摘要：為明確半胱氨酸蛋白酶與定型根瘤衰老的相關(guān)性,通過(guò)與已鑒定的紫云英半胱氨酸蛋白酶AsNODf32進(jìn)行序列比對(duì)分析,從百脈根中鑒定出2個(gè)與根瘤衰老相關(guān)的蛋白酶基因LjCyp 1和LjCyp 5。蛋白序列及結(jié)構(gòu)分析表明,LjCyp1和LjCyp5同源性高達(dá)96.2%,均含有2個(gè)典型的半胱氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域和液泡定位信號(hào)肽,屬于木瓜蛋白酶家族。體外酶活檢測(cè)顯示,2個(gè)蛋白都具有半胱氨酸蛋白酶活性。通過(guò)Real-time PCR和組織化學(xué)定位分析表明,2個(gè)蛋白酶基因主要在成熟和衰老的根瘤中表達(dá)。結(jié)果表明LjCyp1和LjCyp5可能在百脈根根瘤衰老過(guò)程中發(fā)揮重要作用。