)生在學(xué)習(xí)中遇到的實(shí)際問(wèn)題，還專(zhuān)門(mén)開(kāi)辟了“虛擬實(shí)驗(yàn)室”欄目[3]。網(wǎng)絡(luò)課程資源在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中主要解決二大問(wèn)題：
1.是醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)中所特有的一些對(duì)人體有重大危害的和涉及到比較先進(jìn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的實(shí)驗(yàn)，出于安全和成本考慮，學(xué)生往往無(wú)法直接參與其中[4]。虛擬實(shí)驗(yàn)可突破傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式受時(shí)間、地點(diǎn)、方式的限制，實(shí)驗(yàn)的安全性高、成本低、效率高，彌補(bǔ)了實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地設(shè)備不足、教學(xué)時(shí)空性的約束。虛擬實(shí)驗(yàn)教學(xué)不但可提供良好的人機(jī)交互，還允許學(xué)生在出錯(cuò)時(shí)，自行了解錯(cuò)誤的根源及后果，尋找解決問(wèn)題的方法，教與學(xué)的靈活交互[4]。利用網(wǎng)絡(luò)課程資源來(lái)培養(yǎng)學(xué)生隨時(shí)學(xué)習(xí)、自主學(xué)習(xí)和終生學(xué)習(xí)的能力，可充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)主動(dòng)性，并將教師的教學(xué)行為由課堂上擴(kuò)展到了課堂外。
2.是運(yùn)用目前已經(jīng)公開(kāi)的人類(lèi)基因組相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)，快速準(zhǔn)確地查找、識(shí)別遺傳病的相關(guān)遺傳學(xué)背景信息，獲取世界上最新進(jìn)展的醫(yī)學(xué)信息及科研成果[5]。近年來(lái)，遺傳學(xué)領(lǐng)域的分子遺傳學(xué)分支迅速發(fā)展，越來(lái)越多的致病易感基因位點(diǎn)和區(qū)域被篩選或定位識(shí)別。不單是單基因遺傳病的致病基因被順利定位識(shí)別克隆，一些復(fù)雜多基因遺傳病，如：高血壓、糖尿病、阿茲海默氏病、心腦血管疾病及腫瘤等疾病，也篩選出了眾多與疾病發(fā)生相關(guān)的遺傳易感標(biāo)記物及藥物敏感或抵抗標(biāo)記物，人類(lèi)對(duì)于疾病的遺傳學(xué)認(rèn)知達(dá)到了空前高度[5]。如何識(shí)別查找獲取人類(lèi)遺傳病相關(guān)的遺傳信息已經(jīng)成為臨床醫(yī)生和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研工作者需要掌握的基本技能之一，因此，我們有必要在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的教學(xué)上與時(shí)俱進(jìn)，讓醫(yī)學(xué)生更早地接觸相關(guān)知識(shí)，訓(xùn)練相關(guān)技能。由此，我們網(wǎng)絡(luò)資源課程中的“虛擬實(shí)驗(yàn)”內(nèi)容中專(zhuān)設(shè)了常見(jiàn)人類(lèi)遺傳病致病基因的數(shù)據(jù)庫(kù)鏈接，主要以美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心NCBI（http：//ncbi.nlm.nih.gov/）與在線(xiàn)人類(lèi)孟德?tīng)栠z傳（Online Mendelian Inheritance in Man，OMIM）數(shù)據(jù)庫(kù)為主，并至少安排一次實(shí)驗(yàn)課的時(shí)間介紹如何利用數(shù)據(jù)庫(kù)完成常見(jiàn)人類(lèi)遺傳病相關(guān)遺傳學(xué)信息收集，包括遺傳模式、發(fā)病率、家系連鎖定位區(qū)域、在基因組上的定位信息及熱點(diǎn)突變位置等。
