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關(guān)鍵詞：自主型學(xué)習(xí) 創(chuàng)新 主觀能動性
中圖分類號：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-3791（2012）10（a）-0192-01
1 問題的提出
進入21世紀(jì)，整個人類社會都在經(jīng)歷著由工業(yè)化社會向信息化社會的嶄新轉(zhuǎn)變，信息技術(shù)正以前所未有的速度融入到我們的學(xué)習(xí)和生活中。在新的信息化社會里，不能繼續(xù)自主學(xué)習(xí)，也不能跟著時代更新自己的知識和技能的人必將被新的信息時代所逐漸淘汰。目前在專業(yè)課的學(xué)習(xí)中，還是采用傳統(tǒng)的教學(xué)方法的情況比較常見，一塊黑板，一支粉筆，施行的還是“應(yīng)試教育”，以傳授、灌輸為特征，以功利性為價值取向，學(xué)生學(xué)習(xí)的重點放在了掌握知識量的多少上，衡量學(xué)生學(xué)習(xí)狀況的唯一依據(jù)為考試分?jǐn)?shù)的高低，課堂上學(xué)生被動的接受知識，教學(xué)內(nèi)容和方式比較死板。這種教學(xué)方法在單一進行知識傳授的情況下，卻忽視了學(xué)生更應(yīng)該掌握對知識獲取的過程和方法。專業(yè)課的學(xué)習(xí)不是單單要求學(xué)生掌握一門課程的內(nèi)容，還要求學(xué)生學(xué)會學(xué)習(xí)的方法，培養(yǎng)學(xué)生良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣，形成自主發(fā)展的學(xué)習(xí)策略，從而讓學(xué)生掌握、具備終生學(xué)習(xí)的能力，從學(xué)習(xí)方式、生活方式、觀念上、思想上給學(xué)生產(chǎn)生深刻的影響。因此，培養(yǎng)學(xué)生自主型學(xué)習(xí)能力、探究能力是大學(xué)專業(yè)課教育發(fā)展的必然趨勢。
2 自主型學(xué)習(xí)改革的內(nèi)容
在教學(xué)決策理論指導(dǎo)下，在保證教學(xué)內(nèi)容完整的前提下，構(gòu)建自主探究型教學(xué)模式的程序框架，改革教學(xué)方法，抓好課堂教學(xué)改革，進行自主型學(xué)習(xí)改革工程。
通過自主型學(xué)習(xí)方式的改變，力圖達(dá)到以下幾個轉(zhuǎn)變。
2.1 構(gòu)建學(xué)生自主學(xué)習(xí)的教學(xué)模式
將傳統(tǒng)的教師的演示工具同時也轉(zhuǎn)變?yōu)閷W(xué)生的學(xué)習(xí)工具。結(jié)合學(xué)?，F(xiàn)有的信息技術(shù)條件，根據(jù)學(xué)生實際情況和學(xué)科特點，將現(xiàn)代信息技術(shù)和學(xué)科教學(xué)有效的整合起來。鼓勵師生合作共同進行學(xué)習(xí)，創(chuàng)建師生間和諧的教學(xué)情景模式，教師由傳統(tǒng)概念的灌輸者轉(zhuǎn)變?yōu)閷W(xué)習(xí)的合作者、組織者和引導(dǎo)者。對學(xué)生的自主學(xué)習(xí)意識進行培養(yǎng)，采取多種教學(xué)模式，鼓勵學(xué)生積極主動參與自主型學(xué)習(xí)和探究性學(xué)習(xí)，給每個學(xué)生充分的能實現(xiàn)成功的機會。
2.2 改革學(xué)生的學(xué)習(xí)方式，培養(yǎng)自主性學(xué)習(xí)興趣
以往教學(xué)常常按部就班的以整個知識體系的邏輯關(guān)系進行授課，可以轉(zhuǎn)變?yōu)橐灾R的組團形式進行，充分發(fā)揮信息技術(shù)的優(yōu)勢，為學(xué)生創(chuàng)設(shè)適合發(fā)展自主型學(xué)習(xí)的信息化學(xué)習(xí)環(huán)境，培養(yǎng)學(xué)生的信息素養(yǎng)和主動學(xué)習(xí)能力，對教學(xué)內(nèi)容進行跳躍式教學(xué)。運用現(xiàn)代信息技術(shù)和網(wǎng)絡(luò)，交互式的形、聲、圖、文的特點和形式，由學(xué)生按照自己的學(xué)習(xí)興趣、學(xué)習(xí)能力、知識基礎(chǔ)和學(xué)習(xí)習(xí)慣進行學(xué)習(xí)的內(nèi)容和方式的選擇，能夠讓學(xué)生從內(nèi)在地由被動的學(xué)習(xí)地位，可以轉(zhuǎn)變?yōu)橹鲃有缘膶W(xué)習(xí)，變成學(xué)習(xí)的主人。培養(yǎng)學(xué)生自主學(xué)習(xí)興趣，探究在現(xiàn)代信息技術(shù)下最佳自主學(xué)習(xí)方法和最佳自主學(xué)習(xí)效果。
2.3 優(yōu)化自主學(xué)習(xí)方法，培養(yǎng)良好的自主學(xué)習(xí)習(xí)慣
充分利用現(xiàn)代信息技術(shù)的迅速發(fā)展，建立信息技術(shù)模式支持下的新型教學(xué)方式，改變傳統(tǒng)的教師與學(xué)生的互動方式，轉(zhuǎn)變?yōu)橐詫W(xué)生個體自主學(xué)習(xí)，師生之間，學(xué)生之間等多樣的活動方式。這樣既充分尊重了學(xué)生的主體地位，又能有效發(fā)揮教師的促進與主導(dǎo)作用。由于現(xiàn)代信息技術(shù)具備適合學(xué)生進行個別化學(xué)習(xí)的特點，可以給學(xué)生充分的個人時間和空間，可以讓學(xué)生發(fā)揮“主體作用”，發(fā)揮自己的主觀能動性，親自實踐，自主學(xué)習(xí)，積極思考，全面參與，是學(xué)生具備自己的自主學(xué)習(xí)個性和特色。同時對學(xué)生自主學(xué)習(xí)的新途徑進行優(yōu)化，培養(yǎng)學(xué)生良好的自主學(xué)習(xí)習(xí)慣和個性化自主學(xué)習(xí)能力，使學(xué)生掌握獨立自主學(xué)習(xí)和實踐的方法、規(guī)律、技巧。
2.4 改革組織形式及學(xué)習(xí)內(nèi)容，更新培養(yǎng)目標(biāo)
促進形成學(xué)生的認(rèn)知結(jié)構(gòu)，改變傳統(tǒng)的單一的課本知識的學(xué)習(xí)、高深學(xué)習(xí)，轉(zhuǎn)變?yōu)閭€人自主學(xué)習(xí)，小組學(xué)習(xí)，群體學(xué)習(xí)等多種形式，學(xué)習(xí)自己所需的，感興趣的學(xué)習(xí)內(nèi)容，拓展性的對自己有益的各種知識的選擇性自動性學(xué)習(xí)。在這里借助計算機輔助教學(xué)及CAI課件可進一步提高學(xué)生的自主學(xué)習(xí)能力。更新教師的教學(xué)教育觀念，傳統(tǒng)的教育方式以注重于知識的傳授為主，將目標(biāo)改變?yōu)榕囵B(yǎng)學(xué)生的能力，提高學(xué)生的素質(zhì)，完善學(xué)生的人格，實現(xiàn)學(xué)生的終身發(fā)展和可持續(xù)發(fā)展。
3 自主型學(xué)習(xí)改革的要求
3.1 給學(xué)生營造濃厚的自主探究氛圍
學(xué)習(xí)的主體是學(xué)生，并不是老師。自主學(xué)習(xí)和探究應(yīng)該是學(xué)生發(fā)自內(nèi)心的客觀需要。在教改項目的研究過程中，學(xué)校和老師盡可能的為學(xué)生營造濃厚的自主學(xué)習(xí)、自主探究的學(xué)習(xí)環(huán)境和氛圍，以達(dá)到喚起學(xué)生的主體自學(xué)意識，激起學(xué)生自主學(xué)習(xí)的需要的目的，使學(xué)生將自身的學(xué)習(xí)潛能充分的調(diào)動起來，進行自主探究學(xué)習(xí)。
3.2 加大專題理論學(xué)習(xí)的力度
（1）倡導(dǎo)自學(xué)。教師閱覽室和網(wǎng)絡(luò)資源全天候開放；教師可以根據(jù)自己的時間進行自主學(xué)習(xí)。
（2）組織進修。鼓勵條件允許的教師參加各級骨干教師培訓(xùn)、專業(yè)技術(shù)進修，以及學(xué)歷進修等。同時還組織教師進行網(wǎng)絡(luò)培訓(xùn)、教育科研網(wǎng)絡(luò)資源搜索、網(wǎng)絡(luò)沙龍等，交流經(jīng)驗，拓展教師理論學(xué)習(xí)的水平和空間。
