摘要:目的探討miR-199a-3p對(duì)體外培養(yǎng)SD大鼠BRL-3A增殖的影響.方法人工合成miR-199a-3p模擬物、miR-199a-3p阻遏物及其各自陰性對(duì)照載體,分別轉(zhuǎn)染BRL-3A肝細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后12 h、24 h、48 h和72h,應(yīng)用定量PCR分析細(xì)胞中Cyclin D1和PCNA mRNA表達(dá)水平,免疫組化方法觀測(cè)Cyclin D1和PCNA陽(yáng)性細(xì)胞比率,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞各周期比例和CCK 8法檢測(cè)細(xì)胞增殖.實(shí)驗(yàn)分4組:mimics組,mi-nc組,inhibitors組和in-nc組.結(jié)果轉(zhuǎn)染后24 h、48 h、72 h,inhibitors組肝細(xì)胞Cyclin D1和PCNA mRNA表達(dá)水平較in-nc組顯著增多(P〈0.05),而mimics組肝細(xì)胞Cyclin D1和PCNA mRNA表達(dá)水平較mi-nc組顯著降低(P〈0.05).inhibitors組肝細(xì)胞Cyclin D1和PCNA陽(yáng)性細(xì)胞比率均高于mi-nc組(P〈0.05),而mimics組肝細(xì)胞Cyclin D1和PCNA陽(yáng)性細(xì)胞比率均低于mi-nc組(P〈0.05).inhibitorss組肝細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞比例明顯低于in-nc組(P〈0.05),而mimics組肝細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞比例明顯高于mi-nc組(P〈0.05).同時(shí),inhibitors組肝細(xì)胞S期細(xì)胞比例明顯低于mi-nc組(P〈0.05)和in-nc組(P〈0.05).inhibitors組肝細(xì)胞增殖能力明顯高于in-nc組(P〈0.05),mimics組肝細(xì)胞增殖能力明顯低于mi-nc組(P〈0.05).結(jié)論 miR-199a-3p能夠延長(zhǎng)大鼠BRL-3A肝細(xì)胞周期和抑制肝細(xì)胞增殖,其作用可能與抑制Cyclin D1和PCNA的表達(dá)有關(guān).
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