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常溫機(jī)械灌注修復(fù)長時間冷保存供肝的大動物實驗研究

作者:李建輝; 賈俊君; 姜驪; 周燕飛; 李浩宇; 俞浩; 謝海洋; 周琳; 鄭樹森 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院肝膽胰外科; 杭州310003; 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院衛(wèi)生部多器官聯(lián)合移植研究重點實驗室; 杭州310003

摘要:目的探索常溫機(jī)械灌注(NMP)在挽救大動物邊緣供肝中的價值。方法 6只雄性、10 ~12月齡巴馬小型豬分為靜態(tài)冷保存(SCS)6 h組和SCS 24 h組,每組3只,分別于供肝獲取后SCS 6 h、24 h后進(jìn)行2 h NMP復(fù)蘇?;诤商mOrgan Assist公司Liver Assist系統(tǒng)和供體豬自身血液,整合四通道生理儀器及自制灌注管路搭建NMP平臺。在NMP過程中分別于灌注0、15、60、90、120 min 5個時間點收集灌注液用于肝功能(ALT、AST)檢測及血?dú)夥治觯╬ H、氧分壓)。灌注結(jié)束取肝左葉相同位置少許組織,以10%甲醛固定,用于后續(xù)HE染色。結(jié)果 NMP開始時,SCS 24 h組ALT、AST水平略高于SCS 6 h組,之后AST、ALT水平均緩慢上升。NMP開始時SCS 24 h組p H值中位數(shù)為7.28,氧分壓中位數(shù)為46 mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa,下同),均低于SCS 6 h組(7.36,52 mm Hg),經(jīng)過2 h NMP后SCS 24 h組p H值和氧分壓逐漸接近甚至優(yōu)于SCS 6 h組。HE染色發(fā)現(xiàn),灌注前SCS 24 h組肝臟充血嚴(yán)重,炎性細(xì)胞浸潤明顯;NMP 2 h后,肝臟充血明顯改善、炎性細(xì)胞減少,與SCS 6 h組無明顯差異。結(jié)論基于Liver Assist系統(tǒng)和供體豬自身血液成功搭建的NMP平臺,可有效改善長時間冷保存的邊緣供肝質(zhì)量,提示NMP在修復(fù)邊緣供肝、擴(kuò)展供肝來源方面具有重要臨床及基礎(chǔ)研究價值。

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