（3）請進來，走出去。一是請教育專家來校講學(xué)，進行有針對性的指導(dǎo)。二是為了開闊教師視野，讓課題研究組的成員走出去，參加一些課題研究方面的活動。
3.3 把課堂作為課題研究的主陣地
素質(zhì)教育最終還是要落實在課堂上，還是要回歸到課堂。所以說課堂是培養(yǎng)人的主陣地。在課堂上，方法的運用是直接的教學(xué)認(rèn)知過程，根據(jù)學(xué)生心理和學(xué)習(xí)特點，教師要給與學(xué)生自主學(xué)習(xí)的方法指導(dǎo)。只要能夠激起學(xué)生學(xué)習(xí)的思考和興趣，能夠發(fā)揮主導(dǎo)作用，都是好方法。自主型學(xué)習(xí)改革這一教研課題研究最后也只有落實在課堂。這樣才符合教育和科研的要求，也才能真正符合教育規(guī)律，才能貼近學(xué)生本身。
3.4 及時總結(jié)，矯正完善方案
在課題研究的過程中，每個階段都要進行總結(jié)。如果總結(jié)得當(dāng)，不斷積累經(jīng)驗教訓(xùn)，將會減少走彎路，掃除障礙，為下一輪實驗和改革打好基礎(chǔ)。所以說課題研究中，總結(jié)是十分重要的一環(huán)?？偨Y(jié)的開展的形式主要有教研組例會、寫教學(xué)隨筆、撰寫相關(guān)教研論文等。
參考文獻(xiàn)
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[關(guān)鍵詞] 深低溫凍存；自體血小板輸注；惡性血液??；血小板減少癥；療效；安全性
[中圖分類號] R558.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2017）06-0089-03
[Abstract] Objective To investigate the effect of cryopreserved autologous platelets transfusion in the patients with hematological malignancy on the reduction of platelets after chemotherapy. Methods From November 2014 to November 2016， 80 patients with hematological malignancy complicated with thrombocytopenia undergoing chemotherapy in our hospital were selected. According to the different selection of platelet transfusion sources， 40 patients who underwent cryopreserved autologous platelets transfusion were assigned to the study group， and 40 patients who underwent subcutaneous injection of anti-human recombinant interleukin-11（rhIL-11） were assigned to the control group. The therapeutic effect and adverse reaction rate were compared between the two groups. Results In terms of the efficiency， the study group was 97.5% and the control group was 85.0%. In terms of adverse reaction rate， the study group was 2.5% and the control group was 17.5%， the study group was lower than the control group， and the difference was statistically significant （P0.05）， were both changed after the treatment， and the changes in the study group were significantly greater than those in the control group， the differences were statistically significant（P
[Key words] Cryopreservation； Autologous platelets transfusion； Hematological malignancy； Thrombocytopenia； Curative effect； Safety
血小板減少癥通常出現(xiàn)在惡性血液病患者化療后，是一種較嚴(yán)重的并發(fā)癥，可給患者帶來生命危險。對于此并發(fā)癥臨床主要通過輸注自體/異體血小板或注射rhIL-11來進行治療，其中異體血小板輸注有可能引發(fā)輸注無效、輸血傳播性疾病等不良反應(yīng)，因此現(xiàn)階段多使用自身血小板進行輸注[1]。本文選擇2014年11月～2016年11月收治的因化療導(dǎo)致血小板減少的80例惡性血液病患者，旨在探討深低溫凍存自體血小板輸注在其中的應(yīng)用效果。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇2014年11月～2016年11月我院采用化療方法治療惡性血液病并發(fā)生血小板減少癥的80例患者，按照選擇的不同血小板輸注來源分組：輸注經(jīng)過深低溫凍存的自體血小板的40例患者為研究組，皮下注射rhIL-11的40例患者為對照組。研究組：男28例，女12例；年齡最小21歲，最大79歲，平均（50.32±11.29）歲；疾病類型：白血病23例，血友病11例，單純性紫癜6例。對照組：男27例，女13例；年齡最小22歲，最大78歲，平均（50.43±11.31）歲；疾病類型：白血病24例，血友病12例，單純性紫癜4例。兩組患者的疾病類型、年齡、性別等基線資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
1.2 方法
1.2.1 研究組 行血常規(guī)、凝血功能檢查，使患者的血小板計數(shù)不低于120×109/L；行心圖與肝腎功能檢查，患者心、肝、腎等臟器功能正常。使用血細(xì)胞分離機，遵照血小板標(biāo)準(zhǔn)采集程序進行自體血小板采集。每個PVC采集袋中可放入300×109/L的采集量，若患者身體狀況允許，可多次采集或酌情增加采集量。在采集后的2 h，將其放入百級凈化間，以1 mL/min的速率加入DMSO生物冷凍保護劑，直至濃度為5%后停止，隨后水平放置在采集袋到冰箱中，恒溫-80℃保存[2]。在患者化療結(jié)束后予血小板檢查并觀察患者是否存在出血癥狀，若血小板計數(shù)不足15×109/L或存在出血癥狀，則可以將凍存過的自體血小板放入40℃的水浴箱中，待2～3 min后將充分融化的自體血小板放入濾除白細(xì)胞的輸血器中，在患者耐受范圍內(nèi)以最大速率回輸回患者體內(nèi)[3]。
1.2.2 對照組 化療結(jié)束后的3 d內(nèi)為患者皮下注射50 μg/kg的rhIL-11（齊魯制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字：S20030016；規(guī)格：1.2×10E7AU，1.5mg/支），每日1次，連續(xù)注射1～2周，此期間進行兩次血常規(guī)檢查，若血小板計數(shù)超過100×109/L，則證明治療有效。
1.3 觀察指標(biāo)
對比兩組患者治療前后血小板水平的變化、治療后出現(xiàn)的不良反應(yīng)及輸血有效率。有效率計算公式：血小板校正增加值（CCI）=（治療后血小板計數(shù)-治療前血小板計數(shù)）×體表面積/血小板總輸注量，若1 h內(nèi)的CCI高于7.5且24 h內(nèi)的CCI超過4.5，即為有效[4-5]。
1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
采用SPSS 17.0軟件進行分析，其中計數(shù)資料行χ2檢驗。計量資料以（x±s）表示，進行t檢驗。以P
2 結(jié)果
2.1 兩組患者治療前后血小板的變化情況
見表1，兩組患者的血小板計數(shù)治療前比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05），治療后的血小板計數(shù)分別較治療前顯著增加，且研究組的血小板計數(shù)顯著高于對照組（P
