摘要：目的:采用酵母雙雜交技術,篩選PRR11的相互作用蛋白,為深入研究其分子行為機制奠定基礎。方法:構建用于酵母雙雜交篩選的PRR11誘餌質(zhì)粒并檢測其自激活作用,根據(jù)結果進一步構建突變體獲得具有較低自激活作用的突變體。對人胎腦cDNA文庫進行篩選,獲得初始陽性克隆。通過LacZ報告基因檢測、回轉(zhuǎn)驗證、陽性克隆測序及BLAST序列比對分析,排除假陽性克隆和重復克隆,確定PRR11的候選相互作用蛋白。結果:PRR11具有自激活作用,構建了一個較低自激活作用的PRR11突變體。通過酵母雙雜交篩選,獲得102個初始陽性克隆轉(zhuǎn)化子。經(jīng)LacZ報告基因檢測,將陽性克隆鎖定至39個。通過測序和序列比對分析,證實這39個克隆屬于編碼15種不同蛋白的基因。最終有RNF41等4個蛋白通過回轉(zhuǎn)驗證。結論:RNF41、SCG5、BCYRN1和PRR13是PRR11的潛在相互作用蛋白。