時(shí)間：2023-08-29 16:28:29
序論：在您撰寫(xiě)醫(yī)學(xué)影像技術(shù)技能時(shí)，參考他人的優(yōu)秀作品可以開(kāi)闊視野，小編為您整理的7篇范文，希望這些建議能夠激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，引導(dǎo)您走向新的創(chuàng)作高度。
關(guān)鍵詞：臨床 實(shí)訓(xùn)基地 示范 醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)
中圖分類(lèi)號(hào)：G712 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C DOI：10.3969/j.issn.1672-8181.2014.04.115
北海市衛(wèi)生學(xué)校（原北海市合浦衛(wèi)生學(xué)校）始建于1958年，屬衛(wèi)生行業(yè)主管公立中等職業(yè)學(xué)校，是國(guó)家級(jí)重點(diǎn)中等職業(yè)學(xué)校和廣西示范性中等職業(yè)學(xué)校。2007年學(xué)校被自治區(qū)衛(wèi)生廳確認(rèn)為廣西第三批全科醫(yī)學(xué)教育理論教學(xué)培訓(xùn)基地，附屬醫(yī)院確認(rèn)為臨床技能培訓(xùn)基地。2012年學(xué)校被教育部、財(cái)政部、人力資源和社會(huì)保障部批準(zhǔn)為第三批“國(guó)家中等職業(yè)教育改革發(fā)展示范學(xué)?！绷㈨?xiàng)建設(shè)單位，醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)是重點(diǎn)建設(shè)專(zhuān)業(yè)，附屬醫(yī)院是臨床實(shí)踐技能實(shí)訓(xùn)基地作為特色項(xiàng)目重點(diǎn)建設(shè)。北海市衛(wèi)生學(xué)校附屬醫(yī)院既是師生參加社會(huì)和技能實(shí)踐的重要實(shí)訓(xùn)基地，也是對(duì)應(yīng)衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟(jì)實(shí)體。多年來(lái)，附屬醫(yī)院為保障人民身體健康服務(wù)地方經(jīng)濟(jì)作出貢獻(xiàn)。
我校醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)1975年開(kāi)辦，具有四十多年辦學(xué)經(jīng)驗(yàn)，初期稱(chēng)為放射醫(yī)士專(zhuān)業(yè)，進(jìn)入新世紀(jì)后一系列的教學(xué)改革和創(chuàng)新，醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)已經(jīng)發(fā)展成為我校的特色重點(diǎn)專(zhuān)業(yè)，2005年被廣西自治區(qū)教育廳認(rèn)定為全區(qū)中等職業(yè)教育示范專(zhuān)業(yè)，2013年我校中等職業(yè)教育醫(yī)學(xué)影像技術(shù)實(shí)訓(xùn)基地建設(shè)項(xiàng)目竣工并順利通過(guò)廣西自治區(qū)教育廳驗(yàn)收。我校醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)年招生人數(shù)較多（250人/年），在校生規(guī)模較大（686人）的專(zhuān)業(yè)，培養(yǎng)了廣西醫(yī)學(xué)會(huì)影像技術(shù)委員會(huì)主任李文美、副主任鐘易等一大批區(qū)內(nèi)該專(zhuān)業(yè)杰出學(xué)者、專(zhuān)家和技術(shù)人才，據(jù)統(tǒng)計(jì)，全廣西大部分醫(yī)院縣市級(jí)放射科主任和副主任均為我校該專(zhuān)業(yè)畢業(yè)生。
北海市衛(wèi)生學(xué)校始終把衛(wèi)生中等職業(yè)教育和醫(yī)療服務(wù)協(xié)調(diào)發(fā)展、互相促進(jìn)作為學(xué)校的辦學(xué)特色和基本方略，教產(chǎn)結(jié)合是學(xué)校提高教學(xué)質(zhì)量和醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量重要的抓手。醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)需要X線(xiàn)機(jī)、DR、CT和超聲等大型醫(yī)療設(shè)備作為教學(xué)設(shè)備，不但價(jià)格昂貴，而且人員和環(huán)境要求高，診斷治療和技術(shù)操作人員準(zhǔn)入認(rèn)證、人員防護(hù)、環(huán)境防護(hù)以及患者防護(hù)等都非常嚴(yán)格，如果沒(méi)有附屬醫(yī)院作為臨床實(shí)訓(xùn)基地依托，實(shí)行教產(chǎn)結(jié)合，這些大型醫(yī)療設(shè)備就單純作為示教教具，必定造成資源浪費(fèi)，生均教學(xué)設(shè)備均費(fèi)用很高，學(xué)校難以維持運(yùn)轉(zhuǎn)。反之，如果以附屬醫(yī)院作為臨床實(shí)訓(xùn)基地依托，實(shí)行教產(chǎn)結(jié)合，學(xué)校對(duì)附屬醫(yī)院實(shí)行一體化管理體制，不斷完善醫(yī)學(xué)教育功能和醫(yī)療服務(wù)功能，一方面開(kāi)展醫(yī)學(xué)應(yīng)用性技術(shù)的研究和開(kāi)發(fā)，提高大型教學(xué)設(shè)備的使用效益，降低了教學(xué)投入成本，增強(qiáng)了學(xué)校經(jīng)濟(jì)實(shí)力；另一方面教產(chǎn)結(jié)合的收益除滿(mǎn)足附屬醫(yī)院的發(fā)展外，還投入到學(xué)校的基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)中。附屬醫(yī)院作為師生參加社會(huì)和技能實(shí)踐的重要實(shí)訓(xùn)基地建設(shè)，附屬醫(yī)院的建設(shè)和發(fā)展壯大，就能很好地展示學(xué)生日后將從事的衛(wèi)生職業(yè)前景，起榜樣示范作用[3-4]。
1 建設(shè)工學(xué)結(jié)合和頂崗實(shí)習(xí)實(shí)訓(xùn)教學(xué)硬件
學(xué)校附屬醫(yī)院是一所集醫(yī)療、教學(xué)、培訓(xùn)、科研四位一體的國(guó)家二級(jí)甲等綜合醫(yī)院，設(shè)置有門(mén)診部、急診科、內(nèi)科、外科、婦產(chǎn)科、兒科、五官科、口腔科、麻醉科、中醫(yī)科、理療科、感染性疾病科等業(yè)務(wù)；醫(yī)技部門(mén)開(kāi)設(shè)藥劑科、放射科、CT室、超聲診斷科、心電圖室、腦電圖室、胃鏡室、病理科等科室，開(kāi)設(shè)病床數(shù)336張。附屬醫(yī)院加強(qiáng)與醫(yī)學(xué)影像技術(shù)等辦學(xué)專(zhuān)業(yè)的實(shí)訓(xùn)基地相關(guān)建設(shè)，建好示教室和所有實(shí)習(xí)生值班室，安裝了超聲診斷科教學(xué)閉路電視錄制和轉(zhuǎn)播系統(tǒng)，完善醫(yī)學(xué)影像PACS系統(tǒng)，真實(shí)的醫(yī)療服務(wù)場(chǎng)景和衛(wèi)生職業(yè)服務(wù)流程等為師生參加實(shí)踐訓(xùn)練提供保證。還新建了兩個(gè)各擁有30臺(tái)計(jì)算機(jī)，配備投影設(shè)備的醫(yī)學(xué)影像診斷一體化實(shí)訓(xùn)室，新建了每個(gè)擁有8套先進(jìn)B超設(shè)備、電腦捕獲實(shí)時(shí)圖像可大屏幕投影演示的超聲診斷實(shí)訓(xùn)室，各科室均安裝多媒體大屏幕投影并連接校園網(wǎng)，可隨時(shí)調(diào)用包括附屬醫(yī)院實(shí)時(shí)CT、DR、超聲影像等網(wǎng)絡(luò)資源中心的教學(xué)資源上課，這一系列的建設(shè)投入有力地保證了一體化教學(xué)的實(shí)施，也保證了學(xué)生充分實(shí)踐的機(jī)會(huì)。
2 改革實(shí)訓(xùn)實(shí)習(xí)課程和創(chuàng)新實(shí)訓(xùn)實(shí)習(xí)管理
以附屬醫(yī)院為依托，學(xué)校率先中職學(xué)校中應(yīng)用問(wèn)題教學(xué)法等現(xiàn)代先進(jìn)教學(xué)方法，推行“理實(shí)一體化”教學(xué)模式，按“模塊化”教學(xué)，完善階段實(shí)習(xí)教學(xué)計(jì)劃和實(shí)施方法、重新編寫(xiě)實(shí)習(xí)生手冊(cè)，優(yōu)化和量化階段2周階段見(jiàn)習(xí)和頂崗實(shí)習(xí)教學(xué)計(jì)劃和實(shí)施方法，完善實(shí)習(xí)管理相關(guān)制度教學(xué)模式，實(shí)施2周階段見(jiàn)習(xí)和頂崗實(shí)習(xí)。以附屬醫(yī)院為依托，教產(chǎn)結(jié)合，學(xué)校創(chuàng)新教學(xué)方法，讓部分專(zhuān)業(yè)課教學(xué)在附屬醫(yī)院實(shí)施，通過(guò)工學(xué)結(jié)合，改變?cè)瓉?lái)單純理論教學(xué)后再實(shí)驗(yàn)的教學(xué)方法，引入“導(dǎo)生制”、“助教”教學(xué)手段，創(chuàng)新教學(xué)方法，全面提高學(xué)生的實(shí)際操作能力和技能水平[4-5]。以附屬醫(yī)院為依托，教產(chǎn)結(jié)合，學(xué)校在完善校際共享、校企共享、師生共享、滿(mǎn)足專(zhuān)業(yè)發(fā)展需要的教學(xué)資源庫(kù)，構(gòu)建以崗位能力職業(yè)準(zhǔn)入和職業(yè)發(fā)展為目標(biāo)、以工作過(guò)程和工作任務(wù)為導(dǎo)向的課程體系，創(chuàng)新“校企合作、工學(xué)結(jié)合、頂崗實(shí)習(xí)”的人才培養(yǎng)模式等方面的取得進(jìn)展。
3 建設(shè)雙師型師資隊(duì)伍
學(xué)校重視“雙師型”師資隊(duì)伍的建設(shè)，教產(chǎn)結(jié)合，增強(qiáng)教師動(dòng)手能力、知識(shí)傳授能力、現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)能力等，不斷優(yōu)化教師隊(duì)伍的結(jié)構(gòu)。學(xué)校建立附屬醫(yī)院專(zhuān)業(yè)人員教學(xué)輪崗和兼課機(jī)制。制定相關(guān)制度激勵(lì)專(zhuān)業(yè)人員承擔(dān)實(shí)踐教學(xué)任務(wù)與獲取教師資格證書(shū)和中職教師系列職稱(chēng)，采取雙職（教研室主任、附屬醫(yī)院放射科、CT室、超聲診斷科和心電圖室等業(yè)務(wù)科室主任）或掛職的措施，培養(yǎng)學(xué)校專(zhuān)業(yè)帶頭人和骨干教師。教師擔(dān)任附院科主任和兼職教學(xué)工作，充分發(fā)揮其潛能，認(rèn)真做好教學(xué)工作和醫(yī)療服務(wù)，以其豐富的專(zhuān)業(yè)知識(shí)和教學(xué)臨床經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的教學(xué)效果和突出的科研能力獲得社會(huì)和學(xué)校師生的一致好評(píng)。教師不僅熟悉操作過(guò)程，而且精通原理，并能教會(huì)學(xué)生；教師不僅將生產(chǎn)、管理、服務(wù)知識(shí)應(yīng)用于生產(chǎn)，而且將這些知識(shí)能有效地再現(xiàn)、傳授給學(xué)生。以附屬醫(yī)院為依托，教師應(yīng)用問(wèn)題教學(xué)法培養(yǎng)學(xué)生綜合運(yùn)用知識(shí)能力，教師更好地了解學(xué)生，提高自身素質(zhì)，很好地順應(yīng)教學(xué)方法改革的要求，一方面，大大提高教師自身的動(dòng)手與實(shí)踐能力、生產(chǎn)實(shí)際問(wèn)題的解決與分析能力、指導(dǎo)實(shí)訓(xùn)與現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)能力；另一方面，大大提高學(xué)生實(shí)踐技能水平，同時(shí)提高教學(xué)效率，探求改革課程和提高教學(xué)效果的有效途徑，實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)實(shí)用型衛(wèi)生人才的目標(biāo)[4-5]。學(xué)校醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)現(xiàn)擁有具備教師專(zhuān)業(yè)技術(shù)職稱(chēng)又具備衛(wèi)生專(zhuān)業(yè)技術(shù)職稱(chēng)的“雙師型”教師二十多人，教師實(shí)現(xiàn)了從傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)型教師向現(xiàn)代學(xué)者型、反思型、研究型教師轉(zhuǎn)變。。