2.2兩組有效率和不良反應(yīng)率比較
見表2，研究組的有效率為97.5%，對照組的有效率為85.0%，研究組高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=3.914，P=0.048
3 討論
現(xiàn)階段，化療是治療白血病等惡性血液病的主要治療手段，但是化療中使用的細(xì)胞毒藥物則有可能引起骨髓抑制等毒副作用，使患者的血小板在化療后急劇減少，甚至低于人體的正常標(biāo)準(zhǔn)，而血小板低于正常標(biāo)準(zhǔn)將導(dǎo)致凝血功能出現(xiàn)障礙，皮膚黏膜、各臟器出現(xiàn)不同程度的出血，一些年齡較高的患者甚至可能因此發(fā)生顱內(nèi)出血，進而死亡[6-8]。因此，化療后予血小板輸注是治療血小板減少癥的主要手段。
血小板根據(jù)其采集來源可以分為自體與他體兩種，他體血小板來源緊張，且因人體具有排異性，若輸注量過大則可能引起輸注無效、血液傳播疾病等不良反應(yīng)[9-10]。因此，臨床多為患者使用自體血小板進行輸注，即在患者化療前為其機采血小板，隨后給予深低溫凍存，以保持血小板的活性，待化療后再行輸注回體內(nèi)。如此既可以有效解決血小板減少帶來的凝血功能障礙，緩解化療帶來的骨髓抑制反應(yīng)，活化血小板，預(yù)防出血問題的發(fā)生，還能避免輸注無效等不良反應(yīng)的發(fā)生，這些優(yōu)點于楊振宇、舒曠怡、郝魯梅等的研究中得到了肯定[11-13]。而在本文中，研究組患者的有效率達(dá)97.5%、總不良反應(yīng)率僅2.5%、且研究組的血小板計數(shù)顯著高于對照組（P
本研究中對照組使用rhIL-11，與王萍等[14]的研究采取了同樣的選擇，rhIL-11作為一種促血小板生成因子可以加快巨核細(xì)胞的分化和成熟速度，使血液中血小板計數(shù)明顯增加，但是從趙鈺等[15]研究報告中可以發(fā)現(xiàn)，雖然rhIL-11在一定程度上緩解了血小板減少的問題，但是并沒有從根本上改變凝血功能異常的問題，因此其療效是暫時的。本研究中的結(jié)果顯示，對照組在血小板計數(shù)、有效率及不良反應(yīng)率方面顯著低于研究組。
綜上所述，相較于皮下注射rhIL-11，在惡性血液病患者化療后為其輸注經(jīng)過深低溫凍存的自體血小板，可以有效改善患者的血小板減少癥，不僅療效顯著，且安全可靠。
[參考文獻(xiàn)]
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【關(guān)鍵詞】建筑工程；電氣自動化前言
中圖分類號：K826.16文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：
一， 前言
建筑行業(yè)是我國重要的經(jīng)濟增長行業(yè)之一，對國民經(jīng)濟的發(fā)展和人們生活水平的提高有著密切的關(guān)系。伴隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和經(jīng)濟文化的交流，人們的生活水平和生活質(zhì)量有了巨大的提升，對建筑工程的設(shè)計施工以及管理都提出了更為嚴(yán)格的要求，傳統(tǒng)的實用和簡單的具有外部的藝術(shù)美感已經(jīng)難以滿足人們?nèi)找娑嘣男枨?，加強對建筑行業(yè)的電氣自動化研究，對建筑行業(yè)設(shè)計施工中，配備先進的現(xiàn)代化電氣設(shè)備，實施建筑工程項目的電氣自動化，這是現(xiàn)代化建筑設(shè)計施工和滿足人們?nèi)找娑嘧兊慕?jīng)濟文化需要的客觀要求。經(jīng)過實踐證明，建筑工程的電氣自動化，不僅僅關(guān)系到整個項目工程的施工進度，更是建筑工程行業(yè)實施質(zhì)量競爭的核心和關(guān)鍵。在現(xiàn)代化的建筑工程設(shè)計施工中，實施電氣自動化，提高自動化水平，是我國建筑行業(yè)的發(fā)展要求。
二．我國建筑行業(yè)電氣自動化現(xiàn)狀和存在的問題
1.我國建筑行業(yè)電氣自動化現(xiàn)狀
在我國的建筑行業(yè)，通過多年不斷的發(fā)展和研究，電氣的自動化已經(jīng)初具規(guī)模，電氣自動化程度日漸加深，電氣自動化水平逐漸提高，電氣自動化在我國建筑行業(yè)的應(yīng)用和發(fā)展，為我國的建筑行業(yè)的繁榮作出了重要貢獻(xiàn)，但是從我國的整體工程建筑電氣自動化水平來看，依舊存在著很多問題，新設(shè)備新技術(shù)應(yīng)用緩慢，電氣自動化的設(shè)計施工不夠科學(xué)，管理不夠完善等一系列問題，使得我國在電氣自動化進程中，無論是電氣自動化水平還是電氣自動化程度，都遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后于西方發(fā)達(dá)國家，使得我國的建筑行業(yè)相對于西方發(fā)達(dá)國家而言，無論是在電氣的設(shè)計施工上，還是電氣自動化的安全穩(wěn)定上，都缺乏很強的競爭力，新時期下，正確理性面對我國建筑電氣自動化的現(xiàn)狀，找出存在的缺陷，加大對電氣自動化的研究，提高我國建筑行業(yè)的電氣自動化水平，是我國現(xiàn)代化發(fā)展的客觀要求和必然選擇。
2.我國建筑行業(yè)電氣自動化存在的問題
（一）電氣自動化高端人才不足，電氣自動化缺乏核心支撐
我國目前的建筑行業(yè)整體規(guī)模相對小，資金積累不夠，難以留住高端的優(yōu)秀管人才，企業(yè)的積累缺乏，使得整個建筑行業(yè)中電氣自動化設(shè)計施工的高層核心技術(shù)人員缺失，使得整個建筑行業(yè)電氣自動化缺乏活力和技術(shù)保證。
（二）新技術(shù)新設(shè)備應(yīng)用緩慢，核心競爭力不足
我國的建筑行業(yè)在電氣自動化上有了一定的發(fā)展，但是缺乏鉆研突破的研究技術(shù)精神，缺乏對核心技術(shù)的研究，自動化設(shè)備多采用進口和引進，且應(yīng)用的速度緩慢，難以形成自己企業(yè)的核心專利，難以保持自動化的核心競爭力。自動化市場尚不完善，不夠健全，惡性競爭，市場規(guī)范不嚴(yán)格，且產(chǎn)品品牌單調(diào)，品牌知名度不高，難以和國際知名自動化品牌競爭
（三）建筑行業(yè)對電氣自動化的管理不善，電氣自動化的質(zhì)量難以保證
建筑行業(yè)發(fā)展迅速，很多管理者多想盡一切手段來提高建筑工程的效益，為了大幅度降低成本，使用假冒偽劣的電氣設(shè)備和電氣產(chǎn)品，設(shè)計部符合國家標(biāo)準(zhǔn)的施工安裝方式，使用質(zhì)量難以達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的材料等一系列問題，使得整個電氣自動化的設(shè)計施工中，質(zhì)量難以得到保證，同時，很多施工的企業(yè)由于企業(yè)的自身實力有限，缺乏一定的電氣自動化的監(jiān)測設(shè)備和監(jiān)控設(shè)施，在施工和對整個電氣化管理中，難以全面，難以科學(xué)精細(xì)，這些方面都嚴(yán)重影響到整個電氣自動化的水平和質(zhì)量。
三，我國建筑電氣自動化的重要意義
1． 這是保證工程建設(shè)質(zhì)量和進度的客觀要求
實施電氣自動化，加強對先進技術(shù)和設(shè)備的應(yīng)用速度，采用科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑O(shè)計方式和施工程序，加強對電氣自動化的管理，加強對各種電氣設(shè)備，電氣材料的管理監(jiān)督，保證了整個工程建筑的工程質(zhì)量，同時，可以大幅度降低工程成本，并合理的控制工程的進度，電氣自動化的水平提高，亦有助于保證整個工程建筑中的安全。
2． 實施建筑電氣自動化，有助于整個建筑市場的規(guī)范化
電氣自動化的進程加快，對整個電氣行業(yè)的技術(shù)人員和管理人員都提出了更高的要求，不僅僅要求有豐富的管理經(jīng)驗，更需要有精湛的電氣技術(shù)和較高的工作素養(yǎng)，同時，電氣自動化很大程度上減少了工程中的暗箱操作等弊端，敦促著工作人員依法辦事，嚴(yán)格執(zhí)行相關(guān)的規(guī)章制度，有助于促進整個建筑市場的規(guī)范化管理。
四．我國建筑行業(yè)電氣自動化的發(fā)展趨勢探究
1. 電氣自動化將會朝著智能化方向發(fā)展。