二、結(jié)合臨床實(shí)踐，開(kāi)展第二課堂教學(xué)
醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)是對(duì)理論教學(xué)必要的補(bǔ)充和鞏固，通過(guò)實(shí)驗(yàn)技能訓(xùn)練，提高實(shí)驗(yàn)的綜合能力和實(shí)驗(yàn)素質(zhì)，促使基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)知識(shí)與臨床實(shí)踐相結(jié)合，對(duì)培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生的實(shí)踐能力和創(chuàng)新思維影響更為積極[6]。從臨床角度出發(fā)，研究疾病的遺傳因素、病變過(guò)程及其預(yù)防、診斷和治療的相互關(guān)系，為將來(lái)走上臨床醫(yī)生崗位的臨床專(zhuān)業(yè)學(xué)生提供從事醫(yī)學(xué)實(shí)踐所必需的遺傳學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)和臨床技能。
實(shí)驗(yàn)教學(xué)具體實(shí)施上，將病例法引入到教學(xué)過(guò)程中。一方面，由教師結(jié)合具體的病例，提出實(shí)驗(yàn)方案和驗(yàn)過(guò)程中可能遇到的若干問(wèn)題，組織學(xué)生預(yù)習(xí)課本、查閱相關(guān)資料，以團(tuán)隊(duì)的形式分組討論，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，開(kāi)展實(shí)驗(yàn)、解決問(wèn)題。并聯(lián)合湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院，在實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、設(shè)計(jì)、取材緊密結(jié)合臨床，取臨床真實(shí)患者的血液作為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行真實(shí)病例分析。如人類(lèi)染色體顯帶和非顯帶制備。另一方面，組織學(xué)生利用假期時(shí)間開(kāi)展遺傳病的家系調(diào)查；進(jìn)行家鄉(xiāng)遺傳病咨詢(xún)、系譜繪制和分析、再發(fā)風(fēng)險(xiǎn)估計(jì)，指導(dǎo)學(xué)生以論文的形式完成假期調(diào)查報(bào)告。或組織學(xué)生利用假期去當(dāng)?shù)蒯t(yī)院的婦產(chǎn)科與兒科等科室見(jiàn)習(xí)，了解引起遺傳病發(fā)病的環(huán)境因素和遺傳病的預(yù)防措施，與醫(yī)生或患者就某種遺傳病的臨床癥狀、傳遞方式、發(fā)病機(jī)制、再發(fā)風(fēng)險(xiǎn)以及預(yù)后進(jìn)行探討，對(duì)患者及其親屬的婚姻和生育進(jìn)行指導(dǎo)，這樣可以大大提高醫(yī)學(xué)生對(duì)遺傳病預(yù)防的認(rèn)知能力[7]。
光療法治療尋常痤瘡新進(jìn)展劉蔚李利(332)
強(qiáng)脈沖光在皮膚科的應(yīng)用孫彩虹常寶珠(334)
長(zhǎng)脈寬1064nmNd：YAG激光脫毛的作用機(jī)制和臨床應(yīng)用姜麗亞劉華緒楊秀莉任秋實(shí)(338)
外用光動(dòng)力療法治療非腫瘤性皮膚病勞力民朱可建(340)
光動(dòng)力療法在外陰病變的應(yīng)用進(jìn)展劉永鑫鄭和義(343)
免疫防護(hù)指數(shù)對(duì)防光劑評(píng)價(jià)的研究進(jìn)展閆言王寶璽(346)
關(guān)節(jié)病性銀屑病發(fā)病機(jī)制及生物制劑治療的進(jìn)展陸威勞力民(348)
黃褐斑的治療現(xiàn)狀吳艷華李其林(352)