4 改革學(xué)生評(píng)價(jià)模式
傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)學(xué)生評(píng)價(jià)模式較籠統(tǒng)，專(zhuān)業(yè)條塊分割，無(wú)細(xì)化和量化標(biāo)準(zhǔn)，難以實(shí)現(xiàn)與崗位所需的技能對(duì)接。以附屬醫(yī)院為依托，教產(chǎn)結(jié)合，重新制訂實(shí)習(xí)生出科成績(jī)?cè)u(píng)定辦法和實(shí)成績(jī)?cè)u(píng)定辦法，建立較為科學(xué)合理的醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)實(shí)習(xí)生和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，建立以能力為核心的醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)學(xué)生綜合評(píng)價(jià)模式。學(xué)生要掌握多門(mén)知識(shí)，還要掌握本專(zhuān)業(yè)職業(yè)崗位的知識(shí)、技能和技術(shù)。同時(shí)，也要掌握相關(guān)專(zhuān)業(yè)、行業(yè)的知識(shí)、技能、技術(shù)，并能將各種知識(shí)、技能、技術(shù)相互滲透、融合和轉(zhuǎn)化，因此我們以職業(yè)道德和職業(yè)能力為標(biāo)準(zhǔn)，以橫向?yàn)橹鞯哪K式課程體系，強(qiáng)調(diào)的是職業(yè)崗位、技術(shù)的專(zhuān)項(xiàng)性、操作性和應(yīng)用性，學(xué)校通過(guò)對(duì)該專(zhuān)業(yè)技能操作崗位細(xì)分，制定了X線(xiàn)攝影技術(shù)、肝膽超聲掃描技術(shù)、心電圖檢查技術(shù)等專(zhuān)業(yè)技能考核評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)。組織實(shí)施專(zhuān)業(yè)技能操作考核，通過(guò)這些考核，對(duì)學(xué)生實(shí)施客觀、標(biāo)準(zhǔn)的量化考核，保證醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)學(xué)生能力培養(yǎng)的質(zhì)量。學(xué)校還舉辦全校醫(yī)學(xué)影像專(zhuān)業(yè)技能操作比賽，激勵(lì)學(xué)生參加實(shí)訓(xùn)興趣的積極性。學(xué)校還建立以理論考、實(shí)驗(yàn)考、實(shí)訓(xùn)考、用人單位考和畢業(yè)生質(zhì)量跟蹤調(diào)查評(píng)價(jià)為主的綜合評(píng)價(jià)模式[3-6]。
5 改進(jìn)人才培養(yǎng)模式
醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)具有聯(lián)系實(shí)際、知能并重和啟發(fā)誘導(dǎo)等特點(diǎn)，理論和實(shí)踐結(jié)合緊密又不乏高深的理論，而且有很強(qiáng)的實(shí)踐性[3-4]。課程設(shè)置為培養(yǎng)目標(biāo)服務(wù)、教學(xué)內(nèi)容為專(zhuān)業(yè)服務(wù)、理論系統(tǒng)為操作實(shí)踐服務(wù)，突出能力的培養(yǎng)。以附屬醫(yī)院為依托，教產(chǎn)結(jié)合，通過(guò)真實(shí)病例、實(shí)際工作場(chǎng)景和儀器操作，教學(xué)具富有能動(dòng)性和創(chuàng)造性，有效加強(qiáng)學(xué)生理論聯(lián)系實(shí)際，有效將書(shū)本理論知識(shí)轉(zhuǎn)化為現(xiàn)實(shí)工作能力。為節(jié)約教學(xué)時(shí)間，保證學(xué)生充分實(shí)踐，我校大力推進(jìn)醫(yī)學(xué)影像專(zhuān)業(yè)課程實(shí)施一體化教學(xué)，教師在教學(xué)過(guò)程中充分利用醫(yī)學(xué)影像網(wǎng)絡(luò)教學(xué)資源中心的資源，貫徹多媒體視圖直觀教學(xué)、多圖縱橫對(duì)比、理論與實(shí)踐高度結(jié)合、精講多練、調(diào)動(dòng)學(xué)生參與等教學(xué)原則。學(xué)校加大投入，增加了超聲診斷學(xué)課時(shí)和增開(kāi)心電圖診斷學(xué)課程。傳統(tǒng)的教學(xué)大綱、教學(xué)計(jì)劃比較籠統(tǒng)，各學(xué)科課程條塊分割，難以實(shí)現(xiàn)以崗位所需的能力對(duì)接[3-5]。傳統(tǒng)的教學(xué)大綱專(zhuān)業(yè)課程設(shè)置超聲診斷僅安排72學(xué)時(shí)，只能達(dá)到讓學(xué)生了解的水平， 因此要真正達(dá)到熟練的層次必須依托附屬醫(yī)院，增加醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)課時(shí)，尤其是實(shí)訓(xùn)課時(shí)，我校實(shí)施的教學(xué)計(jì)劃中超聲診斷學(xué)調(diào)整為144學(xué)時(shí)，理論實(shí)踐比為1：1。傳統(tǒng)的教學(xué)大綱中無(wú)心電圖診斷學(xué)教學(xué)要求，因?yàn)樵撻T(mén)技術(shù)在基層已經(jīng)普及應(yīng)用，我校在選修課程模塊中安排114課時(shí)[7]。通過(guò)教產(chǎn)結(jié)合，醫(yī)學(xué)影像專(zhuān)業(yè)課程實(shí)施一體化教學(xué)，教師在教學(xué)過(guò)程中充分利用醫(yī)學(xué)影像網(wǎng)絡(luò)教學(xué)資源中心的資源，貫徹多媒體視圖直觀教學(xué)、多圖縱橫對(duì)比，不但提高了學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性，克服從模具、課堂練習(xí)轉(zhuǎn)為真實(shí)人體操作和實(shí)際場(chǎng)景的恐懼心理，而且方便了在校生及早接觸社會(huì)，貼近崗位。制訂完善新的教學(xué)大綱、教學(xué)計(jì)劃（草案），創(chuàng)新教產(chǎn)一體的人才培養(yǎng)模式，制定醫(yī)學(xué)影像專(zhuān)業(yè)新課程表，完成效果評(píng)價(jià)報(bào)告，構(gòu)建模塊化和以工作任務(wù)為中心的課程體系，完善“教產(chǎn)一體、工學(xué)結(jié)合”人才培養(yǎng)模式。由于我校醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)畢業(yè)生只要一人當(dāng)班即可同時(shí)兼X線(xiàn)、超聲和心電圖儀器操作和常見(jiàn)病看圖診斷工作，實(shí)際操作能力強(qiáng)，深受鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院和社區(qū)醫(yī)院的歡迎，很多在實(shí)習(xí)階段學(xué)生就與用人單位簽訂了工作合同，近年來(lái)醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)當(dāng)年對(duì)口就業(yè)率達(dá)到了95.4%。[5-7]
隨著我國(guó)基層醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)迅速發(fā)展，農(nóng)村新型合作醫(yī)療和城市社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)網(wǎng)點(diǎn)大量增多，規(guī)模擴(kuò)大，設(shè)備更新，大多配備了X線(xiàn)、超聲、心電圖等輔助診斷設(shè)備，基層醫(yī)學(xué)影像專(zhuān)業(yè)人才需求量明顯增加。今后我們將緊緊抓住國(guó)家實(shí)施醫(yī)藥衛(wèi)生體制改革和建設(shè)國(guó)家中等職業(yè)教育改革發(fā)展示范學(xué)校的機(jī)遇，產(chǎn)教結(jié)合，加大投入，促進(jìn)作為臨床實(shí)踐技能實(shí)訓(xùn)基地的附屬醫(yī)院的規(guī)模進(jìn)一步擴(kuò)大、醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量進(jìn)一步提高、教育教學(xué)功能進(jìn)一步完善，促進(jìn)醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)進(jìn)一步發(fā)展，充分發(fā)揮我校醫(yī)學(xué)影像專(zhuān)業(yè)的辦學(xué)優(yōu)勢(shì)，培養(yǎng)更多勝任基層衛(wèi)生服務(wù)的醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專(zhuān)業(yè)人才，充分體現(xiàn)衛(wèi)生職業(yè)教育的功能，彰顯示范校的特色，造福百姓。
參考文獻(xiàn)：
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作者簡(jiǎn)介：肖智謙（1968-），男，漢族，廣西合浦人，醫(yī)學(xué)碩士，臨床醫(yī)學(xué)高級(jí)講師，副主任醫(yī)師，北海市衛(wèi)生學(xué)校附屬醫(yī)院院長(zhǎng)，國(guó)家執(zhí)業(yè)醫(yī)師臨床實(shí)踐技能考試考官，連續(xù)從事中職衛(wèi)校教學(xué)二十多年，是中國(guó)職業(yè)院校教學(xué)名師，廣西北海 536000
林斯文，北海市衛(wèi)生學(xué)校，廣西北海 536000
【關(guān)鍵詞】 二惡英;學(xué)習(xí)記憶功能;跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)
Abstract Objectives: To assess the effect of TCDD on the learning and memorial function of mice. Methods: 24 male mice and 24 female mice were randomly pided into four groups according to the sex：high dose (100 μg/kg) groμp， middle dose (10 μk/kg) group， low dose (1 μg/kg)group and the control group. Each group has 6 mice. The mice were injected ip with TCDD(controls were injected ip with DMSO). After 24 hours and 48 hours， the step-down test was performed to evaluate the learning and memorial function of the mice. Results: Compared with the controls， there was a significant increase in the memorial latent time of the male mice(P
Key words 2，3，7，8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin(TCDD); Learning and memorial function; Step-down test