縱觀我國目前的建筑工程發(fā)展行情，電氣自動化的發(fā)展應(yīng)用，智能化是其核心部分，所謂智能化表現(xiàn)在其具有多種新功能。在在建筑行業(yè)控制方面，有關(guān)的現(xiàn)場儀表在一起，在現(xiàn)場實現(xiàn)自主調(diào)節(jié)，從而實現(xiàn)控制的徹底分散使調(diào)節(jié)要加及時，并提高了整個系統(tǒng)的可靠性。
2. 電氣自動化的操控更為精確，更加精工。
建筑行業(yè)中競爭越發(fā)激烈，對工程產(chǎn)品質(zhì)量的要求越來越嚴(yán)格，實施電氣自動化，先進技術(shù)的采用，科學(xué)管理方式的實施，整個建筑工程的自動化水平不斷升高，使得施工標(biāo)準(zhǔn)更為嚴(yán)格，產(chǎn)品的精度朝著更高的方向發(fā)展，因此，自動化在建筑工程中會有著更嚴(yán)密精確的要求。
3.無線技術(shù)是電氣自動化操作更簡便準(zhǔn)確。
在現(xiàn)代的建筑行業(yè)，電氣自動化能夠?qū)崿F(xiàn)非接觸傳輸，特別適用于惡劣環(huán)境或振動、高速旋轉(zhuǎn)對象的監(jiān)控，而且降低了安裝成本、持續(xù)降低運行維護成本，同時更換方便，便于升級。還能夠減少接插件故障，移動自由且不受限制，建筑行業(yè)電氣自動化是工廠測控模式的變革，將會有力的推進我國建筑行業(yè)電氣自動化進程。
五，我國建筑行業(yè)電氣自動化的發(fā)展建議
1.政府加強對建筑工程電氣自動化實施的引導(dǎo)和扶持
建筑工程電氣自動化企業(yè)關(guān)系到國民經(jīng)濟的發(fā)展和人們生活水平的提高，政府加大對建筑行業(yè)電氣自動化的支持引導(dǎo)，政府部門要引導(dǎo)自動化企業(yè)轉(zhuǎn)變觀念、穩(wěn)定心態(tài)，提高產(chǎn)品質(zhì)量以及服務(wù)質(zhì)量，引導(dǎo)優(yōu)秀的國產(chǎn)品牌進入重要領(lǐng)域，為民族企業(yè)的發(fā)展提供空間。
2.建筑行業(yè)加大對電氣自動化核心技術(shù)的研究，加大投入力度。
建筑行業(yè)要加強對各種電氣設(shè)備和電氣設(shè)計施工技術(shù)的研究探討，加強各個建筑單位之間的通力合作，不斷加大對新技術(shù)新設(shè)備和心的管理理念的引進和運用，加大投入，實現(xiàn)各種電氣自動化核心技術(shù)的突破，使得建筑行業(yè)實現(xiàn)整個設(shè)計施工方式的轉(zhuǎn)變，提高整體的核心競爭力。
六．結(jié)束語
建筑行業(yè)關(guān)系到國計民生，實現(xiàn)建筑行業(yè)的電氣自動化，加大對各種電氣自動化技術(shù)的研究，不斷實現(xiàn)各種技術(shù)和管理方法的突破，是提高人們生活水平和生活質(zhì)量，促進整個建筑行業(yè)快速健康發(fā)展的客觀要求，必須得到各方面的支持和重視，以建筑行業(yè)的電氣自動化，帶動整個社會的自動化進程，這是促進我國整個社會自動化的有效方式之一。
參考文獻(xiàn)：
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關(guān)鍵詞：建筑工程 電氣自動化前言
我國根據(jù)自身實際情況，加緊提升建筑工程行業(yè)的電氣自動化水平已經(jīng)成為了當(dāng)務(wù)之急，這對于我國在國際上提升競爭力有著極其重要的做用。本篇文章主要是針對現(xiàn)代社會的電氣自動化現(xiàn)狀，并找出了其中所出現(xiàn)的問題，深入的探究了電氣自動化不斷發(fā)展的意義所在，并且提出了相應(yīng)的建議，以期對其他工程在進行電氣自動化應(yīng)用過程中提供參考。
一、我國建筑行業(yè)電氣自動化現(xiàn)狀和存在的問題
1.我國建筑行業(yè)電氣自動化現(xiàn)狀
由于我國人口眾多，建筑行業(yè)已經(jīng)成為了我國經(jīng)濟增長的主要支撐之一，其建筑的發(fā)展對于社會經(jīng)濟發(fā)展和人們生活水平的發(fā)展有著緊密的聯(lián)系。隨著科技技術(shù)的發(fā)展，我國的經(jīng)濟和文化交流都進入了一個新的階段，人民的生活水平以及生活的質(zhì)量也有了較大的提升，并且不斷對建筑工程的設(shè)計、質(zhì)量以及管理都提出了更為嚴(yán)格的要求，從而使得社會不斷加強對建筑行業(yè)中的電氣自動化的研究力度，只有建筑水平和施工工藝得到了發(fā)展，人們才會提高對電氣工程的滿意度，從而提高建筑電氣化工程的質(zhì)量和自動化的水平，是我國建筑行業(yè)迫在眉睫的發(fā)展路線。
只有企業(yè)通過不斷的研發(fā)，才能使得電氣自動化的腳步不會停滯，也不會使得電氣自動化技術(shù)與國際建筑自動化技術(shù)脫軌，極大的促進電氣自動化在我國的貴廣速度和發(fā)展應(yīng)用，電氣自動化技術(shù)已經(jīng)為我國的建筑行業(yè)發(fā)展做出了巨大的貢獻(xiàn)，但是通過我國目前整體自動化水平來看，我國還在存在著較多的問題，例如電氣自動化化設(shè)計不夠嚴(yán)謹(jǐn)、合理，生產(chǎn)管理不完善等問題。我國的電氣自動化技術(shù)，無論是在電氣自動化程序或者電氣自動化水平上都遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于國際發(fā)達(dá)國家的發(fā)展程度，這就使得我國各個方面都沒有很強的競爭力，新時期、新經(jīng)濟下，我國應(yīng)該如正確而理性的對待我國的電氣自動化水狀態(tài)，去找出電氣自動化中的缺陷，加強對電氣自動化的研究力度，最大限度的提升我國電氣自動化水平，這是我國在現(xiàn)代化發(fā)展過程中所必須要面臨的抉擇和態(tài)度要求[1]。
2.我國建筑行業(yè)電氣自動化存在的問題
（一）電氣自動化高端人才不足，電氣自動化缺乏核心支撐
目前我國各個建筑行業(yè)的規(guī)模都偏小，相對來說沒有國際跨國建筑企業(yè)公司的強大實際，其自身的經(jīng)濟能力也不足，難以留下更多的高端管理人才，企業(yè)在整體上缺少建筑建設(shè)經(jīng)驗，最終導(dǎo)致了建筑行業(yè)中的電氣自動化設(shè)計核心人員不斷的離開，繞整個建筑企業(yè)內(nèi)部的電氣自動化水準(zhǔn)不斷的降低，缺少技術(shù)創(chuàng)新[2]。
（二）新技術(shù)新設(shè)備應(yīng)用緩慢，核心競爭力不足
雖然我國的一些建筑行業(yè)在電氣自動化的發(fā)展過程中，取得了一定的進步，但是由于缺少專研的和突破的研究技術(shù)的精神，沒有掌握相關(guān)的核心技術(shù)，各種電氣自動化設(shè)備幾乎完全靠國外進口，并且推廣的速度極為緩慢，這就導(dǎo)致了我國的企業(yè)難以擁有核心的專利，更難以保證自身電氣自動化設(shè)備在國際上的競爭力，這也使得使得目前市場上的各種自動化產(chǎn)品信息不完善，沒有一個健全的體系，市場出現(xiàn)惡意的產(chǎn)品競爭或者說整個市場的建設(shè)不規(guī)范，自由的產(chǎn)品系列較為單調(diào)，品牌在整體上沒有擁有知名度，極難與國際上知名的電氣自動化設(shè)備制造企業(yè)相媲美。
（三）建筑行業(yè)對電氣自動化的管理不善，電氣自動化的質(zhì)量難以保證
雖然我國目前建筑行業(yè)發(fā)展極為迅速，但是，許多企業(yè)的管理者為了追求更高的利益，相近一切辦法來壓榨電氣自動化設(shè)備的制造成本，是用劣質(zhì)的物料投入到生產(chǎn)指導(dǎo)當(dāng)中去，從而使得設(shè)計制造的產(chǎn)品不符合過程的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或者不符合相關(guān)的施工安裝措施，其設(shè)施的使用質(zhì)量難以得到保障。使得整個電氣自動化的設(shè)計生產(chǎn)行業(yè)的產(chǎn)品，質(zhì)量難以得到保證。
二、我國建筑電氣自動化的重要意義
1. 這是保證工程建設(shè)質(zhì)量和進度的客觀要求
實施電氣自動化，加強對先進技術(shù)和設(shè)備的應(yīng)用速度，采用科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑O(shè)計方式和施工程序，加強對電氣自動化的管理，加強對各種電氣設(shè)備，電氣材料的管理監(jiān)督，保證了整個工程建筑的工程質(zhì)量，同時，可以大幅度降低工程成本，并合理的控制工程的進度，電氣自動化的水平提高，亦有助于保證整個工程建筑中的安全。