抗菌肽對(duì)皮膚感染的保護(hù)作用陳學(xué)軍FrancoisNiyonsaba冉玉平(355)
系統(tǒng)性紅斑狼瘡預(yù)后的影響因素馬立娟劉貞富(358)
血管新生的機(jī)制及在皮膚腫瘤和銀屑病中的作用王紅梅劉曉明(361)
銀屑病易感基因最新研究進(jìn)展范星張學(xué)軍楊森(364)
副腫瘤性天皰瘡的研究進(jìn)展孫怡王玉坤(367)
家族性良性天皰瘡分子生物學(xué)研究新進(jìn)展顏瀟瀟張福仁(370)
淀粉樣變性的研究現(xiàn)狀康爾恂國(guó)外醫(yī)學(xué)皮膚性病學(xué)分冊(cè) 鄭家潤(rùn)(373)
白塞病發(fā)病的遺傳因素研究進(jìn)展李曉建陳明華(376)
皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原^＋T細(xì)胞與皮膚病朱潔駱丹(378)
HHV-6、HHV-7和HHV-8與某些皮膚病的關(guān)系研究進(jìn)展王啟華陳樹(shù)民(381)
HIV/AIDS流行及醫(yī)源性感染劉志陸洪光(384)
人瘤病毒體外研究的技術(shù)及進(jìn)展吳劍波李新宇鄭家潤(rùn)(387)
出版·征訂·啟事
編輯部電子郵箱更名啟事(331)
《中西醫(yī)結(jié)合臨床皮膚性病學(xué)》郵購(gòu)信息(342)
《疾病與性病》出版通知(354)
《漢英對(duì)照醫(yī)學(xué)真菌學(xué)》書(shū)訊(369)
2006年《中國(guó)美容醫(yī)學(xué)》改月刊啟事(380)
文摘
文摘楊亞妮（摘）劉彤（校）(351)
會(huì)議·征文·消息
皮膚美容化妝品制劑研修班及圖書(shū)郵購(gòu)消息(369)
中華醫(yī)學(xué)會(huì)第12次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議征文通知(372)
2006年第四屆中國(guó)西部地區(qū)皮膚性病學(xué)術(shù)研討會(huì)征文通知(383)
308nm準(zhǔn)分子光照射身體不同部位產(chǎn)生最小紅斑量的比較宋秀祖樊奇敏胡慧麗許愛(ài)娥(267)
結(jié)節(jié)性皮膚淀粉樣變性一例顧俊瑛陳明華肖麗明李曉建(270)
文摘
不伴有水皰或糜爛而組織學(xué)典型的中毒性表皮壞死松解癥一例張健（摘）劉彤（校）(269)
診斷女性沙眼衣原體感染不同方法的比較、危險(xiǎn)因素和臨床特點(diǎn)邵長(zhǎng)庚（摘）(326)
會(huì)議·征文·消息
《中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù)》雜志創(chuàng)刊在即誠(chéng)征來(lái)稿(272)
綜述
國(guó)外醫(yī)學(xué)皮膚性病學(xué)分冊(cè) 伊曲康唑在兒童真菌病中的應(yīng)用羅權(quán)林玲張錫寶(273)
皮膚光老化的外用藥物預(yù)防與治療高瑩孫建方(276)
腫瘤壞死因子抑制劑治療銀屑病臨床安全性評(píng)價(jià)陳敏崔盤(pán)根陳志強(qiáng)(279)
細(xì)胞因子治療黑素瘤的進(jìn)展傅友軍馬鵬程(282)
皮膚鏡在色素性皮損中的應(yīng)用殷董鄧列華(285)
麻風(fēng)畸殘的預(yù)防與康復(fù)王焱張國(guó)成(288)
鮑恩樣丘疹病研究進(jìn)展劉永鑫鄭和義(291)
皮下脂膜炎樣T細(xì)胞淋巴瘤研究進(jìn)展胡煒煒勞力民(294)
CD40-CD40L與皮膚病朱健偉駱丹(297)
TCR基因重排在皮膚T細(xì)胞淋巴瘤中的應(yīng)用馬一平盧憲梅(300)
CC型趨化因子號(hào)慢性蕁麻疹唐慧徐金華鄭志忠(303)
遺傳性血管性水腫分子遺傳學(xué)進(jìn)展呂紅莉張學(xué)軍楊森(306)
基底細(xì)胞痣綜合征的分子遺傳學(xué)進(jìn)展袁丞達(dá)劉建軍張學(xué)軍(309)
可變性紅斑角皮病的分子遺傳學(xué)進(jìn)展吳要群張學(xué)軍楊森(312)
魚(yú)鱗病綜合征的遺傳學(xué)進(jìn)展蔡艷霞李常興羅權(quán)張錫寶(315)
單純皰疹病毒耐藥的流行趨勢(shì)及其耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展鄭波王千秋(318)
