摘要：本實驗通過建立CYP2C19*2、*3和*17基因多態(tài)性PCR反應(yīng)體系和條件,篩選出4μL體系中各因素最佳水平。采用SNaPshot技術(shù)對CYP2C19基因3個SNP位點*2、*3和*17同時進行復(fù)合擴增檢測,利用L9(34)正交實驗設(shè)計,對影響PCR反應(yīng)體系和條件的3個因素(PCR Mix, Taq DNA聚合酶,循環(huán)次數(shù))在3個水平上進行優(yōu)化,結(jié)果采用綜合評分法和極差分析法進行分析。用3組已知樣本對正交優(yōu)化所得條件進行重復(fù)性和穩(wěn)定性驗證。結(jié)果表明CYP2C19*2、*3和*17基因PCR擴增體系的影響因素依次為:PCR Mix>循環(huán)數(shù)>Taq DNA聚合酶。最佳反應(yīng)體系為PCR Mix 2.0μL、Taq DNA聚合酶0.2μL、循環(huán)次數(shù)32次。3組樣本驗證效果滿意。優(yōu)化的CYP2C19*2、*3和*17基因PCR反應(yīng)體系穩(wěn)定性高,重復(fù)性和經(jīng)濟性較好,為該基因多態(tài)性的大規(guī)模調(diào)查奠定了基礎(chǔ)。