2001年5月，由包括中國(guó)在內(nèi)的91個(gè)國(guó)家贊同的POPs公約(斯德哥爾摩公約)獲得通過(guò)，這個(gè)公約要求各國(guó)立即控制和治理以二惡英為代表的12種在環(huán)境中具有高殘留、高生物濃縮和高生物毒性的物質(zhì)，也就是POPs(persistent organic pollutants)物質(zhì)[1]。二惡英是一類(lèi)化合物的統(tǒng)稱(chēng)，包括多氯二苯并二惡英(PCDDs)和多氯二苯并呋喃(PCDFs)。PCDDs有75種同系物，PCDFs有135種同系物。2，3，7，8-四氯二苯并二惡英(2，3，7，8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin，TCDD)是二惡英類(lèi)物質(zhì)中毒性最強(qiáng)的物質(zhì)，也被認(rèn)為是世界上毒性最強(qiáng)的化合物[2]。二惡英有很強(qiáng)的致畸、致癌和皮膚損害作用[1]，有持久殘留性，能通過(guò)生物鏈逐級(jí)濃縮，對(duì)人體造成潛在的威脅[3]。很多毒物會(huì)影響動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶功能，二惡英能否引起動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶功能的變化尚未見(jiàn)報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)欲研究急性染毒條件下TCDD對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)昆明種小鼠48只，雌雄各半，體重18～22 g，由天津醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物室提供。
1.1.2 儀器和試劑 跳臺(tái)儀(中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院制造)、萬(wàn)分之一電子天平(JA61001，上海精科天平)，TCDD(購(gòu)自Cambridge Isotope Laboratories，Inc.)純度99 %，用二甲基亞砜(DMSO)配制成濃度為25 μg/mL的母液，取母液分別將其稀釋成質(zhì)量濃度為2.5 μg/mL和0.25 μg/mL的應(yīng)用液，二甲基亞砜(DMSO)為國(guó)產(chǎn)分析純。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 動(dòng)物處理 對(duì)所選小鼠觀察1周，確定其健康狀況，然后將雌雄各24只小鼠分別隨機(jī)分為4組：對(duì)照組和染毒高劑量組(100 μg/kg)、中劑量組(10 μg/kg)、低劑量組(1 μg/kg)，每組6只，腹腔注射一次染毒，對(duì)照組給予0.1 mL DMSO。
1.2.2 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn) 染毒24 h后，對(duì)小鼠進(jìn)行學(xué)習(xí)能力測(cè)試;染毒48 h后，對(duì)小鼠進(jìn)行記憶能力的測(cè)試。染毒24 h后，將動(dòng)物放入反應(yīng)箱內(nèi)(臺(tái)上、臺(tái)下)適應(yīng)3 min，然后將小鼠放置反應(yīng)箱內(nèi)的銅柵上，立即通以36 V的交流電。小鼠受到電擊，其正常反應(yīng)是跳回平臺(tái)(絕緣體)以躲避傷害性刺激。多數(shù)小鼠可能再次或多次跳至銅柵上受到電擊又迅速跳回平臺(tái)上。訓(xùn)練一次后，將動(dòng)物放在反應(yīng)箱內(nèi)的平臺(tái)上，記錄5 min內(nèi)各鼠跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)和第一次跳下平臺(tái)的時(shí)間(潛伏期)，以此作為評(píng)價(jià)其學(xué)習(xí)能力的指標(biāo)。染毒48 h后再次進(jìn)行測(cè)驗(yàn)，將小鼠放在平臺(tái)上記錄其第一次跳下平臺(tái)的潛伏期、3 min鐘內(nèi)的跳下次數(shù)，以此作為評(píng)價(jià)其記憶能力的指標(biāo)。如果小鼠在5 min和3 min內(nèi)未跳下平臺(tái)，則其潛伏期以300 s和180 s記。
1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)用SPSS11.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，用單因素方差分析(One-way-ANOVA)進(jìn)行多組間比較及兩兩比較，對(duì)于不符合方差分析條件的用近似檢驗(yàn)(Tamhane's T2，Dunnett's T3，Games-Howell， Dunnett's C)，P
2 結(jié)果
2.1 雄性小鼠 TCDD染毒24 h后與對(duì)照組相比，各組小鼠5 min內(nèi)跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)和第一次跳下平臺(tái)的潛伏期的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。染毒48 h后與對(duì)照組相比，低、中劑量組小鼠5 min內(nèi)跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)和潛伏期的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，高劑量組小鼠第一次跳下平臺(tái)的潛伏期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
2.2 雌性小鼠 TCDD染毒24 h后與對(duì)照組相比，各組小鼠5 min內(nèi)跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)和第一次跳下平臺(tái)的潛伏期的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。染毒48 h后與對(duì)照組相比，低、高劑量組小鼠5min內(nèi)跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
3 討論
長(zhǎng)期接觸TCDD，對(duì)于人的神經(jīng)行為功能具有損害作用，如造成記憶力下降、反應(yīng)力降低、正中神經(jīng)傳導(dǎo)速度減慢等[4-5]。本實(shí)驗(yàn)采用一次染毒，用跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)對(duì)小鼠的學(xué)習(xí)和記憶功能進(jìn)行測(cè)定。從結(jié)果可以看出，染毒24 h后雄性小鼠的學(xué)習(xí)功能與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但在低、中劑量組，第一次跳下平臺(tái)的潛伏期有延長(zhǎng)趨勢(shì)，錯(cuò)誤次數(shù)有減少趨勢(shì);在高劑量組，第一次跳下平臺(tái)潛伏期有減少趨勢(shì)，錯(cuò)誤次數(shù)有增加趨勢(shì)。這可能是由于在一定劑量范圍內(nèi)，小鼠受到TCDD的刺激后處于應(yīng)激狀態(tài)，興奮性和反應(yīng)性有所升高，而使其學(xué)習(xí)功能有所增強(qiáng)所致;而隨著TCDD染毒劑量的增加，毒性也隨之增加，造成小鼠的學(xué)習(xí)功能受到損害。在染毒48 h后的記憶功能測(cè)試中，其潛伏期也有延長(zhǎng)趨勢(shì)，其中高劑量組潛伏期比對(duì)照組顯著延長(zhǎng)，錯(cuò)誤次數(shù)有減少的趨勢(shì)，這可能是由于較低劑量的TCDD對(duì)小鼠的記憶功能的影響不明顯，而高劑量的TCDD引起的小鼠的應(yīng)激反應(yīng)較明顯造成的。
雌性小鼠中，染毒24 h后各組小鼠的學(xué)習(xí)功能與對(duì)照組相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但其潛伏期有縮短的趨勢(shì)，錯(cuò)誤次數(shù)也有增加的趨勢(shì)，可能是由于TCDD對(duì)小鼠的學(xué)習(xí)功能損傷所致。在染毒48 h后的記憶功能測(cè)定中，各組小鼠第一次跳下平臺(tái)的潛伏期與對(duì)照組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但有減少的趨勢(shì)，跳下的錯(cuò)誤次數(shù)也有增加的趨勢(shì)，其中，高、低劑量組跳下的錯(cuò)誤次數(shù)比對(duì)照組顯著增加，這可能是由于雌性小鼠對(duì)于TCDD比較敏感，在較低的劑量就對(duì)其記憶功能造成了損害。
從本次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可以看出，TCDD急性染毒對(duì)小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能具有影響，且有性別差異，在學(xué)習(xí)記憶功能測(cè)定中雄性小鼠的功能增強(qiáng)而雌性小鼠的功能減弱，原因可能是雌性小鼠對(duì)于TCDD造成的損害比雄性小鼠敏感。TCDD對(duì)于小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能影響程度及影響機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。
參考文獻(xiàn)
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【摘要】 目的觀察并比較獨(dú)一味和吡拉西坦對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。方法以東莨菪堿和乙醇分別造成小鼠學(xué)習(xí)記憶獲得障礙和記憶再現(xiàn)障礙，采用迷津法和跳臺(tái)法進(jìn)行觀察。結(jié)果獨(dú)一味提取物（0.5 g·kg-1和1.0 g·kg-1）及吡拉西坦（0.2 g·kg-1）均可使小鼠逃避傷害刺激的反應(yīng)速度加快，錯(cuò)誤次數(shù)明顯減少，遭電擊時(shí)間縮短（與模型組比較，0.01＜P＜0.05），兩藥的效果相近（P＞0.05）。結(jié)論獨(dú)一味對(duì)小鼠的學(xué)習(xí)和記憶障礙有改善作用，其作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】 獨(dú)一味；吡拉西坦；記憶獲得障礙；記憶再現(xiàn)障礙
Abstract：ObjectiveTo observe the effects of Herba Lamiophlomis on learning and memory ability of mice. MethodsThe models of aquired dysmnesia and reproduction memory disorders were established by scopolamine and alcohol，and the effects of Herba Lamiophlomis and piracetam on learning and memory ability were observed and compared.ResultsThe Herba Lamiophlomis aqueous extract at the dose of 0.5 g·kg-1 and 1.0 g·kg-1 could reduce the error times，prolong the latent period and shorten total time of lightning stroke.There was a significant difference between the Herba Lamiophlomis and model group ( P＜0.05).While there was no significant difference between the Herba Lamiophlomis and piracetam ( P＞0.05). ConclusionHerba Lamiophlomis can obviously improve learning and memory ability of mice.