樹(shù)突狀細(xì)胞在性病方面的進(jìn)展余兵國(guó)外醫(yī)學(xué)皮膚性病學(xué)分冊(cè) 翁瑞全李惠(321)
潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄體在單純皰疹病毒中的作用仕瑤慧樊建勇楊慧蘭(324)
染色體介導(dǎo)淋球菌耐藥機(jī)制的進(jìn)展蔣法興其木格王千秋(327)
出版·征訂·啟事HttP://
《實(shí)用美容皮膚外科技術(shù)》出版(293)
《皮膚科用藥及其藥理》出版(308)
《皮膚病分類(lèi)與名稱(chēng)》等書(shū)郵購(gòu)與皮膚美容化妝品制劑研修班招生消息(323)
蕈樣肉芽腫的發(fā)病機(jī)制及治療進(jìn)展張思平朱一元(6)
藥物性紅皮病陳佳曾學(xué)思(10)
激光治療皮膚血管瘤的進(jìn)展章泳宋為民許愛(ài)娥(13)
表沒(méi)食子兒茶精沒(méi)食子酸酯皮膚光保護(hù)作用機(jī)制研究進(jìn)展徐麗賢駱丹(16)
人類(lèi)瘤病毒和紫外線(xiàn)及皮膚腫瘤李凱段逸群周小勇石平榮(20)
銀屑病微血管異常增生機(jī)制及治療對(duì)策張彩萍崔盤(pán)根(23)
銀屑病與免疫分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)田晗鄭捷(26)
CLA^＋T細(xì)胞與銀屑病的研究進(jìn)展韓鳳嫻徐麗敏(29)
特應(yīng)性皮炎小鼠模型研究進(jìn)展董正邦張美華(32)
白塞綜合征發(fā)病的分子機(jī)制研究進(jìn)展左付國(guó)金春林李鐵男(35)
腎源性纖維化硬皮病王曉華徐麗賢駱丹楊俊偉(38)
獲得性大皰性表皮松解癥的研究進(jìn)展陳聲利孫建方(41)
蛋白質(zhì)組學(xué)主要技術(shù)及其應(yīng)用進(jìn)展朱紅周海濤何春滌陳洪鐸(44)
存活素和皮膚病邵黎明朱可建(48)
Toll樣受體與皮膚抗感染免疫周炳榮駱丹(51)
Th1／Th2細(xì)胞因子與生殖器皰疹關(guān)系的研究現(xiàn)狀徐金華(54)
文摘
國(guó)外醫(yī)學(xué)皮膚性病學(xué)分冊(cè) 嗜酸細(xì)胞增多綜合征一例付俊（摘）劉彤（校）(9)
美國(guó)五個(gè)城市男男性接觸者的HIV患病率、未識(shí)別感染和HIV檢測(cè)（2004年6月-2005年4月）邵長(zhǎng)庚（摘）(19)
會(huì)議·征文·消息
科醫(yī)人醫(yī)療激光與強(qiáng)光臨床應(yīng)用有獎(jiǎng)?wù)魑耐ㄖ?15)
2006年第四屆中國(guó)西部地區(qū)皮膚性病學(xué)術(shù)研討會(huì)征文通知(19)
消息(40)
關(guān)鍵詞 綠豆；育種；分子遺傳學(xué)；展望
中圖分類(lèi)號(hào) S522 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）10-0039-02
Abstract Vigna radiata L. is an important economic crop used in medical and food industry.Breeding methods on Vigna radiata L. and genetic research progress were described.New ways and thoughts for reference were in prospect in this paper，including exploring of Vigna radiata L. germplasm resources and strengthenning of the Vigna radiata L. genetic studies. It provided theoretical basis and technical support for Vigna radiata L. breeding and genetic research，in order to improve the level of domestic Vigna radiata L. breeding and genetic research.
