摘要：目的:制備特異性的梔子苷(Geniposide,GEN)單克隆抗體。方法:采用高碘酸鈉氧化法合成梔子苷免疫抗原,通過(guò)對(duì)BALB/c小鼠進(jìn)行免疫;對(duì)血清進(jìn)行檢測(cè)陽(yáng)性后,取上述免疫小鼠的脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞SP2/0-Ag14按10∶1的比例融合;用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法和有限稀釋法進(jìn)行單克隆雜交瘤細(xì)胞的篩選;用陽(yáng)性細(xì)胞株誘導(dǎo)制備腹水抗體;用辛酸硫酸銨法純化抗體,并進(jìn)行交叉反應(yīng)檢測(cè)。選擇血清效價(jià)高且敏感性好的小鼠,采用雜交瘤細(xì)胞技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞融合,篩選分泌梔子苷單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株;采用體內(nèi)誘生腹水法制備梔子苷單克隆抗體,并通過(guò)正辛酸純化的方法純化腹水中抗體蛋白,采用SDS-PAGE法對(duì)抗體蛋白的純化純度進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:獲得了能分泌抗梔子苷單克隆抗體穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞株。SDS-PAGE結(jié)果說(shuō)明經(jīng)過(guò)純化腹水中大量的雜蛋白能夠被除去,獲得的梔子單克隆抗體純度較高,純化后腹水中抗體效價(jià)與純化前比均為60000∶1左右。結(jié)論:成功獲得了能分泌梔子苷單克隆抗體穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞株,特異性、靈敏度都比較高,為樣品中的梔子苷快速微量檢測(cè)及免疫親和色譜柱的制備奠定了基礎(chǔ)。