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連接蛋白43在遠(yuǎn)端缺血預(yù)處理防治兔脊髓缺血再灌注損傷中對(duì)血脊髓屏障的作用及機(jī)制

作者:張燕; 張雙霜; 胡霽; 袁芬; 劉嬌; 戴軍 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬梨園醫(yī)院; 武漢480077

摘要:目的:探討連接蛋白43(Cx43)在遠(yuǎn)端缺血預(yù)處理(RIPC)防治兔脊髓缺血再灌注損傷(SCIRI)中對(duì)血-脊髓屏障(BSCB)的作用及機(jī)制。方法:36只健康日本大耳白兔,按照完全隨機(jī)數(shù)字法分為3組(每組12只):假手術(shù)組(Sham組)、缺血再灌注損傷組(I/R組)、遠(yuǎn)端缺血預(yù)處理組(I/R+R組)。分別于恢復(fù)灌注后48h行后肢神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分,HE染色觀察脊髓組織病理變化及正常運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元數(shù)量,TUNEL凋亡染色觀察脊髓組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況,伊文思藍(lán)(EB)檢測(cè)血脊髓屏障的通透性,熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)脊髓組織Cx43mRNA水平,Western blot檢測(cè)脊髓組織Cx43、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)及基質(zhì)金屬蛋白酶-2/9(MMP-2/9)蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:與Sham組比較,I/R組后肢神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分顯著降低(P〈0.05),脊髓結(jié)構(gòu)損傷嚴(yán)重,凋亡神經(jīng)細(xì)胞數(shù)明顯增加(P〈0.01),血脊髓屏障滲透性明顯增加,Cx43 mRNA及Cx43、TNF-α、IL-1β和MMP-2/9蛋白表達(dá)均顯著增加(P〈0.05);與I/R組比較,I/R+R組后肢神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分增高(P〈0.05),脊髓損傷較輕,正常運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元數(shù)量增加(P〈0.05),凋亡神經(jīng)性細(xì)胞數(shù)明顯減少(P〈0.05),血脊髓屏障滲透性明顯降低,Cx43mRNA及Cx43、TNF-α、IL-1β和MMP-2/9蛋白表達(dá)均顯著減少(P〈0.05)。結(jié)論:RIPC可以保護(hù)SCIRI時(shí)BSCB的完整性,減輕脊髓損傷,改善后肢神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能,其保護(hù)機(jī)制可能與RIPC抑制Cx43的表達(dá),從而下調(diào)TNF-α、IL-1β及MMP-2/9蛋白表達(dá)水平有關(guān)。

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