Key words Vigna radiata L.；breeding；molecular genetics；prospect
綠豆（Vigna radiata L.）屬于豆科，別名青小豆，因其顏色青綠而得名。綠豆在中國(guó)主要產(chǎn)區(qū)集中在黃河、淮河流域的平原地區(qū)[1]，生產(chǎn)經(jīng)歷了高―低―高的發(fā)展歷程。綠豆?fàn)I養(yǎng)豐富，可藥食兼用，又是食品工業(yè)的重要原料，有“食中佳品，濟(jì)世長(zhǎng)谷”之稱(chēng)[2]。
1 綠豆育種研究進(jìn)展
1.1 綠豆種質(zhì)資源的收集與評(píng)價(jià)
種質(zhì)資源是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、新品種選育、遺傳研究及生理生化研究的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。目前，全球收集和保存的綠豆種質(zhì)資源共有3萬(wàn)余份，世界上最大的收集和保存機(jī)構(gòu)為亞洲蔬菜研究與發(fā)展中心亞洲區(qū)域中心[3]。1978年起，中國(guó)綠豆種質(zhì)資源的搜集、農(nóng)藝性狀鑒定和整理、保存被正式列入國(guó)家重點(diǎn)研究項(xiàng)目。由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物品種資源研究所組織各省、市、區(qū)的有關(guān)科研單位開(kāi)展了綠豆種質(zhì)資源的收集、鑒定、保存和利用，從20多個(gè)?。ㄊ小⒆灾螀^(qū)）共收集綠豆資源6 000余份，完成了逾5 600份品種農(nóng)藝性狀的鑒定，并列入《中國(guó)食用豆類(lèi)品種資源目錄》[4-5]。種質(zhì)資源的收集是育種及資源深入研究的基礎(chǔ)。亞洲蔬菜研究與發(fā)展中心亞洲區(qū)域中心對(duì)收集的綠豆種質(zhì)資源的進(jìn)行分析與鑒定后，篩選出一批抗蟲(chóng)、抗逆、農(nóng)藝性狀較好的優(yōu)質(zhì)資源[3]。中國(guó)對(duì)2 200余份資源進(jìn)行了抗病蟲(chóng)、抗逆性鑒定及品質(zhì)分析[6]，建立了資源評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)庫(kù)，為綠豆品種選育時(shí)親本的選擇提供了參考[7-8]。
1.2 綠豆育種研究概況
G豆新品種的選育主要采用系統(tǒng)選育、引種、雜交及誘變等常規(guī)方法。通過(guò)對(duì)地方綠豆品種資源的評(píng)價(jià)與鑒定，保留適合品種，并大面積推廣，這些鑒定的新品系有效地解決了當(dāng)?shù)鼐G豆育種及生產(chǎn)中存在的問(wèn)題，如印度的抗病品系和高蛋白品系。引進(jìn)的品種可直接鑒定后進(jìn)行種植，如從AVRDC引進(jìn)的中綠1號(hào)、中綠2號(hào)等，對(duì)中國(guó)綠豆生產(chǎn)起到了極大的推動(dòng)作用；引種還可豐富雜交親本的遺傳基礎(chǔ)，提高品種的綜合品質(zhì)，許多育成的新品種都是由引進(jìn)品種和地方品種雜交而來(lái)，如韓國(guó)裂葉品種Samgang、小粒品種Soseon[9-10]，巴基斯坦高產(chǎn)品種Ramzan[11]，中國(guó)品種豫綠2號(hào)、豫綠4號(hào)、冀綠9239、冀綠2號(hào)、濰綠1號(hào)等品種[12-14]，這些育成的新品種已成為當(dāng)?shù)氐闹髟云贩N。綠豆屬于自花授粉作物，人工雜交成功率較低，誘變育種是繼系統(tǒng)選育和雜交育種之后發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù)。1996年，中國(guó)學(xué)者對(duì)綠豆進(jìn)行了空間誘變研究，獲得了一批穩(wěn)定的綠豆變異品系[15]，科研人員利用γ射線(xiàn)誘變培育的晉綠豆2號(hào)適應(yīng)性廣且產(chǎn)量高[16]，Khan等[17]利用SA（疊氮化鈉）誘變出的綠豆生育期顯著縮短，后代群體產(chǎn)生了廣泛的變異。