Key words：Herba Lamiophlomis； Piracetam； Aquired dysmnesia； Reproduction memory disorders
獨(dú)一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo系唇形科無(wú)莖多年生草本植物，以全草或根及根狀莖入藥，是藏、蒙、納西等民族常用草藥。從獨(dú)一味的地上部分及根中分離得到黃酮類(lèi)、環(huán)烯醚萜類(lèi)和苯乙醇苷類(lèi)等多種化學(xué)成分［1，2］。研究表明，獨(dú)一味具有活血化瘀、鎮(zhèn)痛、止血、消腫、抗炎等作用［3，4］。獨(dú)一味膠囊用于各種疼痛、止血等取得了滿(mǎn)意的療效［5～7］。但獨(dú)一味對(duì)行為障礙的影響未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用東莨菪堿和乙醇致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙，采用迷津法和跳臺(tái)法觀察并比較獨(dú)一味提取物和吡拉西坦對(duì)學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
1 材料
1.1 動(dòng)物
昆明種小鼠，體重17～23 g，雌雄兼用，由天津市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)為SCXK津2005-0001。
1.2 藥品
獨(dú)一味，產(chǎn)地甘肅，由本校天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室提??；吡拉西坦，天津金世制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào) 20071027；氫溴酸東莨菪堿，上海禾豐制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào) 061101；無(wú)水乙醇，天津市華東試劑廠生產(chǎn)，批號(hào) 20061124。
1.3 儀器
MG-2型迷津刺激器，張家港市生物醫(yī)學(xué)儀器廠生產(chǎn)；ZH-50型小鼠跳臺(tái)刺激儀，安徽淮北正華生物儀器有限公司生產(chǎn)。
2 方法與結(jié)果
2.1 獨(dú)一味提取物的制備［7］
取獨(dú)一味粉碎，加水煎煮3次，1 h/次。合并煎液，過(guò)濾，將濾液濃縮并在80℃以下干燥成棕色粉末。用時(shí)用蒸餾水稀釋至所需濃度，保存于冰箱。
2.2 獨(dú)一味對(duì)東莨菪堿致記憶獲得障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
2.2.1 迷津法［8］
用小鼠Y型迷宮進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。選健康成年昆明小鼠60只，體重（19.8±1.5）g，雌雄各半，隨機(jī)分成5組。1組，對(duì)照組；2組，模型組；3組，吡拉西坦組（0.2 g·kg-1）；4組，獨(dú)一味低劑量組（0.5 g·kg-1）；5組，獨(dú)一味高劑量組（1.0 g·kg-1）組。各組均灌胃給藥，1組及2組給生理鹽水，容量均為10 ml·kg-1，1次/d，連續(xù)14 d。于第13天上午給藥后1 h開(kāi)始訓(xùn)練。訓(xùn)練前10 min，1組腹腔注對(duì)生理鹽水，其余各組小鼠均腹腔注射氫溴酸東莨菪堿（1.5 mg·kg-1）。訓(xùn)練時(shí)先將小鼠放于起步區(qū)適應(yīng)2 min，然后通電（40 V交流電），動(dòng)物受到電擊后直接逃至安全區(qū)為正確反應(yīng)，逃至電擊區(qū)為錯(cuò)誤反應(yīng)。如此訓(xùn)練15次，記錄正確反應(yīng)與錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)。24 h后進(jìn)行測(cè)試，觀察指標(biāo)及方法同訓(xùn)練時(shí)。結(jié)果以±s表示，通過(guò)t檢驗(yàn)比較兩組間差異的顯著性。結(jié)果見(jiàn)表1。表1 迷津法觀察獨(dú)一味對(duì)東莨菪堿所致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用（略）
結(jié)果顯示，獨(dú)一味能明顯減少小鼠錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)，改善小鼠由東莨菪堿所致的學(xué)習(xí)及記憶獲得障礙。
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2.2.2 跳臺(tái)法［8］
選健康成年昆明小鼠60只，體重（20.3±2.3） g，雌雄各半，隨機(jī)分成5組。分組方法及給藥方法同“2.2.1”項(xiàng)。于第13天上午給藥后1 h開(kāi)始訓(xùn)練，訓(xùn)練前10 min，1組腹腔注對(duì)生理鹽水，其余各組均腹腔注射氫溴酸東莨菪堿（1.5 mg·kg-1）。訓(xùn)練時(shí)先將小鼠放入跳臺(tái)反射箱內(nèi)適應(yīng)3 min，然后通電（36 V），小鼠受到電擊后正常反應(yīng)為跳上跳臺(tái)，逃避電擊，跳下臺(tái)時(shí)小鼠雙足同時(shí)接觸銅柵觸電，視為錯(cuò)誤反應(yīng)。訓(xùn)練5 min，并記錄小鼠逃避電擊首次跳上跳臺(tái)的時(shí)間（反應(yīng)閾）、5 min內(nèi)觸電次數(shù)（錯(cuò)誤次數(shù)）及5 min內(nèi)累加觸電時(shí)間（錯(cuò)誤反應(yīng)時(shí)間）作為學(xué)習(xí)成績(jī)。24 h后重新測(cè)試，測(cè)試時(shí)先將小鼠放于跳臺(tái)上，同時(shí)記時(shí)，記錄小鼠第一次跳下跳臺(tái)的時(shí)間，此期間為觸電潛伏期，并記錄5 min內(nèi)小鼠的錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)及累加觸電時(shí)間作為記憶成績(jī)。結(jié)果以±s表示，通過(guò)t檢驗(yàn)比較兩組間差異的顯著性。結(jié)果見(jiàn)表2。表2 跳臺(tái)法觀察獨(dú)一味對(duì)東莨菪堿所致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用（略）
結(jié)果顯示，獨(dú)一味能明顯縮短小鼠逃避電擊的時(shí)間，減少錯(cuò)誤反應(yīng)的次數(shù)，縮短觸電時(shí)間，并明顯延長(zhǎng)了測(cè)試時(shí)跳臺(tái)上的停留時(shí)間（潛伏期）。
2.3 獨(dú)一味對(duì)乙醇所致的記憶再現(xiàn)障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
采用小鼠迷津法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。選健康成年昆明小鼠60只，體重（19.5±1.4）g，雌雄各半，隨機(jī)分成5組。分組方法及給藥法方法同“2.2.1”項(xiàng)。于第13天上午給藥后1 h開(kāi)始訓(xùn)練。訓(xùn)練方法及觀察指標(biāo)同“2.2.1”項(xiàng)。24 h后進(jìn)行測(cè)試。測(cè)試前15 min， 1組灌胃生理鹽水，其余各組小鼠均灌胃35%乙醇，容量為0.1 ml·10 g-1，造成動(dòng)物記憶再現(xiàn)障礙。測(cè)試方法及數(shù)據(jù)處理方法同“2.2.1”項(xiàng)。結(jié)果見(jiàn)表3。表3 獨(dú)一味對(duì)乙醇所致記憶再現(xiàn)障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響（略）
結(jié)果顯示，35%乙醇能明顯降低小鼠的記憶再現(xiàn)能力，使錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)增多。吡拉西坦和獨(dú)一味均能減輕這種損傷，使學(xué)習(xí)能力有所增強(qiáng)，記憶再現(xiàn)障礙得到明顯改善。
3 討論
學(xué)習(xí)過(guò)程是由廣泛的神經(jīng)元群的共同活動(dòng)來(lái)完成的，反復(fù)的刺激使腦細(xì)胞的活動(dòng)在時(shí)間上和空間上發(fā)生構(gòu)型的變化，細(xì)胞間的聯(lián)系更加容易，使學(xué)習(xí)的信息得到鞏固而形成記憶。
學(xué)習(xí)和記憶是一個(gè)極其復(fù)雜的生理生化過(guò)程，其影響因素很多。首先，中樞遞質(zhì)與學(xué)習(xí)記憶活動(dòng)有關(guān)，擬膽堿藥可加強(qiáng)記憶活動(dòng)，而抗膽堿藥東莨菪堿則能使學(xué)習(xí)記憶功能減退；其次，中樞神經(jīng)系統(tǒng)的基本功能—興奮與抑制是影響學(xué)習(xí)記憶的一個(gè)重要因素。中樞的過(guò)度抑制會(huì)使學(xué)習(xí)記憶能力下降，高濃度乙醇會(huì)作用于大腦及小腦，抑制中樞，產(chǎn)生近記憶力喪失，時(shí)空定向力障礙，共濟(jì)失調(diào)等。
該實(shí)驗(yàn)采用東莨菪堿和乙醇分別造成小鼠學(xué)習(xí)記憶獲得障礙和記憶再現(xiàn)障礙，增加動(dòng)物的錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)及反應(yīng)時(shí)間。模型組與空白組比較，均P＜0.05。吡拉西坦是促思維記憶藥，用于腦血管疾病，神經(jīng)外科手術(shù)后等已有多年，實(shí)驗(yàn)中比較了獨(dú)一味與吡拉西坦對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
研究表明，獨(dú)一味對(duì)東莨菪堿及乙醇所致的學(xué)習(xí)及記憶障礙均有明顯的改善作用（與模型組比較，均P＜0.05），其效果與吡拉西坦相近（P＞0.05）。獨(dú)一味改善學(xué)習(xí)記憶能力的作用可能與其活血化瘀，從而改善腦組織的血液供給有關(guān)。其確切作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。
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作者：韓永正 劉剛 徐小林 錢(qián)瑩 戴體俊 韓連云
【摘要】 目的 觀察小劑量納洛酮對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。方法 小鼠分為生理鹽水(NS)組、納洛酮(NL)組，根據(jù)納洛酮?jiǎng)┝康牟煌?，NL組又分為NL1、NL2、NL3、NL4和NL5組(劑量分別為1000、100、10、1和0.1 ng· kg-1)，每組10只。用跳臺(tái)法和避暗法分別觀察各劑量納洛酮對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。結(jié)果 給藥后第1、2天各組跳臺(tái)法和避暗法的錯(cuò)誤次數(shù)、潛伏期無(wú)顯著性差異(P>0.05) 。結(jié)論 在本實(shí)驗(yàn)條件下，小劑量納洛酮對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶功能無(wú)明顯影響。
【關(guān)鍵詞】 納洛酮;跳臺(tái)實(shí)驗(yàn);避暗實(shí)驗(yàn);學(xué)習(xí)記憶
納洛酮(naloxone)是特異性阿片受體競(jìng)爭(zhēng)性阻斷藥，可有效、全面拮抗天然或合成的麻醉性鎮(zhèn)痛藥，能拮抗嗎啡等麻醉鎮(zhèn)痛藥的藥理作用和不良反應(yīng)，特別是逆轉(zhuǎn)麻醉鎮(zhèn)痛藥對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和呼吸的抑制［1］。阿片類(lèi)藥物成癮之后，其記憶十分強(qiáng)烈，而且可導(dǎo)致終生難忘，說(shuō)明學(xué)習(xí)記憶功能參與了阿片的成癮過(guò)程［2］。如果小劑量納洛酮能增強(qiáng)嗎啡的遺忘作用，將更有臨床意義。為闡明這一問(wèn)題，必須首先明確小劑量納洛酮對(duì)學(xué)習(xí)記憶功能的影響。小劑量納洛酮對(duì)學(xué)習(xí)記憶功能有何影響，國(guó)內(nèi)外鮮見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)用跳臺(tái)法和避暗法觀察小劑量納洛酮對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。
1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠60只，體重18～22 g，雌雄各半，由徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)前2天使小鼠熟悉實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，自由攝食飲水。
1.2 實(shí)驗(yàn)藥品 納洛酮注射液，北京凱因生物技術(shù)有限公司，批號(hào)20071105。用生理鹽水稀釋成所需濃度。
1.3 主要儀器 YLS-3T型跳臺(tái)儀，安徽省淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司研制，用不透明深灰色塑料分隔成5室，每室120 mm×20 mm×180 mm，電柵電壓100 V，電流0.05～2.0 mA。每間室右后角置一絕緣平臺(tái)(高4.5 cm)作為動(dòng)物回避電擊的安全臺(tái)。BA-200型小鼠避暗儀，成都泰盟科技有限公司研制，實(shí)驗(yàn)裝置分明暗兩室，兩室之間有一直徑為3 cm大小的圓洞，兩室底部均鋪以銅柵，暗室接電。
1.4 實(shí)驗(yàn)方法
1.4.1 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)［3］ 正式實(shí)驗(yàn)前先把小鼠放入反應(yīng)箱內(nèi)適應(yīng)3 min，通以0.25 mA電流電擊。訓(xùn)練時(shí)跳臺(tái)潛伏期大于180 s者棄去不用。記錄小鼠5 min內(nèi)第1次從平臺(tái)跳下的時(shí)間(潛伏期)和跳下的次數(shù)(錯(cuò)誤次數(shù))，將其作為基礎(chǔ)成績(jī)將小鼠分成6組，使各組小鼠智力水平接近。然后按分層隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，將小鼠分為生理鹽水組（NS組）和納洛酮組（NL組），根據(jù)納洛酮?jiǎng)┝康牟煌?1000、100、10、1和0.1 ng·kg-1)，NL組又分為NL1、NL2、NL3、NL4、NL5組，使各組小鼠平均體重和性別比例無(wú)顯著性差異。分組結(jié)束24 h后，NS組以0.1 ml·10 g-1腹腔注射生理鹽水，NL組分別以1000、100、10、1和0.1 ng·kg-1腹腔注射相應(yīng)劑量的納洛酮。各組注藥10 min后重新測(cè)試。記錄小鼠第1次跳下平臺(tái)的潛伏期和3 min內(nèi)跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)。若小鼠在平臺(tái)上超過(guò)3 min，其潛伏期以180 s計(jì)。用藥第2天重新測(cè)試各小鼠， 記錄潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù)。