2. 實施建筑電氣自動化，有助于整個建筑市場的規(guī)范化
電氣自動化的進程加快，對整個電氣行業(yè)的技術(shù)人員和管理人員都提出了更高的要求，不僅僅要求有豐富的管理經(jīng)驗，更需要有精湛的電氣技術(shù)和較高的工作素養(yǎng)，同時，電氣自動化很大程度上減少了工程中的暗箱操作等弊端，敦促著工作人員依法辦事，嚴(yán)格執(zhí)行相關(guān)的規(guī)章制度，有助于促進整個建筑市場的規(guī)范化管理。
三、我國建筑行業(yè)電氣自動化的發(fā)展趨勢探究和發(fā)展建議
1. 電氣自動化將會朝著智能化方向發(fā)展。
縱觀我國目前的建筑工程發(fā)展行情，電氣自動化的發(fā)展應(yīng)用，智能化是其核心部分，所謂智能化表現(xiàn)在其具有多種新功能。在在建筑行業(yè)控制方面，有關(guān)的現(xiàn)場儀表在一起，在現(xiàn)場實現(xiàn)自主調(diào)節(jié)，提高了整個系統(tǒng)的可靠性。
2. 電氣自動化的操控更為精確，更加精工。
建筑行業(yè)中競爭越發(fā)激烈，對工程產(chǎn)品質(zhì)量的要求越來越嚴(yán)格，實施電氣自動化，先進技術(shù)的采用，科學(xué)管理方式的實施，整個建筑工程的自動化水平不斷升高，使得施工標(biāo)準(zhǔn)更為嚴(yán)格，產(chǎn)品的精度朝著更高的方向發(fā)展，因此，自動化在建筑工程中會有著更嚴(yán)密精確的要求。
3.政府加強對建筑工程電氣自動化實施的引導(dǎo)和扶持
建筑工程電氣自動化企業(yè)關(guān)系到國民經(jīng)濟的發(fā)展和人們生活水平的提高，政府加大對建筑行業(yè)電氣自動化的支持引導(dǎo)，建筑行業(yè)要加強對各種電氣設(shè)備和電氣設(shè)計施工技術(shù)的研究探討，加強各個建筑單位之間的通力合作，不斷加大對新技術(shù)新設(shè)備和心的管理理念的引進和運用，加大投入，實現(xiàn)各種電氣自動化核心技術(shù)的突破，使得建筑行業(yè)實現(xiàn)整個設(shè)計施工方式的轉(zhuǎn)變，提高整體的核心競爭力。
四、結(jié)束語
綜上所述，建筑行業(yè)不僅僅關(guān)系到經(jīng)濟的發(fā)展，還關(guān)系到我國居民生活環(huán)境的舒適性，只有不斷的加強建筑的現(xiàn)代電氣自動化進程，提高對于建筑電氣自動化的研究力度，從各個方面的突破現(xiàn)有的束縛，是人民生活水平能否提高以及各個建筑行業(yè)電氣自動化水平能否更好發(fā)展的前提條件，因此必須要受到社會各界的支持和關(guān)注，促進建筑電氣自動化的發(fā)展，帶到全社會的經(jīng)濟進步的步伐，這是關(guān)系到我國社會經(jīng)濟發(fā)展的問題。
參考文獻(xiàn)
【關(guān)鍵詞】建筑；自動化；項目；創(chuàng)新性；策略；分析
在如今這個時代背景下，各個行業(yè)在進行銷售與生產(chǎn)中都要應(yīng)用到比較先進的材料與技術(shù)，也只有這樣才能做到與時俱進，來加強相關(guān)企業(yè)的核心競爭力。而在整個項目的實施過程中使用的先進材料與技術(shù)，充分保證了建筑質(zhì)量，也降低了實際工程造價成本。隨著相關(guān)建筑行業(yè)的不斷發(fā)展，相應(yīng)建筑行業(yè)要不斷找尋創(chuàng)新性途徑，也只有這樣才會有較好的效果。而本文就針對建筑施工中自動化創(chuàng)新技術(shù)做了簡要分析。
一、建筑自動化施工概念
建筑自動化的相關(guān)施工主要是通過集散式的管理體系與計算機控制體系所進行的全面控制，并監(jiān)測實際管理的內(nèi)部性措施，對這些實際情況進行及時掌握，并做出相應(yīng)的自動優(yōu)化的實質(zhì)管理和自動設(shè)備的調(diào)節(jié)，最終達(dá)到預(yù)先設(shè)定的濕度、溫度、壓力以及流量等要求，從而進行系統(tǒng)管理的智能化與經(jīng)濟性的智能化。
二、建筑項目中自動施工技術(shù)應(yīng)用
（一）建筑施工中自動化信息數(shù)字技術(shù)
隨著計算機行業(yè)的飛速發(fā)展，數(shù)字化技術(shù)在相應(yīng)的建筑項目中有了更加廣泛的應(yīng)用。對建筑信息自動化的建筑與管理，是相關(guān)信息技術(shù)在建筑施工中的實際應(yīng)用。其管理主要包括有設(shè)備、部門以及實際的工程質(zhì)量等多方面信息方面。對這些信息進行科學(xué)合理的分析，提高了相應(yīng)的管理水平，同時也對相應(yīng)的信息進行了合理的分析。信息化技術(shù)就是要相應(yīng)的部門進行收集、傳遞以及加工的實際工序，只有這樣才能為實際管理部門提供依據(jù)。
在相關(guān)建筑項目的所有產(chǎn)品中要有比較正常的使用功能，同時還要應(yīng)用一定的民族特點與文化特色。在整個建筑施工建設(shè)中進行所有工期的規(guī)劃，將相應(yīng)的信息數(shù)字技術(shù)進行合理的加入就可以繪制成相應(yīng)的繪制圖。除此之外，相應(yīng)的信息數(shù)字化技術(shù)減少了一些主觀性誤差以及人工成本，讓其做到了基本無誤差，從而充分的保證了相關(guān)建筑項目的美觀與質(zhì)量。
（二）建筑自動化中新興技術(shù)的應(yīng)用
隨著資源短缺等問題的不斷出現(xiàn)，相應(yīng)的節(jié)能問題已經(jīng)是全世界共同責(zé)任。對中國來說，是一個發(fā)展中大國，其資源與能源的問題變的更加嚴(yán)重，因此我國的相關(guān)政府就可以積極號召各個行業(yè)實行節(jié)能環(huán)?；顒樱谙嚓P(guān)的建筑行業(yè)中其實際能耗比較大，因此，就要采用節(jié)能性材料與技術(shù)。在充分保證相應(yīng)的質(zhì)量與技術(shù)的基本上，來做到合理的環(huán)保問題，這直接決定了建筑的好壞。然而隨著技術(shù)的不斷進步一些新式材料與技術(shù)也在不斷出現(xiàn)，已經(jīng)被廣泛的應(yīng)用到了實際建筑中，在新型的建筑材料中其有著很輕的質(zhì)量與較高耐高溫性，并且實際能耗也比較低，因此，能夠取得一定的社會效益與經(jīng)濟效益。
比如：在如今的建筑行業(yè)中，大多數(shù)采用的是無機性材料與有機材料進行的結(jié)合，形成復(fù)合性保溫墻，在門窗上大多數(shù)采用的是塑鋼性材料，在屋內(nèi)多為保溫隔熱面，在地面還設(shè)置了相應(yīng)的采暖系統(tǒng)，其都有較好的實際效果。
三、建筑施工自動化所進行創(chuàng)新設(shè)計方法
（一）對自動化技術(shù)的強化
人的主觀性意識直接影響到實際行為，因此，在意識上真正意識到建筑新技術(shù)的相關(guān)重要性，才會在相應(yīng)的實踐中積累到經(jīng)驗，最終達(dá)到創(chuàng)新的效果。其相應(yīng)的的發(fā)展技術(shù)與應(yīng)用技術(shù)都比較落后，因此，最重要的就是要在新技術(shù)創(chuàng)新的條件下不斷擴大生產(chǎn)力。創(chuàng)新性施工不僅可以加強基礎(chǔ)性管理與建設(shè)，同時也積極促進了在相關(guān)建筑施工中多個技術(shù)環(huán)節(jié)的目標(biāo)確定，并積極利用創(chuàng)新性科學(xué)與自動化技術(shù)的改造，要充分發(fā)揮技術(shù)的創(chuàng)新性。
（二）建筑施工自動化技術(shù)新應(yīng)用
如今，是一個信息高度融合的時代，同時我國的實際經(jīng)濟也在不斷進行著發(fā)展，因此來說，中國也是一個以科技知識為主要引導(dǎo)的經(jīng)濟時代。在我國的經(jīng)濟發(fā)展中如果脫離了這個主題就會被激烈的市場競爭淘汰。因此，在相關(guān)的建筑行業(yè)中我們就要充分做到施工技術(shù)的創(chuàng)新。只有建筑施工積極實現(xiàn)自動化使用技術(shù)，才能不斷實現(xiàn)施工創(chuàng)新的未來發(fā)展。
（三）對技術(shù)創(chuàng)新的加強
