摘要：本研究根據(jù)非洲豬瘟病毒(ASFV)基因組中序列保守穩(wěn)定的B646L基因設(shè)計(jì)特異性引物和探針,建立了敏感、特異、高效的ASFV核酸RPA快速檢測法。結(jié)果顯示,該方法特異性強(qiáng),能準(zhǔn)確檢測ASFV核酸,與豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖與呼吸綜合征(PRRSV)、豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV2)、口蹄疫病毒(FMDV)、豬A型塞內(nèi)卡病毒(SVA)等滅活病毒核酸無交叉反應(yīng);敏感性高,本試驗(yàn)中最低可檢測到2×101copies/uL;檢測時(shí)間短,15 min即可完成反應(yīng);重復(fù)性好。采用ASFV滅活抗原和豬血液制備模擬臨床豬血樣品,能檢出滅活抗原的稀釋度為1∶12 800,應(yīng)用該方法對200份進(jìn)口凍豬產(chǎn)品及供港豬場420份豬抗凝血進(jìn)行檢測,結(jié)果均為陰性,與OIE推薦的實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測結(jié)果相同。本研究建立的RPA快速檢測法操作簡便,尤其適合ASFV現(xiàn)場快速檢測。