摘要:目的研究流感病毒NYMC BX-51B株在MDCK細(xì)胞上連續(xù)傳代的遺傳穩(wěn)定性。方法將SPF級(jí)雞胚制備的流感病毒NYMC BX-51B尿囊液毒株接種至MDCK細(xì)胞上,連續(xù)傳代培養(yǎng)至10代(M1~M10),參照《中國(guó)藥典》三部(2015版)毒種檢定方法進(jìn)行支原體和無(wú)菌檢查、外源因子檢查、鑒別試驗(yàn),并進(jìn)行血凝試驗(yàn)和病毒滴度檢測(cè)。提取尿囊液、M1代、M10代病毒總RNA,RT-PCR法擴(kuò)增血凝素(hemagglutinin,HA)和神經(jīng)氨酸酶(neuraminidase,NA)基因,并進(jìn)行測(cè)序。結(jié)果流感病毒NYMC BX-51B株在MDCK細(xì)胞上連續(xù)傳代培養(yǎng)至M10代,血凝滴度最高可達(dá)1∶256,病毒滴度最高可達(dá)6. 5 LgCCID50/mL;鑒別試驗(yàn)、無(wú)菌檢查、支原體檢查、外源因子檢查結(jié)果均符合藥典要求。尿囊液、M1代、M10代病毒的HA和NA基因的氨基酸序列與GenBank中登錄的流感病毒NYMC BX-51B的HA和NA基因比對(duì)結(jié)果完全一致。結(jié)論 NYMC BX-51B型流感病毒在MDCK細(xì)胞基質(zhì)上連續(xù)傳代培養(yǎng)至M10代,遺傳穩(wěn)定性良好,為MDCK細(xì)胞基質(zhì)流感疫苗的研究和生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。
注:因版權(quán)方要求,不能公開(kāi)全文,如需全文,請(qǐng)咨詢(xún)雜志社
國(guó)際刊號(hào):1673-1581
國(guó)內(nèi)刊號(hào):33-1356/Q