1.4.2 避暗實(shí)驗(yàn)［3］ 訓(xùn)練時(shí)先將小鼠放入反應(yīng)箱中適應(yīng)3 min，然后暗室底部銅柵通40 V、50 Hz交流電。將小鼠背對(duì)洞口放入明室，小鼠進(jìn)入暗室則受到電擊。訓(xùn)練時(shí)避暗潛伏期大于180 s者棄去不用。記錄5 min內(nèi)第1次進(jìn)入暗室的時(shí)間(潛伏期)和進(jìn)入次數(shù)(錯(cuò)誤次數(shù))作為基礎(chǔ)成績(jī)。各組注藥10 min后重新測(cè)試。記錄小鼠第1次進(jìn)入暗室的潛伏期，5 min內(nèi)進(jìn)入暗室的錯(cuò)誤次數(shù)。如5 min內(nèi)小鼠仍未進(jìn)入暗室，錯(cuò)誤次數(shù)計(jì)為0次，潛伏期計(jì)為300 s。用藥第2天重新測(cè)試各小鼠。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 錯(cuò)誤次數(shù)及潛伏期用x±s表示，用SPSS 13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，組間比較采用單因素方差分析和q檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
2 結(jié) 果
見(jiàn)表1、2。表1 小劑量納洛酮對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響表2 小劑量納洛酮對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響從表1和表2中可見(jiàn)，在用藥前各組小鼠的錯(cuò)誤次數(shù)和潛伏期無(wú)顯著性差異(P>0.05)，表明各組小鼠基礎(chǔ)智力相似。用藥第1、2天，無(wú)論是跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)還是避暗實(shí)驗(yàn)，各組小鼠的錯(cuò)誤次數(shù)和潛伏期亦無(wú)顯著性差異（P>0.05），表明小劑量納洛酮對(duì)小鼠的學(xué)習(xí)記憶無(wú)明顯的影響。
3 討 論
記憶是人類(lèi)和動(dòng)物賴(lài)以生存所不可缺少的重要腦功能之一。一般把記憶分為3個(gè)階段，即獲得、鞏固和再現(xiàn)。本實(shí)驗(yàn)是以訓(xùn)練后給藥測(cè)定記憶的獲得過(guò)程。
人和動(dòng)物的內(nèi)在心理過(guò)程是無(wú)法直接觀察到的，只能根據(jù)可觀察到的刺激反應(yīng)來(lái)間接推測(cè)。跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)和避暗實(shí)驗(yàn)是常用的研究動(dòng)物記憶的實(shí)驗(yàn)方法，用于觀察回避性反應(yīng)［3］。
本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在本實(shí)驗(yàn)條件下，小劑量納洛酮對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶功能無(wú)明顯影響。
研究顯示，阿片受體與記憶密切相關(guān)［4］。納洛酮作為臨床上常用的催醒藥，可以縮短氯胺酮麻醉持續(xù)時(shí)間［5］，但其所用劑量較大（2 mg· kg-1）。本實(shí)驗(yàn)所用劑量為1000、100、10、1和0.1 ng·kg-1，劑量較小，對(duì)學(xué)習(xí)記憶功能無(wú)明顯影響。至于小劑量納洛酮合用嗎啡對(duì)學(xué)習(xí)記憶功能有何影響及其機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。
參考文獻(xiàn)
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（曲阜師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東 曲阜 273165）
【摘要】目的：研究急性應(yīng)激對(duì)小鼠空間學(xué)習(xí)記憶的影響及其機(jī)制。方法：以足底電擊來(lái)建立急性應(yīng)激小鼠模型，采用Morris水迷宮檢測(cè)小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力，以免疫組化方法檢測(cè)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3（NT-3）在小鼠海馬和前腦皮層的表達(dá)。結(jié)果：水迷宮實(shí)驗(yàn)中，急性應(yīng)激組小鼠與對(duì)照組相比，空間學(xué)習(xí)記憶顯著提高（P<0.01）。在海馬CA1區(qū)、CA3 區(qū)、齒狀回及前腦皮層NT-3的表達(dá)顯著增強(qiáng)（P<0.05，P<0.01）。結(jié)論：急性應(yīng)激所致小鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能的提高可能與腦內(nèi)NT-3表達(dá)上調(diào)相關(guān)。
關(guān)鍵詞 急性應(yīng)激；學(xué)習(xí)記憶；神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3；海馬；前腦皮層
Effects of Acute Stress on Ability of Spatial Learning-Memory and Expression of NT-3 in Mice Brain
CHEN Qian DU Na XIAO Jing-shan LI Yang HUO Pan LI Ya
（College of Life sciences, Qufu normal University, Qufu Shandong 273165, China）
【Abstract】Objective: To study the effects of acute stress on the spatial learning-memory function of mice and its mechanism. Methods: Using acute stress model mice induced by foot shock. The ability of spatial learning-memory of mice were determined by Morris Water maze task, and the expression of nerve neurotrophic factor 3 (NT-3) in the hippocampus (HP) and prefrontal cortex (PFC) were detected by immunohistochemical method. Results: The ability of spatial learning and memory in stress group mice were significantly enhanced (P<0.01), compared with the control group mice. The NT-3 expression in CA1,CA3, DG of HP and PFC were significantly increased in stress group mice (P<0.05, P<0.01). Conclusion: The acute stress causes the improvement of spatial and memory function in mice which may be closely related to the up-regulation of NT-3 expression in brain.
【Key words】Acute stress; Learning and memory; NT-3; HP; PFC
應(yīng)激（stress）是指機(jī)體受到內(nèi)外環(huán)境多種不利因素刺激時(shí)，為適應(yīng)環(huán)境所出現(xiàn)的非特異性綜合應(yīng)答反應(yīng)[1]。機(jī)體在應(yīng)激時(shí)產(chǎn)生適應(yīng)性反應(yīng)，免疫、神經(jīng)、內(nèi)分泌等系統(tǒng)共同參與調(diào)節(jié)，來(lái)應(yīng)對(duì)應(yīng)激的損害。研究表明，應(yīng)激對(duì)機(jī)體的影響是雙重的，適度應(yīng)激提高機(jī)體抵抗力和適應(yīng)力，對(duì)機(jī)體有利，過(guò)強(qiáng)的應(yīng)激則產(chǎn)生負(fù)面效應(yīng)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，海馬、前額葉皮層、下丘腦、紋狀體及杏仁體等腦區(qū)與應(yīng)激關(guān)系密切[2]。應(yīng)激可引起中樞神經(jīng)元的形態(tài)和功能改變，進(jìn)而影響學(xué)習(xí)記憶功能[3]。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3（neurtrophin-3, NT-3）是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子家族成員，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)廣泛分布，其功能涉及神經(jīng)系統(tǒng)分化及發(fā)育方面，參與損傷后修復(fù)，可維持神經(jīng)元的存活和正常功能[4]。本實(shí)驗(yàn)研究急性應(yīng)激模型小鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能的變化以及海馬和前額葉皮層NT-3表達(dá)的變化，探討急性應(yīng)激對(duì)小鼠空間學(xué)習(xí)記憶的影響及其機(jī)制。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組
2月齡昆明品系小鼠（清潔級(jí)），雌雄各半，體重20±2g，購(gòu)自山東魯抗醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。自然晝夜節(jié)律光照下，自由飲水，進(jìn)食，實(shí)驗(yàn)人員每日抓捉小鼠使之適應(yīng)操作。小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和急性應(yīng)激組，每組12只。
1.2 建立急性應(yīng)激模型
急性應(yīng)激組采用足底電擊作為單一應(yīng)激源（電壓36V，15s/次，每次持續(xù)30s，共30次）。對(duì)照組不接受電擊，正常狀態(tài)飼養(yǎng)。
1.3 Morris水迷宮檢測(cè)學(xué)習(xí)記憶能力
采用Morris水迷宮，檢測(cè)兩組小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。Morris水迷宮由圓形水池和池內(nèi)一可移動(dòng)平臺(tái)組成，直徑80cm，高50cm，水溫26±1℃。測(cè)試程序包括定位航行和空間搜索兩個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟。水迷宮被均分為4個(gè)象限，平臺(tái)置放于第一象限（目標(biāo)象限），并在第三象限池壁做紅色標(biāo)記，使之于平臺(tái)連線(xiàn)為水池直徑。定位航行實(shí)驗(yàn)共2d，每只小鼠每天兩個(gè)訓(xùn)練周期，每個(gè)周期內(nèi)接受4次找平臺(tái)訓(xùn)練，小鼠分別對(duì)應(yīng)一個(gè)象限入水，每次訓(xùn)練120s。記錄小鼠入水至找到水下平臺(tái)的逃避潛伏期（escape latency）。第3d進(jìn)行空間搜索試驗(yàn)，撤除平臺(tái)，小鼠由第三象限入水點(diǎn)入水，記錄小鼠120s內(nèi)在4個(gè)象限的游泳時(shí)間，以檢測(cè)小鼠對(duì)平臺(tái)（目標(biāo)象限）的記憶能力。在定位航行的每個(gè)訓(xùn)練周期前和空間搜索試驗(yàn)前對(duì)應(yīng)激組的小鼠足底電擊。
1.4 小鼠海馬和前額葉皮層NT-3的表達(dá)
在完成水迷宮空間試驗(yàn)后，戊巴比妥鈉注射麻醉小鼠，開(kāi)胸腔暴露出心臟，快速經(jīng)心先后灌注37℃生理鹽水50ml及4℃的4%多聚甲醛溶液50ml，開(kāi)顱取腦，然后再固定2h，經(jīng)梯度酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋后進(jìn)行冠狀切片（厚約5μm）。然后進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)，一抗及試劑盒均購(gòu)自武漢博士德生物公司，按照試劑盒的要求操作。陰性對(duì)照選擇PBS（磷酸緩沖液）代替一抗。選擇每只小鼠相應(yīng)海馬部位和前腦皮層（PFC）切片3張，每張隨機(jī)選取兩個(gè)不相重疊的視野，用Motic Images Advanced 3.2圖像處理系統(tǒng)對(duì)海馬和前腦皮層的NT-3陽(yáng)性細(xì)胞平均目標(biāo)灰度值進(jìn)行分析。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
所有數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)來(lái)表示，水迷宮2d定位航行逃避潛伏期采用重復(fù)測(cè)量方差分析（repeated-measures ANOVA）；第3d空間搜索試驗(yàn)各象限游泳時(shí)間采用單因素方差分析（one-way ANOVA），組間比較以 Newman-Keuls法分析。其他數(shù)據(jù)組間比較用非配對(duì)t檢驗(yàn)分析。P<0.05時(shí)說(shuō)明有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
2 結(jié)果
2.1 各組小鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能的變化
統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，兩天的定位航行試驗(yàn)中，對(duì)照組和應(yīng)激組小鼠的逃避潛伏期迅速下降（表1）；有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異（F=6.172，P<0.01）；與對(duì)照組相比，應(yīng)激組在第2、3、4訓(xùn)練周期的逃避潛伏期明顯縮短，有顯著性差異（P<0.05，P<0.01，P<0.01）。 結(jié)果表明，急性應(yīng)激能明顯增強(qiáng)小鼠的空間學(xué)習(xí)能力。
*P <0.05，**P <0.01：與對(duì)照組比較(ANOVA,N-K檢驗(yàn))；n=12.
