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應(yīng)用原代軟骨細(xì)胞與SW1353軟骨肉瘤細(xì)胞系建立體外骨關(guān)節(jié)炎模型的效果評價(jià)

作者:劉曉彤; 黃悅; 劉旭丹; 徐小磊; 姜夢琪; 楊迎春; 何健宜; 顧海倫; 劉莉 中國醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生教研室; 沈陽110100; 中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院骨科; 沈陽110004

摘要:目的通過比較白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)處理對原代軟骨細(xì)胞與SW1353軟骨肉瘤細(xì)胞系增殖活力、炎癥因子與炎癥通路表達(dá)水平變化的影響,為骨關(guān)節(jié)炎體外研究用細(xì)胞提供多重選擇。方法免疫細(xì)胞化學(xué)法與甲苯胺藍(lán)染色分別檢測細(xì)胞中Ⅱ型膠原與蛋白多糖,鑒定所培養(yǎng)的原代細(xì)胞是否為軟骨細(xì)胞。CCK-8法檢測IL-1β(10ng/ml)處理24h、48h、72h對原代軟骨細(xì)胞增殖活力的影響,IL-1β(1、10、20、40ng/ml)處理24h對SW1353軟骨肉瘤細(xì)胞系增殖活力的影響。IL-1β(10ng/ml)分別處理原代軟骨細(xì)胞與SW1353軟骨肉瘤細(xì)胞系細(xì)胞24h后,ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中白細(xì)胞介素6(interleukin-6,IL-6)與基質(zhì)金屬蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表達(dá)水平。Real-time PCR法檢測核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA表達(dá)水平。結(jié)果所培養(yǎng)的原代細(xì)胞為原代軟骨細(xì)胞。IL-1β(10ng/ml)處理可顯著抑制原代軟骨細(xì)胞增殖活力,但I(xiàn)L-1β(1、10、20、40 ng/ml)處理對SW1353軟骨肉瘤細(xì)胞系增殖活力無明顯影響。IL-1β(10ng/ml)處理可使IL-6、MMP-13表達(dá)水平及NF-κB mRNA的表達(dá)量均顯著增加。結(jié)論IL-1β作用下原代軟骨細(xì)胞與SW1353軟骨肉瘤細(xì)胞系均可表現(xiàn)出骨關(guān)節(jié)炎樣炎癥反應(yīng),二者均可用于骨關(guān)節(jié)炎的體外實(shí)驗(yàn)研究。

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中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)

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