摘要：為探索植物呼吸爆發(fā)氧化酶(respiratory burst oxidase homologue,Rboh)基因家族在共生固氮中的功能和作用機(jī)制,利用分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和遺傳學(xué)等方法,圍繞百脈根Rboh基因家族中在根瘤中特異性表達(dá)的基因LjRbohA(Lj5g3v1497840)以及在根瘤中高表達(dá)的基因LjRbohB(Lj6g3v1549190)和LjRbohC(Lj5g3v1497820),分別對(duì)其蛋白的亞細(xì)胞定位、基因的表達(dá)模式、基因的啟動(dòng)子活性及蛋白的功能進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示:LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC蛋白都定位在植物的細(xì)胞膜上;LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC基因在接種根瘤菌后表達(dá)上調(diào);LjRobhA和LjRobhB基因在根瘤、維管束和側(cè)根原基表達(dá);利用CRISPR-Cas9技術(shù)對(duì)LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC 3個(gè)基因分別進(jìn)行敲除導(dǎo)致結(jié)瘤數(shù)目減少。這些研究結(jié)果表明,LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC這3個(gè)基因可能都參與調(diào)控百脈根與根瘤菌的共生結(jié)瘤過程。