摘要:為了篩選到有效干擾牛叉頭框M1(forkhead box M1,FOXM1)基因特異性siRNA,試驗設(shè)計并合成3個靶向干擾牛FOXM1的5-羧基熒光素(FAM)標(biāo)記siRNA,對siRNA轉(zhuǎn)染劑量進行優(yōu)化,篩選出干擾效果較好的siRNA,并檢測干擾FOXM1后MDBK細(xì)胞中LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白的表達水平。結(jié)果表明:siRNA的最佳轉(zhuǎn)染劑量為1.5μL(20μmol/L),3個特異性siRNA的干擾效率分別為34.2%、52.0%及72.5%,干擾牛FOXM1基因效果最好的siRNA是siRNA-929,它能夠阻止細(xì)胞中LC3-Ⅰ型向LC3-Ⅱ型的轉(zhuǎn)化,使自噬過程受到抑制。說明試驗成功篩選到干擾牛FOXM1基因的特異性siRNA。
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