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核酸適配體聯(lián)合流式細(xì)胞術(shù)定量檢測創(chuàng)傷弧菌方法的建立

作者:劉德婧; 胡波; 彭定發(fā); 歐陽生群; 王梁華; 焦炳華 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室; 上海200433

摘要:目的建立快速、準(zhǔn)確定量檢測創(chuàng)傷弧菌的方法。方法將修飾有5’-FITC熒光標(biāo)簽的,能夠與創(chuàng)傷弧菌高親和力,強(qiáng)特異性結(jié)合的核酸適配體與流式細(xì)胞技術(shù)聯(lián)合,實(shí)現(xiàn)創(chuàng)傷弧菌的快速檢測。通過對不同濃度創(chuàng)傷弧菌菌液的重復(fù)檢測,測定該檢驗(yàn)方法的空白限、檢測限、線性范圍等。結(jié)果核酸適配體聯(lián)合流式細(xì)胞技術(shù)可快速檢測創(chuàng)傷弧菌,檢測時(shí)長〈1 h,檢測下限最低可達(dá)29 CFU/mL。結(jié)論創(chuàng)傷弧菌適配體是優(yōu)秀的檢測元件,流式細(xì)胞技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的定量檢測,該檢測方法有很大的應(yīng)用潛力。

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