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甲醇周期誘導(dǎo)控制強化畢赤酵母生產(chǎn)豬α干擾素

作者:嚴建; 賈祿強; 丁健; 史仲平 江南大學(xué)生物工程學(xué)院工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室; 無錫214122

摘要:利用甲醇營養(yǎng)型畢赤酵母生產(chǎn)豬α干擾素(pIFN-α),誘導(dǎo)過程一般在高細胞密度、定值控制甲醇濃度于5~10g/L下進行,此時、溶解氧濃度(DO)自然下降到接近于0的水平。如果高好氧的畢赤酵母長期處在高甲醇/低DO的誘導(dǎo)濃度環(huán)境會導(dǎo)致其代謝活性惡化,胞內(nèi)甲醇積累嚴重,pIFN-α表達生產(chǎn)效率低。為此,提出了一種甲醇周期誘導(dǎo)控制策略來強化pIFN-α生產(chǎn)。先將甲醇控制于高濃度達7h,再降低甲醇流加速率,將DO控制在20%左右約4h,一共重復(fù)6個循環(huán)。采用上述周期控制策略,畢赤酵母代謝活性可以長期維持在較高水平;胞內(nèi)甲醇處于極低水平(≤ 0.003g/g DCW),解除了甲醇毒性效應(yīng);pIFN-α活性達到3.90×10^7IU/ml的最高水平,是定值控制甲醇濃度時的1.86倍。

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