在各行業(yè)的發(fā)展中，競爭是主要發(fā)展的有效動力。有效的競爭可以積極的促進不同行業(yè)的快速進步。對相關(guān)的建筑行業(yè)來說，只有不斷的提高自己才能在激烈的市場競爭中永遠(yuǎn)立于不敗之地。因此，只有不斷自動化技術(shù)的創(chuàng)新才能維持建筑行業(yè)的快速發(fā)展。在相關(guān)自動化引入到鼓勵創(chuàng)新與激勵機制中，引進高素質(zhì)的管理人才，同時相應(yīng)的施工人員需要進行行業(yè)內(nèi)外的技術(shù)性成果，在具體實踐中學(xué)習(xí)經(jīng)驗，并將自動化的施工技術(shù)進行完美施工，只有在這種情況下，才會讓相關(guān)的建筑施工獲得更多的經(jīng)濟效益與社會效益。
結(jié)語
總而言之，隨著經(jīng)濟社會的飛速發(fā)展以及相關(guān)建筑項目的不斷擴大，相應(yīng)的管理也在不斷的增加。隨著市場經(jīng)濟的日益激烈，相關(guān)企業(yè)只有不斷對建筑自動化技術(shù)進行創(chuàng)新與應(yīng)用，才會在這個激烈的市場競爭中利于不利之地，從而獲得更好的經(jīng)濟效益。而在整個項目的實施過程中其使用的先進材料與技術(shù)，在保證了建筑質(zhì)量的前提下也降低了實際工程造價成本。而隨著相關(guān)建筑行業(yè)的不斷發(fā)展，相應(yīng)建筑行業(yè)要不斷找尋創(chuàng)新性途徑，也只有這樣才會成功。因此本文就針對建筑自動化項目施工中的創(chuàng)新性策略做了簡要分析，希望通過本文研究可以給相關(guān)人員提供價值參考。
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【摘要】 本研究應(yīng)用改進的甲基化特異性PCR（MSP）法，即巢式甲基化特異性PCR法檢測6種腫瘤細(xì)胞株p16基因啟動子的甲基化狀態(tài)效率，探討其在篩選p16基因啟動子高甲基化的腫瘤細(xì)胞株，及將其作為研究基因甲基化與表達(dá)關(guān)系的理想細(xì)胞模型中的應(yīng)用。6種腫瘤細(xì)胞株基因組DNA經(jīng)堿變性后以亞硫酸鹽修飾，再用巢式甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)擴增，分析檢測其p16啟動子區(qū)CpG島的甲基化狀態(tài)。結(jié)果表明： CA46、U266都有不同程度的p16基因啟動子區(qū)甲基化，而Molt4、 K562、HL-60、Jurkat的p16基因啟動子區(qū)均未甲基化。結(jié)論： 用巢式甲基化特異性PCR可以準(zhǔn)確的檢測出惡性血液病細(xì)胞株p16基因的甲基化狀態(tài)，方法簡單，靈敏且重復(fù)性強，可以廣泛用于篩選各種p16基因啟動子區(qū)甲基化的惡性血液病細(xì)胞株以及惡性血液病診斷。
【關(guān)鍵詞】 巢式甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)
Detection of Promoter Methylation of p16 Gene in Hematological Malignant Cell Lines by Nested Methylation Specific Polymerase Chain Reaction
Abstract This study was aimed to investigate the effeciency of modified methylation-specific polymerase chain reaction i.e.nested methylation-specific polymrase chain reaction，used to detect the promoter methylation of p16 gene in six hematological malignant cell lines，and to explore the application in selection of hematological malignant cell lines with promoter hypermethylation，and make them to be an idel cell models for studying the relationship between gene methylation and expression. DNAs were denatured by NaOH and then were subjected to bisulfite modification and a nested-MSP was used to amplify the promoter region，nested MSP product of p16 gene promoter was analyzed and sequenced.The results showed that the hypermethylation of p16 gene was detected in CA46 and U266，however，Molt4，K562，HL-60 and Jurkat cell lines were unmethylated. In conclusion，p16 gene methylation in hematological malignant cell lines can be perfectly detected by nested-MSP method，which is simple，sensitive and specific for screening all kinds of hematological malignant cell lines with p16 gene methylated.
Key words nested methylation specific polymerase chain reaction; hematological malignant cell line; p16 gene; gene methylation
目前分析DNA甲基化最常用的方法是甲基化特異性PCR（MSP），在此基礎(chǔ)上產(chǎn)生改進的巢式甲基化特異性PCR（nMSP）具有更高的靈敏度和特異性，逐漸被應(yīng)用于甲基化啟動子的分析和檢測中，MSP法可以檢測出1/1000的甲基化等位基因片段，而nMSP法靈敏度又是MSP法的50倍，因此可以檢測出1/50 000的甲基化等位基因片段［1］，適合用于篩選p16基因啟動子區(qū)甲基化的腫瘤細(xì)胞株。本研究主要探索應(yīng)用巢式MSP檢測6種惡性血液病細(xì)胞株p16基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)，從而篩選出可以用于甲基化與表達(dá)之間關(guān)系研究的理想細(xì)胞模型。
材料和方法
材料
細(xì)胞系
所用7株腫瘤細(xì)胞株為本所凍存的細(xì)胞株，分別是Molt4、HL-60、K562、Jurkat淋巴瘤、CA46、Hep-G2、U266。
主要試劑
RPMI 1640培養(yǎng)液購自Gibco公司，胎牛血清為杭州四季青產(chǎn)品，蛋白酶K為Amerco公司產(chǎn)品，Taq酶為TaKaRa公司生產(chǎn)。DNA純化試劑盒（Wizard DNA Clean-Up System）購自Promega公司。
主要儀器
CO2培養(yǎng)箱（WJ-3D），凝膠成像分析掃描儀（Gel Doc 1000型，BIO-Rad），PCR熱循環(huán)儀為PE公司產(chǎn)品，型號為2400，UV2100 紫外分光光度儀購自日本Shimadzu公司。
PCR引物
由上海生物工程公司合成，序列見表1。Table 1.Primers of methylation-specific PCR of p16 gene （略）
方法
細(xì)胞培養(yǎng)
7種細(xì)胞分別放置在含10％胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)液中，37℃、5％ CO2、飽和濕度條件下培養(yǎng)，保持實驗使用細(xì)胞處于對數(shù)生長期。
腫瘤細(xì)胞基因組DNA的提取
采用酚－氯仿抽提法提取。
基因組DNA的亞硫酸鹽修飾
參考Herman等［2］的方法，取1-2 μg DNA，加超純水至50 μl。加3 mol/L的 NaOH 5.5 μl，37℃放置10分鐘。向堿變性的DNA中加入新配制的30 μl 10 mmol/L的氫醌和520 μl 3 mol/L亞硫酸氫鈉，以礦物油2滴覆蓋液面，50℃放置16到18小時。再用Wizard DNA Clean-Up System 純化，純化后的DNA加5.5
μl 3 mol/L的NaOH，室溫放置15分鐘，最后加33
μl 10 mol/L NH4AC(pH 7.0)，用預(yù)冷的乙醇沉淀DNA，并以30 μl超純水溶解，-20℃儲存?zhèn)溆谩?/p>
