摘要：目的探討腸道病毒病毒71型衣殼蛋白VP1誘導(dǎo)EV71感染患兒外周血T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生干擾素-γ(IFN-γ)應(yīng)答特征。方法收集2010年9月至2011年12月西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院和西安市兒童醫(yī)院住院的EV71感染手足口病患兒共31例,根據(jù)臨床特征分為3組:急性感染期組(16例)、臨床恢復(fù)期組(9例)和感染恢復(fù)后1個(gè)月組(6例);另外,選取10例健康兒童為對(duì)照組。通過重疊肽技術(shù)合成覆蓋EV71衣殼蛋白VP1 36條重疊肽段作為抗原,采用IFN-γ酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)分析法(ELISPOT)和磁珠分選法(MACs)體外檢測(cè)各組患兒EV71 VP1特異性CD4~+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞免疫應(yīng)答特征。結(jié)果急性感染期組有4例(25%)患兒對(duì)VP1蛋白存在T細(xì)胞免疫反應(yīng),臨床恢復(fù)期組5例(56%)患兒對(duì)VP1蛋白存在T細(xì)胞免疫反應(yīng),其中EV71感染臨床恢復(fù)期組患者反應(yīng)強(qiáng)度最強(qiáng),顯著高于急性感染期,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-2.042、P=0.041),而感染恢復(fù)后1個(gè)月組和對(duì)照組均未檢測(cè)到T細(xì)胞免疫反應(yīng),臨床恢復(fù)期組患者T細(xì)胞反應(yīng)強(qiáng)度顯著高于感染恢復(fù)后1個(gè)月組(Z=-2.105、P=0.035)和對(duì)照組(Z=-2.633、P=0.008),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;提示EV71感染患兒VP1蛋白被識(shí)別的頻率(即例數(shù))隨著臨床癥狀及體征消失而消失。VP1蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答以特異性CD4~+T細(xì)胞為主導(dǎo);篩選確定了8個(gè)EV71 VP1蛋白區(qū)CD4~+T細(xì)胞表位。結(jié)論 EV71感染患兒在發(fā)病期對(duì)VP1蛋白存在特異性T細(xì)胞反應(yīng),且以特異性CD4~+T細(xì)胞為主導(dǎo);篩選確定EV71感染患兒VP1蛋白的CD4~+T細(xì)胞表位有助于闡明EV71感染的細(xì)胞免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制。