在空間搜索實(shí)驗(yàn)中，在目標(biāo)象限（第一象限）對(duì)照組和應(yīng)激組小鼠均停留最長(zhǎng)時(shí)間（表2）；對(duì)照組小鼠 （F=10.03，P<0.01）和應(yīng)激組小鼠（F=20.61，P<0.01） 在目標(biāo)象限停留的時(shí)間均顯著長(zhǎng)于在二、三、四象限的時(shí)間。與對(duì)照組比，在目標(biāo)象限應(yīng)激組小鼠的停留時(shí)間顯著延長(zhǎng)（P<0.05），而在目標(biāo)象限的對(duì)面象限（第三象限）停留測(cè)時(shí)間顯著減短 （P<0.05） 結(jié)果表明，急性應(yīng)激后小鼠空間記憶保持能力增強(qiáng)。
*P <0.05，與對(duì)照組比較(ANOVA，N-K檢驗(yàn))；n=12.
2.2 各組小鼠海馬和前腦皮層NT-3蛋白的表達(dá)
免疫組織化學(xué)染色表明，急性應(yīng)激后，與對(duì)照組小鼠比較，應(yīng)激組小鼠海馬CA1 、CA3 區(qū)、 DG 區(qū)及前額葉皮層 NT-3的表達(dá)顯著增強(qiáng)。與對(duì)照組比較（表3），應(yīng)激組小鼠在各腦區(qū)的NT-3 陽(yáng)性神經(jīng)元平均目標(biāo)灰度值顯著減少（P<0.05）。
*P<0.05, 與對(duì)照組比較（非配對(duì)t檢驗(yàn)）；n=12.
3 討論
研究表明，應(yīng)激對(duì)機(jī)體的影響具有雙重性，適度的應(yīng)激對(duì)機(jī)體起積極作用，而長(zhǎng)久、強(qiáng)烈的刺激使中樞神經(jīng)元形態(tài)改變及功能障礙，影響腦的認(rèn)知功能，引起學(xué)習(xí)記憶能力的下降。海馬在應(yīng)激導(dǎo)致行為變化方面發(fā)揮重要作用，是學(xué)習(xí)記憶的關(guān)鍵腦區(qū)[5]。英國(guó)心理學(xué)家Morris設(shè)計(jì)水迷宮用于學(xué)習(xí)記憶腦機(jī)制研究，能對(duì)動(dòng)物空間學(xué)習(xí)記憶能力作出較準(zhǔn)確的反映。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，急性應(yīng)激后小鼠在Morris水迷宮中的逃避潛伏期明顯縮短，在空間搜索試驗(yàn)中，小鼠目標(biāo)象限停留時(shí)間明顯延長(zhǎng)，說(shuō)明急性應(yīng)激能使動(dòng)物的空間學(xué)習(xí)記憶功能顯著增強(qiáng)。
NT-3在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)廣泛分布，主要在海馬、腦干、背根節(jié)、脊髓等[6]。NT-3的一級(jí)結(jié)構(gòu)與NGF家族其他成員有一致的保守區(qū)，又有可變區(qū)。NT-3主要通過(guò)酪氨酸激酶受體（trkC）受體來(lái)發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。NT-3生物學(xué)效應(yīng)廣泛，在體內(nèi)能夠支持感覺(jué)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活，在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育早期，能夠促進(jìn)神經(jīng)嵴細(xì)胞的發(fā)育，對(duì)外周感覺(jué)神經(jīng)元的發(fā)生及數(shù)量起調(diào)節(jié)作用[7]。NT-3缺乏或表達(dá)降低會(huì)影響學(xué)習(xí)記憶等功能，并與神經(jīng)退行性疾病密切相關(guān)。NT-3能阻止老年癡呆患者膽堿能神經(jīng)元退變，對(duì)于基底前腦膽堿能神經(jīng)元退變導(dǎo)致的學(xué)習(xí)記憶功能障礙有改善作用。NT-3選擇性的結(jié)合 trkC受體而發(fā)揮生理效應(yīng)。trkC是 trk受體家族的重要成員，作為NT-3的高親和力受體，分布在海馬的錐體細(xì)胞層、齒狀回、大腦皮質(zhì)的外層細(xì)胞簇及小腦顆粒細(xì)胞層，NT-3也在這些區(qū)域表達(dá)，提示NT-3與 trkC形成聯(lián)合自分泌環(huán)路，對(duì)神經(jīng)元存活起一定作用[8]。
我們先前的研究表明，急性應(yīng)激引起小鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能增強(qiáng)，腦內(nèi)海馬和前腦皮層GDNF的表達(dá)明顯增加[9]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，急性應(yīng)激后，應(yīng)激組小鼠的海馬和前額葉皮層NT-3的表達(dá)顯著增強(qiáng)。結(jié)果顯示，急性應(yīng)激使小鼠海馬和前腦皮層的神經(jīng)元活動(dòng)發(fā)生明顯變化。海馬和前腦皮層與學(xué)習(xí)記憶功能密切相關(guān)，海馬更是調(diào)節(jié)應(yīng)激反應(yīng)的高級(jí)中樞[10]。急性應(yīng)激后，小鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能的提高與海馬和前腦皮層NT-3表達(dá)增強(qiáng)是一致的，結(jié)果提示NT-3可能參與調(diào)控急性應(yīng)激對(duì)動(dòng)物空間學(xué)習(xí)記憶功能的改變，其表達(dá)上調(diào)可能是導(dǎo)致空間學(xué)習(xí)記憶功能改變的機(jī)制之一。
參考文獻(xiàn)
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[關(guān)鍵詞]智能儀器 項(xiàng)目驅(qū)動(dòng) 項(xiàng)目設(shè)計(jì)
引言
智能儀器是含有微型計(jì)算機(jī)或者微型處理器的測(cè)量?jī)x器，擁有對(duì)數(shù)據(jù)的存儲(chǔ)、運(yùn)算、邏輯判斷及自動(dòng)化操作等功能。智能儀器憑借其體積小、功能強(qiáng)、功耗低等優(yōu)勢(shì)，迅速地在家用電器、科研單位和工業(yè)企業(yè)中得到了廣泛的應(yīng)用。在信息技術(shù)的高速發(fā)展和人工智能應(yīng)用的推動(dòng)下，智能儀器必將有更大的進(jìn)展。因此，學(xué)習(xí)智能儀器的工作原理、掌握其主要技術(shù)和設(shè)計(jì)方法是十分重要的。智能儀器技術(shù)課程是測(cè)控儀器與技術(shù)專(zhuān)業(yè)本科生重要的一門(mén)專(zhuān)業(yè)課，全國(guó)許多高校儀器儀表類(lèi)專(zhuān)業(yè)開(kāi)設(shè)的主干課之一。智能儀器技術(shù)課程在教學(xué)過(guò)程中存在如下難度：①本課程內(nèi)容涉及“電子、傳感器、信號(hào)處理、計(jì)算機(jī)軟硬件”等多門(mén)前導(dǎo)課程知識(shí)和技術(shù)，學(xué)生掌握程度和興趣趨向差異很大;②課程體系邏輯性和系統(tǒng)性不強(qiáng)，而靈活性高，相關(guān)領(lǐng)域新技術(shù)引入快。本課程在教學(xué)過(guò)程中只有激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，引導(dǎo)學(xué)生協(xié)作學(xué)習(xí)、自主學(xué)習(xí)才能很好的達(dá)到教學(xué)目標(biāo)。項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法正是引導(dǎo)學(xué)生團(tuán)結(jié)協(xié)作，提高學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，調(diào)動(dòng)學(xué)習(xí)積極性的一個(gè)比較成功的教學(xué)方法，在智能儀器技術(shù)課程的教學(xué)中被引入后，收到了較好的教學(xué)效果。
一、項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法的內(nèi)容和特點(diǎn)[1]
項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法是師生通過(guò)共同實(shí)施一個(gè)完整的項(xiàng)目工作而進(jìn)行的教學(xué)活動(dòng)，在教學(xué)過(guò)程中將教學(xué)內(nèi)容設(shè)計(jì)為一個(gè)完整的項(xiàng)目，在教師的指導(dǎo)下，學(xué)生以小組協(xié)作方式制訂計(jì)劃，團(tuán)結(jié)協(xié)作完成整個(gè)項(xiàng)目，從而達(dá)到學(xué)習(xí)知識(shí)，培養(yǎng)分析和解決問(wèn)題的能力的一種教學(xué)方法。在項(xiàng)目教學(xué)中，學(xué)習(xí)過(guò)程成為一個(gè)人人參與的創(chuàng)造實(shí)踐活動(dòng)，注重的不是最終的結(jié)果，而是完成項(xiàng)目的過(guò)程。學(xué)生在項(xiàng)目實(shí)踐過(guò)程中，理解和把握課程要求的知識(shí)和技能，體驗(yàn)創(chuàng)新的艱辛與樂(lè)趣，培養(yǎng)分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的思想和方法。
項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法最顯著的特點(diǎn)是“以項(xiàng)目為主線(xiàn)、教師為主導(dǎo)、學(xué)生為主體”，改變了以往“教師講，學(xué)生聽(tīng)”被動(dòng)的教學(xué)模式，創(chuàng)造了學(xué)生主動(dòng)參與、自主協(xié)作、探索創(chuàng)新的新型教學(xué)模式。具體表現(xiàn)在：①開(kāi)放性。學(xué)生在完成項(xiàng)目的過(guò)程中，可以自由探索完成項(xiàng)目的各種方式、方法。②綜合性。項(xiàng)目的內(nèi)容應(yīng)比較綜合和完整，學(xué)生完成項(xiàng)目需要運(yùn)用多個(gè)學(xué)科的專(zhuān)業(yè)知識(shí)，更需要學(xué)生具有相應(yīng)的多方面的能力，因此，項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法對(duì)學(xué)習(xí)的培養(yǎng)是多方面的，甚至包括學(xué)習(xí)能力、解決問(wèn)題的能力和團(tuán)隊(duì)合作能力。③實(shí)踐性。項(xiàng)目設(shè)計(jì)注重社會(huì)需求，因此，項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法的內(nèi)容更具有實(shí)用性。
二、項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法的實(shí)施步驟
項(xiàng)目教學(xué)的流程為[2]：
圖1：項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法的教學(xué)流程
三、項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法在教學(xué)過(guò)程中的具體實(shí)施
（一）項(xiàng)目的確定
選擇的項(xiàng)目的好壞、難易、是否能突出所學(xué)知識(shí)等幾個(gè)問(wèn)題是項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)過(guò)程的關(guān)鍵。要選擇一個(gè)適合本課程教學(xué)目標(biāo)的項(xiàng)目需要從以下幾個(gè)方面考慮：