2 綠豆分子遺傳學(xué)研究
2.1 綠豆分子標(biāo)記及遺傳圖譜的研究
分子標(biāo)記方面，由于前期綠豆分子遺傳學(xué)研究比較落后，RAPD、AFLP 等常用標(biāo)記方法應(yīng)用比較頻繁，但RAPD技術(shù)不穩(wěn)定，且RAPD和AFLP技術(shù)繁瑣且費(fèi)用昂貴。因此，隨著技術(shù)的開(kāi)發(fā)，基于PCR技術(shù)的標(biāo)記技術(shù)應(yīng)用越來(lái)越多，如SSR分子標(biāo)記技術(shù)。Kumar等[18]利用錨定PCR技術(shù)開(kāi)發(fā)的SSR引物在綠豆基因組及綠豆近緣種中都能擴(kuò)增出特異性條帶，故這些開(kāi)發(fā)的引物也可用于親緣關(guān)系分析及近緣種間的比較作圖研究。孫 蕾等[19]為了找到與抗豆象基因連鎖的分子標(biāo)記，利用63個(gè)RAPD標(biāo)記和113個(gè)SSR/STS標(biāo)記分析群體，共找到了22個(gè)與抗性基因連鎖的分子標(biāo)記。綠豆遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建及目標(biāo)基因的定位將有效縮短育種周期，為基因精細(xì)定位、基因克隆及分子定向修飾育種等奠定基礎(chǔ)。如Lambrides等[20]利用抗豆象野生種ACC41及栽培種Berkern后代群體構(gòu)建了2個(gè)綠豆遺傳連鎖圖譜。
2.2 綠豆相關(guān)基因克隆研究進(jìn)展
目前，綠豆基因克隆及研究工作已起步，但對(duì)綠豆轉(zhuǎn)基因的研究還不成熟?？娊ㄥK等[21]利用綠豆葉片擴(kuò)增出362 bp的綠豆防御素基因，對(duì)其進(jìn)行序列比對(duì)后將其構(gòu)建到植物表達(dá)載體中進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化分析。Chen等[22]分離了綠豆Hsc70的cDNA，并在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平檢查了其表達(dá)水平，該基因?qū)儆诮M成型表達(dá)基因，主要在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中起作用。
3 展望
綠豆已成為我國(guó)種植結(jié)構(gòu)調(diào)整及農(nóng)民脫貧致富的重要經(jīng)濟(jì)作物，國(guó)家已把綠豆列入現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系中，綠豆的育種研究也取得了顯著成效，但從近年來(lái)新品種選育情況來(lái)看，資源利用率還比較低，一些潛在的優(yōu)異資源還沒(méi)有被發(fā)掘出來(lái)。應(yīng)繼續(xù)加強(qiáng)綠豆種質(zhì)資源挖掘力度，繼續(xù)搜集和鑒定資源的遺傳多樣性，為綠豆育種提供特征明確的優(yōu)良種質(zhì)[23-24]。
4 參考文獻(xiàn)
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