摘要：目的利用Red重組系統(tǒng)敲除鮑曼不動桿菌ATCC17978的asaA。方法設(shè)計上下游引物中包含asaA的同源序列,并以pKD4質(zhì)粒為模板,擴增含有卡那霉素抗性基因的DN段。將該片段轉(zhuǎn)化于表達重組酶的17978感受態(tài)細胞中,在卡那霉素篩選壓力下,得到經(jīng)兩次同源雙交換的具有卡那霉素基因標(biāo)記的突變菌株。隨后,在重組酶的作用下將抗性基因去除,最終得到無抗性基因標(biāo)記的突變菌株ΔasaA。結(jié)果通過該重組系統(tǒng),首先將卡那霉素抗性基因的DN段替換了基因組中asaA的DN段,然后將卡那霉素抗性基因的DN段消除,最終獲得了asaA缺失的突變體。結(jié)論通過Red重組系統(tǒng)為鮑曼不動桿菌中其他基因的缺失突變提供方法與思路。