巢式甲基化特異性PCR擴增
參考文獻(xiàn)報道的方法進行［1］。 第1輪巢式MSP反應(yīng)擴增1段p16基因啟動子區(qū)富含CG的序列，片段長度為280 bp，p16F1和p16F2這對引物只識別亞硫酸鹽修飾后的模板，而不能區(qū)分甲基化和非甲基化的等位基因。將第1輪PCR產(chǎn)物稀釋30倍，取2 μl作為第2輪巢式MSP反應(yīng)的模板，第2輪巢式PCR使用的引物分別是是甲基化（p16M1，p16M2）和非甲基化(p16U1，p16U2)特異性引物，第1輪和第2輪巢式PCR的引物序列見表1。兩輪巢式PCR反應(yīng)的體系均為25
μl，其中10×Buffer（Tris-HCl 100 mmol/L，KCl 500 mmol/L，MgCl2 15 mmol/L） 2.5 μl，dNTP 2.5 mmol/L，各引物300 ng，Taq DNA聚合酶0.6 U，模板DNA 50 ng。PCR擴增在Gene Amp 2400 PCR System 上進行，反應(yīng)步驟如下： 95℃預(yù)變性10分鐘，然后95℃變性30秒，60℃退火30秒，72℃延伸30秒，共40個循環(huán)，最后，72℃再延伸10分鐘。第2輪巢式MSP分別使用非甲基化引物p16U1、p16U2和甲基化引物p16M1、p16M2進行擴增，除引物外反應(yīng)體系其它部分與第1輪相同，反應(yīng)條件與第1輪不同的是非甲基化引物退火溫度為62℃，甲基化引物退火溫度為67℃。同時，以正常人外周血淋巴細(xì)胞DNA為陰性對照，水作空白對照，p16基因高度甲基化的Hep-G2作為陽性對照。最后取8 μl PCR產(chǎn)物在2％的瓊脂糖凝膠上電泳，在Gel Doc 1000型凝膠圖像分析儀上觀察并照相。
PCR產(chǎn)物的序列分析
第2輪巢式MSP甲基化和非甲基化引物擴增出的隨機產(chǎn)物挑選2個由上海博亞生物技術(shù)有限公司克隆后進行序列分析。
結(jié)果
MSP擴增的結(jié)果
第1輪巢式甲基化特異性PCR用p16F擴增得280 bp富含CpG島的p16基因啟動子區(qū)片段，在所有標(biāo)本均可擴增出相應(yīng)片段。第2輪巢式甲基化特異性PCR以p16M或p16U為特異性引物，以第1輪巢式MSP產(chǎn)物為模板，各腫瘤細(xì)胞株擴增結(jié)果有3種：一種是只有p16M擴增出相應(yīng)片段，它是U266；另一種是p16M和p16U都擴增出相應(yīng)片段，它是CA46;再一種情況是p16M無擴增而p16U有擴增，它們是K562、molt4、HL-60、Jurkat淋巴瘤。MSP擴增結(jié)果見圖1。
根據(jù)MSP引物設(shè)計，以上用p16M和p16U都擴增出目的片段的腫瘤細(xì)胞，其p16基因即表明存在甲基化。
MSP分析的可靠性
為證實MSP分析可靠性，我們隨機挑選了2個分別用p16M和p16U引物擴增的PCR產(chǎn)物，經(jīng)克隆后測序，結(jié)果見圖2，證明第2輪MSP產(chǎn)物是p16基因啟動子區(qū)的部分序列，其分析結(jié)果完全可靠。甲基化的p16基因，其CpG中的C未被硫化改變，仍為C。而非甲基化序列沒有C，其C經(jīng)修飾后轉(zhuǎn)變成T。兩結(jié)果對比證實，有CpG二核苷酸存在于序列中則為甲基化的CpG，而有TpG存在于序列中則為非甲基化的CpG。
以上測序結(jié)果顯示p16基因啟動子5’端片段，非甲基化片段中所有的胞嘧啶都轉(zhuǎn)變成胸腺嘧啶，甲基化片段中CpG 二核苷酸的胞嘧啶保持不變。
討論
研究DNA甲基化的方法主要有甲基化敏感的限制性內(nèi)切酶酶切法和甲基化特異性PCR（MSP），早期使用的甲基化敏感性限制性內(nèi)切酶聯(lián)合Southern雜交技術(shù)需要大量高分子DNA，且只在相當(dāng)比例的等位基因甲基化的情況下才能檢測到，并且只能提供甲基化敏感限制性內(nèi)切酶能識別序列的CpG位點的信息，還可能因酶切不全而產(chǎn)生假陽性現(xiàn)象。用重亞硫酸鹽誘導(dǎo)基因組DNA氧化脫氨基的方法使胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶，而甲基化胞嘧啶不發(fā)生轉(zhuǎn)化的方法最早是由Frommer等［3］提出，后由Herman等［2］總結(jié)并改進形成現(xiàn)在的MSP法。其原理是用亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化未甲基化胞嘧啶成為尿嘧啶，并在隨后進行的PCR反應(yīng)過程中轉(zhuǎn)變成胸腺嘧啶，而甲基化胞嘧啶不發(fā)生這種轉(zhuǎn)化。這種方法適用于任何給定的基因組靶序列5’ 端CpG島甲基化的詳細(xì)分析。MSP法簡單、靈敏、特異性高，需要標(biāo)本量少，可以檢測比例為1/1000的甲基化的等位基因片段［2］，在此基礎(chǔ)上的改進方法巢式甲基化特異性PCR法比MSP法擴增倍數(shù)更大，它的靈敏度是MSP法的50倍，可以檢測出1/50 000的甲基化等位基因片段，即使 MSP法修飾DNA的過程中DNA降解了84％-96％［4］，僅剩余微量的DNA，巢式MSP仍然可以擴增出大量的目的片段，重復(fù)性強，很適合用于篩選p16基因啟動子區(qū)甲基化的腫瘤細(xì)胞株。此外，巢式MSP法先對待測區(qū)域進行一輪擴增，再對第1輪產(chǎn)物進行第2次擴增，與原來的MSP法直接對全長基因組進行特異性擴增相比，該法檢測的敏感性大為提高。
有證據(jù)表明，人類癌癥的發(fā)展過程與抑癌基因啟動子高甲基化及癌基因啟動子低甲基化有關(guān)［5-7］。p16基因在細(xì)胞周期的調(diào)控中起關(guān)鍵性負(fù)調(diào)控作用，其基因產(chǎn)物P16蛋白主要抑制CDK4介導(dǎo)的Rb基因蛋白產(chǎn)物的磷酸化，阻止細(xì)胞從G1期進入S期。而p16基因是目前已知大多數(shù)腫瘤中失活頻率最高的腫瘤抑制基因之一，其啟動子區(qū)甲基化在許多腫瘤中都是一個早發(fā)和頻發(fā)事件。目前已有實驗室對石蠟標(biāo)本、新鮮組織標(biāo)本和血標(biāo)本進行了p16基因啟動子甲基化方面的檢測，探討其用于腫瘤的輔助診斷的價值。p16基因啟動子區(qū)甲基化與否有可能成為腫瘤防治的一個重要的生物學(xué)標(biāo)記，而本研究主要使用巢式MSP檢測p16基因啟動子區(qū)CpG島甲基化狀態(tài)，篩選出基因啟動子高甲基化的的特定腫瘤細(xì)胞株作為藥物試驗理想的細(xì)胞模型，為研究基因組甲基化模式和進行藥物治療逆轉(zhuǎn)甲基化實驗打下基礎(chǔ)。
此外，本研究選取的細(xì)胞株有T淋巴細(xì)胞白血病（Molt4）、急性髓系白血病（HL-60）、慢性髓系白血?。↘562）、T細(xì)胞淋巴瘤（Jurkat淋巴瘤）、B細(xì)胞淋巴瘤（CA46，屬于Burkitt淋巴瘤）和骨髓瘤細(xì)胞株（U266），因此檢測結(jié)果具有一定的代表性意義。本研究發(fā)現(xiàn)，以上各種惡性血液病細(xì)胞株只在2種血液實體瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了甲基化p16，而非實體瘤細(xì)胞則沒有p16甲基化，特別是淋巴瘤中B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞出現(xiàn)p16甲基化，與文獻(xiàn)報道相符［7］，這似乎提示p16甲基化是血液病的實體瘤的特異性檢測指標(biāo)，同時由于B細(xì)胞淋巴瘤高發(fā)，因此它也可以用于鑒別淋巴瘤類型。
雖然如此，MSP法仍需不斷完善，由于MSP特異性引物只能依據(jù)已知基因啟動子序列來設(shè)計，因而現(xiàn)有的MSP法無法檢測到未知基因的甲基化狀態(tài)［8］，不能評估啟動子甲基化的整體水平［9］，所以MSP法仍有一定的局限性。目前檢測甲基化的方法仍在改進，相信不久的將來會有更多更好的方法用于研究基因的甲基化。
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關(guān)鍵詞：建筑電氣自動化控制技術(shù)；控制系統(tǒng)設(shè)計；發(fā)展前景
