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細(xì)菌誘導(dǎo)光滑鱉甲幼蟲(chóng)抑制差減cDNA文庫(kù)的構(gòu)建與分析

作者:劉忠淵 王鵬 毛新芳 新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 新疆生物資源基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 新疆烏魯木齊830046

摘要:本研究以光滑鱉甲幼蟲(chóng)的cDNA為材料,應(yīng)用抑制差減雜交(Suppression Subtractive Hybrriization,SSH)技術(shù)構(gòu)建細(xì)菌誘導(dǎo)的光滑鱉甲幼蟲(chóng)抑制差減cDNA文庫(kù),并利用反向Northern雜交技術(shù)獲得差異基因.結(jié)果表明,隨機(jī)挑取的陽(yáng)性克隆的大小均為20(0~750 bp,符合差減文庫(kù)PCR產(chǎn)物片段的大小.通過(guò)斑點(diǎn)雜交技術(shù)共篩選出940個(gè)差異基因片段,對(duì)其克隆、測(cè)序及同源性分析后鑒定出70種編碼蛋白的基因ESTs序列,所得ESTs序列主要涉及免疫防御、代謝過(guò)程、生長(zhǎng)發(fā)育類等相關(guān)基因.細(xì)菌誘導(dǎo)光滑鱉甲幼蟲(chóng)抑制差減cDNA文庫(kù)的構(gòu)建,為進(jìn)一步克隆光滑鱉甲免疫抗菌相關(guān)基因及其免疫防御機(jī)制的研究奠定了基礎(chǔ).

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新疆大學(xué)學(xué)報(bào)·哲學(xué)人文社會(huì)科學(xué)版

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