①授課對(duì)象的層次。針對(duì)本校學(xué)生基礎(chǔ)知識(shí)薄弱、學(xué)習(xí)較被動(dòng)的特點(diǎn)，在設(shè)計(jì)項(xiàng)目時(shí)不宜太難，太難會(huì)打消他們繼續(xù)學(xué)習(xí)的積極性[3]。因此，在項(xiàng)目設(shè)計(jì)時(shí)盡量選擇使用比較常見(jiàn)的傳感器、顯示器等元器件來(lái)實(shí)現(xiàn)。如溫濕度控制器這個(gè)項(xiàng)目，選用DHT11溫濕度傳感器，其使用方法和注意事項(xiàng)在書(shū)本上、網(wǎng)絡(luò)上介紹的比較多，學(xué)生很容易查到，自學(xué)門(mén)坎低，有利于學(xué)生開(kāi)展自主學(xué)習(xí)。
②授課的內(nèi)容。智能儀器技術(shù)課程在講述智能儀器工作原理的基礎(chǔ)上，介紹智能化儀器的設(shè)計(jì)方法，主要內(nèi)容有智能儀器的輸入輸出通道、外設(shè)及其控制技術(shù)、通信接口、典型功能及數(shù)據(jù)處理技術(shù)、抗干擾措施、軟件設(shè)計(jì)方法[4]。在進(jìn)行項(xiàng)目設(shè)計(jì)時(shí)需綜合考慮項(xiàng)目的統(tǒng)籌設(shè)置、項(xiàng)目間的聯(lián)系和層次遞進(jìn)[5]。如每個(gè)項(xiàng)目都包含硬件電路設(shè)計(jì)和軟件設(shè)計(jì)的內(nèi)容，而針對(duì)輸入輸出通道的設(shè)計(jì)，先開(kāi)展一個(gè)開(kāi)關(guān)量輸入輸出的項(xiàng)目，再進(jìn)行一個(gè)模擬量輸入輸出的項(xiàng)目，通過(guò)這種先易后難的設(shè)計(jì)樹(shù)立學(xué)生的自信心，使學(xué)生逐步掌握智能儀器信號(hào)輸入信道的設(shè)計(jì)要點(diǎn)。
③授課的目標(biāo)。智能儀器技術(shù)的教學(xué)目標(biāo)是“使學(xué)生建立儀器整機(jī)系統(tǒng)的概念，掌握智能儀器軟硬件相結(jié)合的基本工作原理、主要技術(shù)和設(shè)計(jì)方法，結(jié)合實(shí)際儀器項(xiàng)目開(kāi)展系統(tǒng)設(shè)計(jì)。著力培養(yǎng)學(xué)生運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與技術(shù)開(kāi)展綜合設(shè)計(jì)和創(chuàng)新實(shí)踐的能力。增強(qiáng)學(xué)生靈活性和創(chuàng)新意識(shí)。”因此，項(xiàng)目的設(shè)計(jì)要具有綜合性，既要與書(shū)本的知識(shí)緊密結(jié)合，又要能夠充分體現(xiàn)現(xiàn)實(shí)中的應(yīng)用情況，還要有一定的創(chuàng)新空間，讓學(xué)生既能運(yùn)用學(xué)過(guò)的知識(shí)，又可以創(chuàng)造發(fā)揮。
基于以上三點(diǎn)考慮，在智能儀器技術(shù)課程中從易到難共設(shè)置了如表1所示5個(gè)教學(xué)項(xiàng)目，每個(gè)項(xiàng)目逐漸增加新的知識(shí)點(diǎn)，使學(xué)生在項(xiàng)目的實(shí)施中逐漸掌握教學(xué)內(nèi)容。
表1：智能儀器技術(shù)課程教學(xué)項(xiàng)目設(shè)置
（二）項(xiàng)目的實(shí)施
項(xiàng)目教學(xué)實(shí)施方案分為確定項(xiàng)目任務(wù)、項(xiàng)目實(shí)施、項(xiàng)目驗(yàn)收及綜合評(píng)價(jià)3個(gè)過(guò)程。
1.確定項(xiàng)目任務(wù)
首先進(jìn)行項(xiàng)目分組，每個(gè)項(xiàng)目都涉及到硬件電路設(shè)計(jì)、電路搭建和調(diào)試、軟件程序設(shè)計(jì)、項(xiàng)目報(bào)告編寫(xiě)四方面內(nèi)容，據(jù)此將學(xué)生分成4人一組，每人負(fù)責(zé)一個(gè)內(nèi)容。然后教師將所提供的項(xiàng)目的任務(wù)、目標(biāo)及相關(guān)知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行講解和分析，讓小組根據(jù)他們的知識(shí)結(jié)構(gòu)和能力進(jìn)行選題。項(xiàng)目確定后，根據(jù)項(xiàng)目的不同部分和要實(shí)現(xiàn)的功能，進(jìn)行小組討論，自行進(jìn)行任務(wù)分工，查閱相關(guān)數(shù)據(jù)，提出合理可行的設(shè)計(jì)方案。
2.項(xiàng)目實(shí)施
下面以“光電脈搏測(cè)量?jī)x”為例說(shuō)明項(xiàng)目教學(xué)的實(shí)施過(guò)程。
1）項(xiàng)目描述：
（1）項(xiàng)目概況：通過(guò)檢測(cè)透過(guò)手指的光強(qiáng)間接測(cè)量人體的脈搏信號(hào)并顯示。
（2）項(xiàng)目的難點(diǎn)：本項(xiàng)目實(shí)施過(guò)程中，學(xué)生們會(huì)遇到的難點(diǎn)問(wèn)題有：①消除環(huán)境光對(duì)脈搏傳感器測(cè)量的影響。光敏器件接收到的光信號(hào)不僅包含脈搏信息的透射光的信號(hào)，而且包含測(cè)量環(huán)境下的背景光信號(hào)，即環(huán)境光和在測(cè)量過(guò)程中引起的二次反射光，只有消除背景光的干擾，才能獲得準(zhǔn)確的脈搏數(shù)，如何消除背景光，是在項(xiàng)目實(shí)施過(guò)程中的難點(diǎn)之一。②微弱信號(hào)的處理。通過(guò)光電轉(zhuǎn)換得到的包含脈搏信息的電信號(hào)一般比較微弱，極易受到環(huán)境噪聲和肢體運(yùn)動(dòng)的干擾，需對(duì)采集到的這個(gè)微弱信號(hào)進(jìn)行放大、整形。③軟件的編制，要求學(xué)生對(duì)單片機(jī)非常熟悉。
2）教學(xué)目標(biāo)：要求學(xué)生根據(jù)學(xué)過(guò)的傳感器、單片機(jī)、信號(hào)處理等知識(shí)，設(shè)計(jì)合理的信號(hào)采集電路、放大整形電路和單片機(jī)處理單路，實(shí)現(xiàn)脈搏的測(cè)量和顯示。具體包括設(shè)計(jì)出合理較合理的脈搏測(cè)量電路;能正確利用面包板及相應(yīng)芯片完成硬件電路的搭接、調(diào)試;能編寫(xiě)程序使系統(tǒng)工作起來(lái);能夠撰寫(xiě)設(shè)計(jì)報(bào)告。
3）實(shí)施步驟：
（1）系統(tǒng)需求分析、確定設(shè)計(jì)任務(wù)。在本階段，教師指導(dǎo)學(xué)生從實(shí)際出發(fā)，分析光電脈搏測(cè)量?jī)x應(yīng)達(dá)到的性能和功能要求，如在性能上，測(cè)量精度達(dá)到±2/min，顯示精度為±1;在功能上，系統(tǒng)具有①測(cè)量功能，能準(zhǔn)確測(cè)量人體脈搏信號(hào);②顯示功能，測(cè)量的脈搏能正確顯示;③存儲(chǔ)功能，被檢測(cè)人的基本信息和測(cè)量結(jié)果能存儲(chǔ)下來(lái);④通信功能，測(cè)量結(jié)果能遠(yuǎn)程傳送至計(jì)算機(jī)終端，以實(shí)現(xiàn)對(duì)采集的數(shù)據(jù)的及時(shí)存儲(chǔ)和分析;⑤上位機(jī)軟件實(shí)現(xiàn)，用合適的工具開(kāi)發(fā)上位機(jī)軟件，以對(duì)采集的脈搏信息進(jìn)行接收、存儲(chǔ)、顯示和處理等。
（2）擬定總體設(shè)計(jì)方案。根據(jù)系統(tǒng)的性能和功能要求，確定光電脈搏測(cè)量?jī)x的硬件結(jié)構(gòu)圖，如圖2所示。并確定關(guān)鍵組成部分，如微處理器、傳感器等的具體型號(hào)。
圖2：光電脈搏測(cè)量?jī)x結(jié)構(gòu)框圖
（3）硬件電路的設(shè)計(jì)與調(diào)試。確定本項(xiàng)目的硬件結(jié)構(gòu)后，再分模塊設(shè)計(jì)出具體的電路接線(xiàn)圖。這是項(xiàng)目實(shí)施過(guò)程中的一個(gè)難點(diǎn)。在這一過(guò)程中，教師要引導(dǎo)學(xué)生依據(jù)微處理器原理、模擬及數(shù)字電路原理、測(cè)量、控制電路的原理，所用元器件的功能、性能指針繪制詳細(xì)的電路接線(xiàn)圖并進(jìn)行參數(shù)計(jì)算。
項(xiàng)目組設(shè)計(jì)出的電路接線(xiàn)圖，經(jīng)教師認(rèn)可，即可由接線(xiàn)圖列出所需元器件清單，根據(jù)接線(xiàn)圖進(jìn)行硬件電路的搭接與調(diào)試。硬件電路的調(diào)試過(guò)程是考驗(yàn)學(xué)生動(dòng)手能力的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，這個(gè)過(guò)程不但要用到開(kāi)發(fā)系統(tǒng)，還要用到一些測(cè)試儀器，如萬(wàn)用表、示波器等。在這個(gè)過(guò)程中教師可以引導(dǎo)學(xué)生熟練掌握一些測(cè)試方法和技巧，為他們以后的工作打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
（4）軟件設(shè)計(jì)。在軟件設(shè)計(jì)思路上，教師引導(dǎo)學(xué)生學(xué)會(huì)模塊化設(shè)計(jì)，即根據(jù)項(xiàng)目中軟件承擔(dān)的任務(wù)，掌握硬件中各I/0信道與外界的聯(lián)系，設(shè)計(jì)合理的軟件結(jié)構(gòu)。本項(xiàng)目中，系統(tǒng)初始化之后， 進(jìn)行定時(shí)器中斷、外部中斷、顯示等工作，主程序流程圖如圖3所示。因此，可將任務(wù)分解成初始化、定時(shí)器中斷、外部中斷計(jì)數(shù)、液晶顯示四個(gè)相對(duì)獨(dú)立的子任務(wù)由項(xiàng)目組成員分擔(dān)完成。這是整個(gè)項(xiàng)目的另一重點(diǎn)，同時(shí)也是培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考、分析問(wèn)題、解決問(wèn)題、進(jìn)行創(chuàng)造性思維的過(guò)程。
圖3：光電脈搏測(cè)量?jī)x主程序流程圖
（5）儀器聯(lián)調(diào)與性能測(cè)試。軟硬件設(shè)計(jì)時(shí)對(duì)各個(gè)硬件電路和軟件模塊進(jìn)行了初步調(diào)試，還必須進(jìn)行硬件和軟件聯(lián)調(diào)，以檢驗(yàn)設(shè)計(jì)是否到達(dá)目標(biāo)。在調(diào)試過(guò)程中，教師應(yīng)引導(dǎo)學(xué)生分析、模擬儀器使用過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)的各種情況，對(duì)儀器的所有功能進(jìn)行反復(fù)操作，增強(qiáng)學(xué)生的觀察力、感知力，培養(yǎng)悟性和洞察力。當(dāng)程序運(yùn)行出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)，教師及時(shí)引導(dǎo)學(xué)生分析問(wèn)題，修正錯(cuò)誤。例如，某些學(xué)生對(duì)外部中斷的工作過(guò)程一知半解，在程序設(shè)計(jì)中缺少對(duì)數(shù)值處理的指令，因而程序運(yùn)行時(shí)，發(fā)現(xiàn)不能按控制要求實(shí)現(xiàn)工作。這時(shí)教師不直接給出答案，而是讓學(xué)生自己去思索，不斷調(diào)試運(yùn)行，主動(dòng)分析、發(fā)現(xiàn)錯(cuò)誤，經(jīng)分析、修正，直至運(yùn)行成功。在反復(fù)的運(yùn)行調(diào)試實(shí)踐中，學(xué)生始終處于主體地位。
（6）編寫(xiě)儀器文件。在完成儀器的研制后，還必須完成設(shè)計(jì)文檔的編寫(xiě)。內(nèi)容包括：①設(shè)計(jì)任務(wù)和儀器功能及性能指針說(shuō)明;②設(shè)計(jì)方案的論證、性能測(cè)定和現(xiàn)場(chǎng)使用報(bào)告;③使用操作說(shuō)明;④硬件數(shù)據(jù)，包括硬件結(jié)構(gòu)框圖、電路原理圖、元器件布置圖和接線(xiàn)圖等;⑤軟件數(shù)據(jù)，包括程序總框圖、各模塊框圖、程序列表等[6]。