近年來，電氣自動化控制技術(shù)廣泛的在建筑行業(yè)中進行應(yīng)用，由于其通過編制程序?qū)υO(shè)備的運行進行設(shè)定，從而使其能夠?qū)崿F(xiàn)自動化的運行，這不僅有效的節(jié)省了大量的人力和物力，而且工作效率和勞動生產(chǎn)率也得到較大程度的提升，所以電氣自動化控制技術(shù)不僅是工業(yè)現(xiàn)代化發(fā)展水平的體現(xiàn)，而且將其在建筑行業(yè)中進行應(yīng)用，有效的提升建筑工程的質(zhì)量，推動了建筑行業(yè)的健康、持續(xù)發(fā)展。
1 建筑電氣自動化控制技術(shù)概述
1.1 電氣自動化控制技術(shù)的定義
目前電氣自動化技術(shù)得到不斷的提升，其以電動機為傳輸?shù)闹饕獎恿?，利用動力傳動裝置來實現(xiàn)運輸?shù)膫鬏敚谄浼夹g(shù)應(yīng)用中，電氣控制系統(tǒng)是其主要部分，不僅可以有效的實現(xiàn)組織生產(chǎn)，提升效益和效率的作用，而且是工業(yè)實現(xiàn)現(xiàn)代化的重要保障。該技術(shù)在建筑行業(yè)中的廣泛的應(yīng)用，是建筑實現(xiàn)智能化的有效技術(shù)保障，對推動建筑行業(yè)向現(xiàn)代化方向發(fā)展提供了堅實的動力支撐。
1.2 建筑電氣自動化控制技術(shù)的主要特征
隨著建筑電氣自動化控制技術(shù)的應(yīng)用，使建筑行業(yè)取得了長足的發(fā)展，不僅有效的提升了工程的質(zhì)量，而且是建筑工程向現(xiàn)代化方向發(fā)展的技術(shù)保障，所以在實際工程中，需要充分的發(fā)揮建筑電氣自動化控制技術(shù)的作用，需要我們對其基本特征有一個準(zhǔn)確的了解。建筑電氣自動化控制技術(shù)具有控制對象和信息量少、操作頻率低的特點，而且操作上不僅高效、快速，而且準(zhǔn)確性也較高，具有較好的抗干擾性及高可靠性，在運行過程中具有較多的連鎖保護，確保運行的穩(wěn)定性。
2 建筑電氣自動化系統(tǒng)的設(shè)計
2.1 設(shè)計的原則
在對建筑電氣自動化系統(tǒng)進行設(shè)計時，需要嚴(yán)格遵循實用性的原則，采用集成系統(tǒng)來增加系統(tǒng)運行的安全性，同時在設(shè)計時需要嚴(yán)格按照相關(guān)的設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)進行，還要對國外先進的經(jīng)驗進行借鑒和參考，增加設(shè)計時的科技投入，從而確保設(shè)計的建筑電氣自動化系統(tǒng)能夠正常、穩(wěn)定的運行。
2.2 設(shè)計的流程
建筑電氣自動化系統(tǒng)在進行設(shè)計時，需要充分的尊重客戶的需求，通過各種方式對客戶的需求進行記錄、分析，然后設(shè)計人員需要深入的對建筑電氣自動化系統(tǒng)進行研究，設(shè)計出不同的設(shè)計方案，通過各設(shè)計方案的比較分析，從而確定最佳的設(shè)計方案。
2.3 設(shè)計的要點
在進行建筑電氣自動化系統(tǒng)設(shè)計時，需要對其配電中心、中央監(jiān)控室、傳感器的布置進行充分的考慮，確保布局的科學(xué)性和合理性，應(yīng)該選擇在系統(tǒng)負(fù)荷中心較近的位置進行配電中心的調(diào)協(xié)，而中央監(jiān)控室則宜選擇在相對干燥的地方，而且要避開噪音大的地方。而為了方便管理和維護工作的需求，則需要將現(xiàn)場監(jiān)控器設(shè)置在相對集中的位置上，通常情況下以靠近傳感器的地方為宜，這樣不僅可以有效的減少布線的距離，降低成本，而且更便于對系統(tǒng)進行管理。而傳感器通常會選擇模擬輸出或是數(shù)字輸出的方式，選擇時要盡量選取抗電磁干擾能力較強的傳感器，如電壓傳感器和電流傳感器，而且為了避免發(fā)生斷電的情況，則需要準(zhǔn)備備用的電源，從而確保設(shè)備能夠處于正常的運行狀態(tài)。
2.3.1 采用集中監(jiān)控的方式
在對建筑電氣自動化控制系統(tǒng)進行設(shè)計時，可以采用集中監(jiān)控的方式，這就使設(shè)備的維護工作更為簡單，且采用集中監(jiān)控的方式使設(shè)計流程更為簡單。使用集中監(jiān)控的方式使所有設(shè)備都處于同一監(jiān)控系統(tǒng)下，從而使所有的電氣設(shè)備得到全方位、全天候的監(jiān)控，確保了設(shè)備的安全運行。同時，集中監(jiān)控的方式也縮短了電纜的距離，使得整個系統(tǒng)的運行較為穩(wěn)定。此外，操作人員應(yīng)按照設(shè)計的流程進行操作，以免操作失誤影響設(shè)備的運轉(zhuǎn)，從而造成經(jīng)濟損失。
2.3.2 采用遠(yuǎn)程監(jiān)控模式
目前，遠(yuǎn)程監(jiān)控方式也越來越多的運用到電氣自動化控制系統(tǒng)的監(jiān)控中，這種監(jiān)控方式的成本較低，且數(shù)據(jù)傳輸?shù)姆绞捷^為便利。但遠(yuǎn)程監(jiān)控方式也存在著一定的弊端，其通訊速度較慢以及與電氣的通訊量無法匹配，這在一定程度上影響了監(jiān)控的效果，使設(shè)備的運行情況得不到有效的監(jiān)控。因此，遠(yuǎn)程監(jiān)控方式不適合對大型設(shè)備進行監(jiān)控，為保證設(shè)備的正常運行，發(fā)揮監(jiān)控的作用，應(yīng)著力于提高建筑電氣自動化的控制水平。
2.3.3 現(xiàn)場總線監(jiān)控模式
現(xiàn)場總線監(jiān)督模式在建筑自動化控制系統(tǒng)中運用越來越普遍。目前，我國的現(xiàn)場總線監(jiān)控模式主要采用的系統(tǒng)為PLC和CPU，且各個裝置系統(tǒng)之間相互聯(lián)系緊密，為了提高建筑電氣自動化的控制水平應(yīng)采用中央控制器對裝置進行信息采集。這樣能有效保證系統(tǒng)運行的穩(wěn)定性，且使各個元件之間不受影響，這也是現(xiàn)場總線監(jiān)控模式的優(yōu)勢所在?，F(xiàn)場總線控制系統(tǒng)中的組態(tài)技術(shù)能使其所生成的算法不僅可以在智能設(shè)備上進行運行，而且還能使其在遠(yuǎn)程設(shè)備上運行。
3 建筑電氣自動化控制的發(fā)展前景
科技的不斷發(fā)展，建筑電氣自動化控制水平也得到了較快的發(fā)展，自動化控制也成為了建筑電氣自動化控制發(fā)展的必然趨勢。在Microsoft的Windows平臺越來越普及的背景下，可以很好的將網(wǎng)絡(luò)技術(shù)與其電氣技術(shù)結(jié)合起來，這有利于促進建筑工程電氣自動化的良好發(fā)展。計算機技術(shù)以及網(wǎng)絡(luò)技術(shù)在各個領(lǐng)域中運用得越來越廣，建筑電氣自動化控制已經(jīng)成了市場發(fā)展的必然趨勢。另外，實現(xiàn)IT平臺與自動化相結(jié)合也是順應(yīng)電子商務(wù)發(fā)展的趨勢。隨著網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的發(fā)展和多媒體技術(shù)的不斷普及，自動化控制技術(shù)在未來的發(fā)展中有著十分廣闊的前景。從建筑電氣自動化控制的發(fā)展現(xiàn)狀來看，自動化控制技術(shù)將應(yīng)用于多個領(lǐng)域中。此外，相關(guān)科研人員要根據(jù)實際情況對電氣自動化控制系統(tǒng)不斷的改進，使之更好的適應(yīng)社會發(fā)展的需要，在提高生產(chǎn)率的同時還要降低生產(chǎn)成本，從而有效擴大產(chǎn)品的市場占有率。
4 結(jié)束語
科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，使電氣自動化控制技術(shù)的水平也得到不斷的提升，建筑行業(yè)電氣自動化控制已成為其未來發(fā)展的趨勢，所以需要電氣設(shè)計人員在設(shè)計工作中嚴(yán)格依照相關(guān)的規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)，把握好設(shè)計中的每一個環(huán)節(jié)，并根據(jù)建筑的實際需要來進行建筑電氣自動化控制系統(tǒng)的設(shè)計，從而使建筑電氣自動化系統(tǒng)能夠在建筑行業(yè)中發(fā)揮應(yīng)用的作用。同時在設(shè)計工作中還需要加大科技的投入，不斷的提升設(shè)計的水平，確保設(shè)計出來的電氣自動化控制系統(tǒng)具有較高的科技含量，更好的提升建筑工程的質(zhì)量。
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