摘要：目的:本研究旨在探討miR-367-3p對(duì)BCG介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和自噬途徑的調(diào)控的影響及其可能的作用機(jī)制。方法:采用卡介苗菌株BCG感染小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7,RT-PCR檢測(cè)miR-367-3p與SMURF1mRNA的表達(dá);Westernblot檢測(cè)SMURF1、凋亡相關(guān)蛋白及自噬相關(guān)蛋白表達(dá)水平;菌落形成單位(CFU)計(jì)數(shù)檢測(cè)BCG生存率;運(yùn)用ELISA技術(shù)檢測(cè)巨噬細(xì)胞凋亡率;雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)、RT-PCR及Westernblot法驗(yàn)證miR-367-3p與SMURF1之間的靶向調(diào)控關(guān)系。結(jié)果:BCG感染誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞RAW246.7中miR-367-3p高表達(dá),并呈時(shí)間依賴性。此外,下調(diào)miR-367-3p明顯降低BCG感染的巨噬細(xì)胞的存活率,并促進(jìn)巨噬細(xì)胞凋亡,同時(shí)下調(diào)抑凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)且上調(diào)促凋亡蛋白Bax的表達(dá)水平。另外,抑制miR-367-3p表達(dá)明顯增加巨噬細(xì)胞中LC3-Ⅱ表達(dá)水平,同時(shí)降低p62的表達(dá)量,從而加強(qiáng)細(xì)胞的自噬水平。生物信息學(xué)分析顯示SMURF1是miR-367-3p的靶基因。雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)、RT-PCR及Westernblot結(jié)果證實(shí)miR-367-3p可靶向作用于SMURF1-3′-UTR并負(fù)調(diào)控其表達(dá)。結(jié)論:下調(diào)miR-367-3p通過靶向調(diào)控SMURF1可促進(jìn)巨噬細(xì)胞凋亡和自噬進(jìn)程,進(jìn)而介導(dǎo)了BCG的免疫逃逸從而抑制胞內(nèi)BCG的生存,提示miR-367-3p有望成為結(jié)核感染的診斷標(biāo)志物和治療性疫苗的靶標(biāo),可為結(jié)核病的基因診斷和治療提供參考。