3.項(xiàng)目的評(píng)估總結(jié)
項(xiàng)目的評(píng)估總結(jié)是項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法的重要環(huán)節(jié)。學(xué)生在項(xiàng)目實(shí)施過(guò)程中會(huì)遇到各種各樣的問(wèn)題，先由學(xué)生對(duì)出現(xiàn)的問(wèn)題和工作的結(jié)果進(jìn)行自我評(píng)估，再有教師進(jìn)行評(píng)估總結(jié)，指出問(wèn)題的所在及解決的方法，總結(jié)比較各組的特點(diǎn)，引導(dǎo)他們學(xué)習(xí)別人的長(zhǎng)處來(lái)改進(jìn)和提高自己的能力，使學(xué)生的各種能力在評(píng)估中得到提高。
（三）教學(xué)過(guò)程中的注意事項(xiàng)
1.所有的項(xiàng)目，教師要先期實(shí)施完成過(guò)。這樣，一方面對(duì)項(xiàng)目有個(gè)全面的了解，便于更好地指導(dǎo)學(xué)生;另一方面當(dāng)項(xiàng)目提出的時(shí)候就能拿出明確而具體的成果展示，使學(xué)生有明確的目標(biāo)和感性認(rèn)知過(guò)程，知道實(shí)施該項(xiàng)目要解決哪些問(wèn)題，關(guān)鍵在哪里。
2.堅(jiān)持以學(xué)生為主體。在項(xiàng)目的實(shí)施過(guò)程中，教師不要直接給學(xué)生提供答案，而是要求學(xué)生通過(guò)自己的觀察和學(xué)習(xí)，找到解決問(wèn)題的方法。當(dāng)他們通過(guò)努力最終成功時(shí)，自信心和創(chuàng)造力得到提高，而解決問(wèn)題的能力也在實(shí)踐中潛移默化地發(fā)展。
3.發(fā)揮好教師的引導(dǎo)作用。在教學(xué)過(guò)程中，教師要深入了解學(xué)生的進(jìn)展，在學(xué)生遇到問(wèn)題時(shí)，及時(shí)進(jìn)行指導(dǎo)，幫助解決難題，以使學(xué)生保持對(duì)項(xiàng)目的興趣和積極參與的熱情;在學(xué)生學(xué)習(xí)不夠主動(dòng)時(shí)，給學(xué)生提出問(wèn)題，引導(dǎo)學(xué)生去探究;在學(xué)生完成基本項(xiàng)目后，調(diào)動(dòng)學(xué)生的創(chuàng)作欲望，進(jìn)一步完善項(xiàng)目創(chuàng)作;在項(xiàng)目完成后及時(shí)做好評(píng)價(jià)工作。
四、結(jié)束語(yǔ)
項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法改變了傳統(tǒng)的被動(dòng)的教學(xué)模式，不再是簡(jiǎn)單的讓學(xué)生按照教師的安排和講授去得到一個(gè)結(jié)果，而是在教師的指導(dǎo)下，學(xué)生去尋找得到這個(gè)結(jié)果的途徑，最終得到這個(gè)結(jié)果，并進(jìn)行展示和自我評(píng)價(jià)，學(xué)習(xí)的重點(diǎn)在學(xué)習(xí)過(guò)程而非學(xué)習(xí)結(jié)果，他們?cè)谶@個(gè)過(guò)程中鍛煉各種能力。近些年的教學(xué)實(shí)踐證明，項(xiàng)目驅(qū)動(dòng)教學(xué)法激發(fā)了學(xué)生的自信心和積極性，鍛煉了學(xué)生的綜合能力，在智能儀器技術(shù)課程的教學(xué)中收到了良好的效果。
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[關(guān)鍵詞] 自體輸血；異體輸血；胃癌；炎性因子；免疫功能
[中圖分類(lèi)號(hào)] R5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2016）02（a）-0106-02
Effect of Autogeneic or Allogeneic Transfusion on Inflammatory Factor and Immunologic Function in Patients with Radical Operation for Carcinoma of Stomach
LUO Yun， WANG Hong-mei
Blood Transfusion Department， The people s Hospital of Taixing of Jiangsu Province， Taixing， Jiangsu Province，225400 China
[Abstract] Objective To research the effect of autogeneic or allogeneic transfusion on inflammatory factor and immunologic function in patients with radical operation for carcinoma of stomach. Methods 96 cases of early gastric cancer patients receiving the radical operation for carcinoma of stomach in our hospital from June 2012 to August 2014 were selected and randomly divided into the autogeneic group and the allogeneic group with 48 cases in each， the allogeneic group were transfused with allogeneic whole blood， the autogeneic group were transfused with autologous blood， the natural killer （NK cells）， proleulzin（IL-2）and T lymphocyte subsets level（CD3+、CD4+、CD4+/CD8+）of the two groups before and after operation were compared. Results The NK cells and IL-2 of the two groups at the same day after operation were obviously decreased compared with those before operation，（P
[Key words] Autogeneic transfusion； Allogeneic transfusion； Gastric cancer； Inflammatory factor； Immunologic function
胃癌是源于胃黏膜上皮細(xì)胞的惡性腫瘤，患者早期可無(wú)任何體征，中晚期常見(jiàn)上腹壓痛及腫塊，晚期患者會(huì)出現(xiàn)貧血、消瘦、營(yíng)養(yǎng)不良甚至惡病質(zhì)等表現(xiàn)[1-2]。由于胃癌的惡性程度較高，手術(shù)切除是根治早期胃癌的唯一方法[3]，該研究2012年6月―2014年8月臨床觀察96例在該院接受胃癌根治術(shù)的患者，旨在探討自體、異體輸血對(duì)患者炎性因子及免疫功能的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
整群抽選2012年6月―2014年8月就診于該院的早期胃癌患者96例，所有患者均經(jīng)臨床診斷及X線(xiàn)、腹部超聲、胃鏡等相關(guān)檢查確診，且自愿在該院接受根治術(shù)治療，排除伴有心、肝、腎其他嚴(yán)重疾病及免疫性疾病者，排除精神、意識(shí)障礙不能配合研究者，排除有放、化療和激素治療史患者，排除不簽署知情同意書(shū)者。且該研究經(jīng)該院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。上述96例患者按照隨機(jī)法將其分為自體組（n=48）和異體組（n=48），自體組中男30例，女18例，年齡34～68歲，平均（46.5±6.2）歲；體重53～79 kg，平均（66.3±5.4）kg；異體組中男29例，女19例，年齡35～67歲，平均（47.2±7.1）歲；體重52～79 kg，平均（68.4±5.1）kg，兩組患者在基線(xiàn)資料方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法
所有患者在該院接受根治性手術(shù)，術(shù)前明確腫瘤部位、大小，制定手術(shù)方案，上腹正中切口，探查清除后切除病胃、重建消化道，術(shù)畢。兩組患者麻醉、手術(shù)方式相同，異體組術(shù)中輸異體全血400～600 mL，自體組麻醉后術(shù)前經(jīng)橈動(dòng)脈放血400～600 mL，并靜脈輸入同等6%羥乙基淀粉（國(guó)藥準(zhǔn)字H2006436），術(shù)畢將自體血輸回。
1.3 觀察指標(biāo)
分別于術(shù)前、術(shù)后當(dāng)天及術(shù)后7 d取患者清晨靜脈血，檢測(cè)自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）、白介素-2（IL-2）及T淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD4+/CD8+）水平。
1.4 統(tǒng)計(jì)方法
采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析研究數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，行t檢驗(yàn)，P
2 結(jié)果
2.1 炎性因子
術(shù)后當(dāng)天兩組患者NK細(xì)胞、IL-2較術(shù)前顯著下降（P
表1 兩組患者手術(shù)前、后NK細(xì)胞及IL-2水平比較（x±s）
注：①與術(shù)前比較，P
2.2 疫功能指標(biāo)比較
術(shù)后當(dāng)天兩組T淋巴細(xì)胞亞群各指標(biāo)均顯著下降（P
3 討論
早期胃癌行根治性切除術(shù)是目前唯一治愈手段，術(shù)后5年生存率達(dá)80%以上[4]。但腫瘤患者圍術(shù)期輸血對(duì)其預(yù)后及5年生存率具有一定的消極影響[5]。由于血液是多種成分組成的混合物，可與機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生相互作用，誘發(fā)受血者免疫功能抑制，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤復(fù)發(fā)[6]。
有研究[7]顯示圍術(shù)期胃癌患者輸注異體紅細(xì)胞會(huì)影響其細(xì)胞免疫功能。IL-2具有免疫增強(qiáng)作用，參與B細(xì)胞激活、增殖，輸血后T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2減少，IL-2功能降低，B細(xì)胞激活和抗體產(chǎn)生減少、NK細(xì)胞功能不全，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能抑制。因此，臨床應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行輸血標(biāo)準(zhǔn)，減少不必要的輸血。該研究中異體輸血組術(shù)后當(dāng)天IL-2水平顯著下降，且明顯低于自體輸血組，術(shù)后7 d異體輸血組NK細(xì)胞水平也顯著低于自體輸血組。異體輸血對(duì)患者免疫功能影響較大。且自體組術(shù)后7 d T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)恢復(fù)到術(shù)前水平，而異體組CD3+（60.3±11.2）%、CD4+（30.4±6.2）%、CD4+/CD8+（0.88±0.25）顯著少于自體組。可見(jiàn)自體輸血1周后患者免疫功能漸漸恢復(fù)，而異體組則出現(xiàn)了較長(zhǎng)時(shí)間免疫功能抑制。
綜上，胃癌患者自體輸血較異體輸血對(duì)患者免疫功能影響小，值得推廣。
[參考文獻(xiàn)]
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