摘要：目的 觀察重組人白細胞介素1受體拮抗劑（IL-1Ra）和轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）雙基因在體外對兔骨關(guān)節(jié)炎（OA）的治療效果.方法 取新西蘭大白兔關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)酶消化分離原代培養(yǎng)軟骨細胞,并采用特異性細胞外基質(zhì)Ⅱ型膠原免疫細胞染色進行鑒定.軟骨細胞分為轉(zhuǎn)染IL-1Ra組（A組）、轉(zhuǎn)染TGF-β1組（B組）、轉(zhuǎn)染IL-1Ra＋TGF-β1雙基因組（C組）、未轉(zhuǎn)染組（D組）、空白組（E組）.A、B、C 3組均以LipofectamineTM 2000 Reagent脂質(zhì)體為轉(zhuǎn)染媒介.各組加入軟骨塊與軟骨細胞共培養(yǎng),除E組外,其余各組均加入20 ng IL-1β,轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)后分別在12、24 h、2、4、6 d通過熒光顯微鏡觀察軟骨細胞轉(zhuǎn)基因的表達.于共培養(yǎng)第2,4、6天后應(yīng)用放射免疫分析（RIA）分別檢測各組IL-1β和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的含量.結(jié)果 成功分離培養(yǎng)軟骨細胞,Ⅱ型膠原免疫細胞染色顯示細胞胞質(zhì)染成棕黃色.胞核基本不著色.熒光顯微鏡下A、B、C組均有綠色熒光蛋白的表達,轉(zhuǎn)染后24 h,3組細胞的轉(zhuǎn)染率最高分別為（16.16＋2.71）%、（16.54±2.91）%、（17.20±2.39）%,第2天后隨時間的延長轉(zhuǎn)染率逐漸降低.同時間點IL-1β水平D組＞B組＞A組＞C組＞E組;而第2、6天TNF-α水平D組＞A組＞B組＞C組＞E組,第4天E組＞A組＞B組＞C組＞D組,其中A組雖然略高于B組,但差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義,其余各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義.A、B、C組的IL-1β和TNF-α在第6天的水平明顯低于第2、4天,D、E組IL-1β水平不隨時間的延長而改變,TNF-α水平D組在第4天時最低,E組則最高.結(jié)論 轉(zhuǎn)染IL-1Ra和TGF-β1基因均有降低炎性因子水平的作用.聯(lián)合應(yīng)用轉(zhuǎn)染IL-1Ra和TGF-β1基因可能控制炎性反應(yīng),為體外OA的基因治療提供實驗基礎(chǔ).