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大鼠臍血來源單個(gè)核細(xì)胞誘導(dǎo)為內(nèi)皮祖細(xì)胞的免疫熒光檢測

作者:王福科; 劉流; 趙德萍; 何曉光; 代曉明; 李逸松; 李玉曉 昆明醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院頭頸外科; 昆明650032; 昆明醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心; 昆明650032

摘要:目的臍血(umbilical cord blood,UCB)中含有大量內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs),內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,有分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞的能力,為骨組織工程血管化帶來新的途徑。本實(shí)驗(yàn)研究大鼠臍血來源的單個(gè)核細(xì)胞體外誘導(dǎo)為EPCs的可能性。方法分離大鼠臍血單個(gè)核細(xì)胞,血管內(nèi)皮誘導(dǎo)液(添加10%胎牛血清,1%青霉素,1%鏈霉素,VEGF20ug/L,IGF-12ug/L,bFGF2ug/L,EGF20ug/L)培養(yǎng)分化,于3周、6周進(jìn)行免疫熒光染色檢測貼壁細(xì)胞CD34、CD133、Flk-1、vWF表面標(biāo)志。結(jié)果培養(yǎng)三周單個(gè)核細(xì)胞CD34、CD133、Flk-1、vWF抗體免疫熒光檢測均為陽性;六周免疫熒光染色可見CD34、Flk-1、VWF組為陽性,CD133組部分為陽性,陰性對照組未發(fā)現(xiàn)陽性細(xì)胞。結(jié)論大鼠臍血來源的單個(gè)核細(xì)胞在體外誘導(dǎo)3周可以分化為EPCs,6周部分細(xì)胞分化為成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞。

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