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DEAE-Sepharose FF 純化脊髓灰質(zhì)炎病毒Sabin株Ⅰ型穩(wěn)定性研究

作者:高承剛; 李衛(wèi)東; 楊曉蕾 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所; 云南昆明650018

摘要:目的觀察離子交換純化脊髓灰質(zhì)炎病毒Ⅰ型Sabin株穩(wěn)定性,以研究病毒純化的回收率和質(zhì)量控制。方法使用微載體培養(yǎng)Vero細(xì)胞和脊灰病毒Ⅰ型Sabin株,經(jīng)過逐級(jí)過濾澄清和100K超濾膜濃縮,再經(jīng)凝膠介質(zhì)初步純化后的病毒液,然后觀察經(jīng)過離子介質(zhì)DEAE Sepharose FF層析純化5批次的純化效果。對(duì)每次純化獲得的病毒液測(cè)定D抗原、蛋白質(zhì)含量、牛血清白蛋白含量、DNA殘留量以評(píng)價(jià)其質(zhì)量。結(jié)果凝膠純化后的病毒液,經(jīng)離子介質(zhì)DEAE Sepharose FF純化,其D抗原、蛋白質(zhì)含量、牛血清白蛋白含量、DNA殘留量和比活性的批間差異不顯著(P>0.05)。結(jié)論離子介質(zhì)DEAE Sepharose FF在一定批次內(nèi)純化脊灰病毒工藝穩(wěn)定。

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